白香丹胶囊对PMDD肝气逆证模型大鼠海马NMDAR1亚基蛋白分布及表达的影响

目的：以PMDD肝气逆证模型大鼠为载体,研究PMDD肝气逆证的病机以及白香丹胶囊对本病的干预机制。方法：改进情志刺激为主多因素分段刺激造模法,复制PMDD肝气逆证大鼠模型;用白香丹胶囊和氟西汀分散片予以干预,最后进行旷场实验评价模型;免疫荧光技术和蛋白印迹技术检测大鼠海马CA1、CA3区NMDAR1受体亚基分布情况及表达水平。结果：模型组大鼠与正常组相比较,其旷场实验的运动总距离明显增加（P<0.001）、中央区域的进入次数及停留在中央区域的时间显著减少（P<0.01）,海马CA1、CA3区细胞呈现稀疏杂乱的分布状态,且同氟西汀组一样,其NMDAR1蛋白表达量明显降低;白香丹组大鼠与模型组相比较,其旷场实验的运动总距离明显降低（P<0.05）、中央区域的进入次数和停留在中央区域的时间明显增多（P<0.05）,而氟西汀组与之相比,除了运动总距离明显降低（P<0.05）,其它指标不存在显著性差异,同氟西汀组一样,白香丹组大鼠海马CA1、CA3区细胞分布、排列无显著异常,但其NMDAR1蛋白表达量显著升高（P<0.0001）;氟西汀组大鼠与白香丹组相比较,其NMDAR1蛋白表达量明显降低（P<0.05）。结论：情志刺激为主多因素分段刺激造模法对大鼠学习记忆能力的损伤机制可能与大鼠海马CA1、CA3区神经细胞的减少和NMDAR1亚基的表达量降低有关,白香丹胶囊通过调整NMDAR1蛋白表达量纠正上述异常改变,从而改善大鼠的学习记忆能力。     

基于FP-tree增长算法的影响愤怒郁怒人群睡眠质量的强关联因素挖掘

目的：基于频繁模式树（Frequent Pattern-tree,FP-tree）增长算法挖掘影响愤怒郁怒人群睡眠质量的强关联因素。方法：设计了构造FP-tree的算法和挖掘频繁项集的算法,采用FP-Tree增长算法,通过状态树记录扫描的数据库信息,通过减少项目集的搜索空间,一次扫描数据库生成满足最小支持度要求的频繁项目集,实现了情志病证数据库对愤怒郁怒人群影响睡眠质量各种强关联因素的挖掘。结果：影响愤怒郁怒人群睡眠质量最频繁的关联因素是呼吸不畅、咳嗽或鼾声高、感觉冷、感觉热或做噩梦,程序分析总的时间是2 s。结论：基于FP-tree的频繁项集挖掘算法能有效实现对情志病证数据库海量数据中有用信息的针对性挖掘。     

对经前焦虑证肝气逆证多情交织情志刺激择时分段刺激造模的认识

受今社会环境影响,社会精神心理问题日益加剧,经前焦虑证(Premenstrual Dysphoric Disorder,PMDD)呈现高发病率态势,患病率为7.3%。相关研究虽愈加深入,但病因仍不明确。研究显示,情志间的协同致病及相互影响更为多见,多情志交织共同致病更加符合流行病学和临床实际,大样本情志病证调查发现,多情交织共同致病高达88.97%,其中女性发病高达74.1%,而目前研究多局限于中医自身的基础理论,且多集中在单一情绪,同时许多临床样本的不可获取性,使得动物实验研究更具优势。基于此采用情志刺激为主的多因素分段刺激法,复制动物模型,通过行为学指标评测,探查PMDD的发病机理,为治疗PMDD提供新思路,进一步促进相关理论发展,推进经前期综合征研究进程。     

丹皮酚对PMDD肝气逆证模型大鼠焦虑样行为及其神经内分泌功能的影响＊

目的 观察丹皮酚对经前烦躁障碍症（Premenstrual Dysphoric Disorder，PMDD）肝气逆证模型大鼠行为学和孕酮（P）、四氢孕酮（ALLO）、海马脑区GABA_ARα4 mRNA和蛋白表达的影响、以探讨其作用机制。方法 将大鼠分为正常组（Control）、模型组（Model）、模型+丹皮酚低剂量组（Model+6.05）、模型+丹皮酚中剂量组（Model+12.11）、模型+丹皮酚高剂量组（Model+24.23）、模型+氟西汀组（Model+FLX），运用攻击行为测试（RIT）、旷场实验（OFT）、高架十字迷宫实验（EPM）等检测大鼠的焦虑样行为，ELISA检测血清及海马P、ALLO的含量，通过免疫荧光和PCR检测海马脑区GABA_ARα4的蛋白定位和mRNA的表达。结果 与正常组相比，模型组OFT的Center distance（中央区运动路程）、Center time（中央区停留时间）显著下降（P<0.05，P<0.001），相比模型组，氟西汀组OFT的Center time（中央区停留时间）显著上升（P<0.05）；与模型组相比，氟西汀组和丹皮酚中剂量组进入EPM开放臂次数和时间百分比明显上升（P<0.05，P<0.01，P<0.05，P<0.001）；与模型组相比，丹皮酚中剂量组血清中P、ALLO的含量显著增加（P<0.001，P<0.01），丹皮酚高剂量组血清中ALLO含量明显升高（P<0.05）；与模型组相比，丹皮酚中剂量组海马脑区中P含量显著升高（P<0.01）；各给药组海马脑区中ALLO含量明显增加（P<0.01、P<0.001、P<0.0001、P<0.001）；与正常组相比，模型组GABA_ARα4蛋白含量显著性降低（P<0.05），相比模型组，丹皮酚低剂量组和丹皮酚中剂量组显著性降低（P<0.05，P<0.05）；与正常组相比，模型组海马脑区内GABA_ARα4 mRNA表达显著性升高（P<0.01）。结论 丹皮酚可有效改善PMDD肝气逆证大鼠焦虑样行为，且中剂量用药可发挥更明显的疗效，其作用机制可能与纠正P、ALLO、GABA_ARα4 有关。     

情绪反应动物模型的研究进展

情绪在日常生活中对人的影响巨大,而情绪反应引发疾病并影响其发展的机制尚未清晰。为追本求源,情绪反应动物模型的建立显得尤为重要。但是从情绪模型诞生起,就存在造模方法的缺陷,如存在躯体的应激。同时,模型的评价也不尽客观。而寻找其解决方法对于完善模型和扩大模型的应用极为重要。现对常见的情绪反应动物模型的造模方法和评价方法进行综述,以期为情绪反应动物模型的研制提供可资借鉴的思路与方法学参考。     

昆明小鼠旷场实验评价方法的三维结构

目的 探讨旷场实验(Open Field Test,OFT)作为昆明小鼠行为学评价方法的结构维度.方法成年雄性昆明小鼠放入旷场箱正中央格,摄像系统记录5 min的行为变化,实验间隔1周进行2次;采用因子分析进行分析评价,实验参数如下:中央区停留时间百分率( Ctime％)、中央区水平运动百分率( Ccross％)、水平运动(Cross)、垂直运动(Rear)和粪便粒数(FB).结果 Ctime％与Ccross％ (P=0.756,P ＜0.001:Pearson=0.869,P＜0.001)、Rear(P=0.694,P＜0.01;Pearson=0.465,P＜0.05)及Cross与Rear(P=0.599,P＜0.01:Pearson =0.739,P＜0.001)初测重测均具有较好组内相关性;Ctime％ (P=0.586,P＜0.01)、Ccross％(P=0.559,P＜0.05)、Cross(P=0.633,P＜0.01)、Rear(P=0.612,P＜0.01)初测重测均具有较好相关性;OFT所有参数初测重测可提取三个公因子:Ctime％、Ccross％对焦虑因子F1贡献大(Loading％:43.34％,48.56％),Cross、Rear对运动探索因子F2贡献大(Loading％:27.94％,29.30％),FB对情绪因子F3贡献大(Loading％:21.95％,15.93％);F1、F2((P=0.567,P＜0.01;Pearson =0.538,P＜0.05)初测重测相关性亦较好.结论 OFT作为昆明小鼠行为学评价方法,具有三维结构:焦虑因子维度、OFT活性因子维度(运动探索因子)和情绪因子维度.     

证候动物模型质量考核的思路与方法

为解决困扰证候动物模型评价的客观性和有效性问题,文章提出了动物模型质量考核概念,并对其内涵和外延作了相应界定。结合证候动物模型评价中若干实践经验,着力阐述质量考核的思路及方法,以期为解决该关键问题提供一个可能的切入点。     

经前平颗粒干预经前期综合征肝气逆证患者尿液代谢组学研究

目的:运用代谢组学方法,研究PMS肝气逆证患者尿样代谢物变化及经前平颗粒对其干预作用,探索与PMS肝气逆证发病机理密切相关的代谢组学特征和小分子标志化合物.方法:按照诊断标准、纳入标准、排除标准等纳入PMS肝气逆证病例.应用UPLC-Q-TOF结合PCA模式分析,对PMS肝气逆证患者不同时间点尿样进行代谢组学分析,区分代谢轮廓并寻找可能的生物标记物及代谢通路.结果:对照组、PMS肝气逆证组、PMS肝气逆证治疗组经前尿样代谢轮廓存在明显差异.PMS肝气逆证组经前尿样代谢轮廓显著偏离时照组经前、经后及PMS肝气逆证组经后尿样.PMS肝气逆证组尿样较对照组N-乙酰谷氨酸-γ-半醛显著降低;组氨酸、香草扁桃酸显著升高.结论:本研究首次从代谢组学角度研究了PMS肝气逆与对照组及给药组的代谢模式差异,经前平颗粒可以显著修复PMS肝气逆证内源性小分子代谢紊乱.从微观代谢物角度印证了PMS肝气逆证患者经前系列症状及"经前症状,经后消失"的特点.     

5-HTR1A 基因在经前期综合征肝气郁证模型大鼠下丘脑区的表达

目的 通过研究5-羟色胺受体1A (5-HTR1A)基因在经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑区的表达,探讨该证的发病机制及药物作用靶点.方法 束缚法制备PMS肝气郁证模型大鼠,经前舒颗粒干预,获得正常组、造模组、给药组;运用RT-PCR和Western Blotting方法检测大鼠下丘脑区5-HTR1A mRNA及其蛋白表达;应用软件SPSS 16.0,通过单因素方差分析及LSD法统计数据.结果 PMS肝气郁证模型组大鼠与正常组相比,下丘脑5-HTR1A mRNA及蛋白表达均显著降低;经前舒颗粒给药后与造模组相比,表达均显著升高;给药组与正常组相比,表达均无显著差异.结论 肝气郁证模型大鼠与正常大鼠相比,下丘脑5-HTR1A基因表达下降,通过经前舒颗粒干预后,恢复正常;说明5-HTR1A基因可能与PMS肝气郁证相关,并且可以作为经前舒颗粒治疗该证的作用靶点.