肿瘤患者化疗药物相关单核苷酸多态性分布分析

目的探索我院肿瘤患者化疗药物相关单核苷酸多态性(SNPs)的分布特征,为临床药师开展以化疗药物相关SNPs为基础的肿瘤患者个体化用药指导提供参考。方法采用荧光原位杂交技术通过荧光标记的特异性探针检测化疗药物相关SNPs,回顾性分析北京大学肿瘤医院2016年4月~2018年12月肿瘤患者的化疗相关SNPs的分布特征。采用SPSS24.0软件统计相关基因位点的等位基因和基因型的频率分布差异,分析基因分布是否符合Hardy-Weinberg平衡。参照国外不同人群的基因型频率数据,探讨中国肿瘤患者化疗药物相关SNPs的分布特征。结果主要检测2554例肿瘤患者6大类化疗药物17个化疗药物相关基因位点,其中CYP2D6(100C>T)、ABCB1(2677T>G)不符合Hardy-Weinberg平衡,其余15个基因位点均符合Hardy-Weinberg平衡。DPD、CYP2D6、UGT1A1的SNPs与国外人群存在较大差异,与国内报道基本相符。结论中国肿瘤患者化疗药物相关SNPs分布有自身特点,临床药师应根据化疗药物相关SNPs提供个体化用药指导建议。基于药物基因组学的个体化用药,在参考PharmGKB等国际数据库的同时,国人的基因SNPs解读应结合国人的特点,不能完全参考国外人群数据库。     

一例NPHP1纯合缺失所致的Joubert综合征

患儿,男,因"6月龄竖头欠稳"于浙江大学医学院附属儿童医院康复科就诊。查体发现双眼追视欠灵活,竖头欠稳,不会翻身,双手握拳,双下肢负重差,四肢肌张力低。磁共振结果显示小脑蚓部小,中脑呈"磨牙状"改变,诊断为Joubert综合征。全外显子组测序及Sanger测序发现患儿存在AHI1基因的杂合移码突变(c.533_534delAA),该突变位点遗传自母亲;而针对已知致病基因的拷贝数变异分析提示NPHP1基因可能存在纯合型缺失。经多重连接探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)方法进行验证,结果表明患儿的NPHP1基因确实存在纯合型缺失,且父母均为NPHP1杂合缺失的携带者。这是国内首次报道的由NPHP1纯合缺失所导致的Joubert综合征病例。由于NPHP1基因突变与肾脏损害相关性较高,应注意对此类突变患儿的密切随访。     

MiR-483在人稽留流产胎盘绒毛组织中表达模式

目的研究人不同年龄阶段稽留流产(MA)胎盘绒毛组织中miR-483的表达模式,分析其与稽留流产的关系。方法通过把研究对象按照1∶1匹配的方法,将2013年1月至2014年12月期间在石家庄市第六医院进行治疗的稽留流产患者以及同期正常人工流产孕妇进行分组,即为稽留流产组(80例)和对照组(80例);依据年龄差异,将两个组别进一步分为4个亚组,依次为:年龄≤25岁组、26～30岁组、31～35岁组、≥36岁组,分别利用qRT-PCR方法和原位杂交定量和定性分析miR-483在人稽留流产胎盘绒毛组织中的表达与定位。结果 qRT-PCR检测发现与对照组相比,在≤25岁组和26～30岁组MA患者胎盘绒毛组织中miR-483的表达量均显著下调(P均0.01),在31～35岁组MA患者绒毛组织中miR-483的表达量显著增加(P0.05),在≥36岁组MA患者绒毛组织中没有明显变化。进行个体化分析发现,在≤25岁组中,100%MA患者miR-483表达显著降低(P均0.01);在26～30岁组,80%MA患者miR-483表达显著下调(P均0.05);而在31～35岁组和≥36岁组,miR-483的表达没有明显规律。原位杂交检测显示miR-483表达与胎盘绒毛合体滋养层和间质细胞。结论 miR-483在小于30岁人稽留流产患者胎盘组织中表达下调,提示其可能与稽留流产发生相关。     

2017-2022年北京市奈达铂不良反应分析

目的 分析北京市各医疗机构上报的奈达铂不良反应报告,探讨其发生的一般规律和特点,为临床合理、安全用药提供参考依据。方法 收集2017-2022年北京市各医疗机构上报的188例奈达铂不良反应报告,对不良反应类别、患者性别和年龄、原患疾病和过敏史、用药情况、发生时间、累及器官/系统及主要临床表现、临床转归等进行分析。结果 188例不良反应中,男性106例(56.38%),女性82例(43.62%);61~80岁患者不良反应发生率最高,为94例(50.00%);101例不良反应(53.72%)发生在24h内;不良反应累及器官/系统以全身反应最多(85例次,33.60%),其次为血液系统、消化系统、呼吸系统;不良反应痊愈和好转的有181例(96.28%)。结论 在应用奈达铂治疗前,应对肿瘤患者的基本情况和用药史等进行综合评估,制订合理用药方案,在给药过程中防范速发型不良反应的发生,完成治疗后要及时进行相关实验室检查,尽早发现和干预迟发型不良反应,从而优化合理用药,保障患者用药安全有效。     

3D打印胶原/羟基磷灰石支架对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用研究

目的探讨3D打印胶原/羟基磷灰石支架对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用。 方法分离SPF级雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞,实验分为：对照组、浸提组、诱导组及浸提诱导组,MTT法检测对照组,浸提组的细胞增殖情况,对比分析各组细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性,对各组细胞诱导培养17天后进行茜素红染色,观察钙结节染色情况。 结果MTT结果显示,浸提组与对照组在不同时间点的OD值比较,差异无统计学意义（P>0.05）,ALP活性结果显示,不同时间点各组与对照组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;不同时间点浸提诱导组与浸提组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;诱导组在48 h及72 h与浸提组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）。茜素红染色结果显示,对照组细胞无钙结节点,浸提组及诱导组镜下肉眼可明显观察到红色区域染色,镜下观察可见钙结节点,浸提诱导组所产生的钙结节点的数量、大小以及染色的颜色深度均明显优于其他各组。 结论3D打印胶原/羟基磷灰石支架具有生物相容性好,可促进BMSCs向成骨分化,对细胞毒性低等特点,适宜用作骨缺损的治疗。     

胸腺基质淋巴细胞生成素基因多态性与子痫前期的相关性研究

目的探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)位点rs1898671、rs2289278,rs2289276及rs764916基因多态性与妊娠妇女子痫前期发生的相关性。方法收集2012年11月至2013年6月中国医科大学附属盛京医院分娩的孕妇384例。其中病例组181例,对照组203例,病例组又分为子痫前期轻度组(97例)和子痫前期重度组(84例)。选取TSLP4个位点(rs1898671,rs2289276,rs2289278 and rs764916),利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDITOF MS)技术分析该基因的4个位点。结果各临床资料在病例组与对照组比较中差异均有统计学意义(P0.05),子痫前期轻度组与对照组比较中除年龄外其他各临床资料比较,差异均有统计学意义(P0.05),子痫前期重度组与对照组以及子痫前期轻度组比较中各临床资料差异均有统计学意义(P0.05)。位点rs1898671等位基因频率在病例组与对照组中差异有统计学意义(P=0.043,OR=2.682,95%CI 1.020~7.054)。结论 TSLP位点rs1898671基因多态性与子痫前期的发病可能具有相关性。等位基因T为子痫前期的危险性等位基因。     

2010至2012年31省2120131名育龄妇女孕前营养指标趋势分析

目的 分析2010至2012年中国育龄妇女孕前营养状况的变化趋势.方法 研究人群为2010年1月1日至2012年12月31日参加“国家免费孕前优生健康检查项目”覆盖的31个省、市、自治区220个试点县的21～49岁育龄妇女,共2 120 131人.研究孕前营养指标主要包括体质量指数(BMI)、血红蛋白含量(HB)和空腹血糖(FBG).结果 2010至2012年总体上中国育龄妇女孕前平均HB含量持续升高,而孕前平均BM1和FBG水平呈逐年下降趋势.将3个孕前营养指标测定的结果均分为4类,各类构成人群均主要分布在25 ～34岁年龄组.孕前低BMI人群发生率逐年增加,从2010年10.4％(31 649/304307)增加到2012年14.14％(114 159/807 131);孕前超重人群及肥胖人群均在2012年发生率最低,分别为10.65％(85 984/807 131)和2.32％(18 735/807 131).孕前低血糖发生率由2010年5.45％(16 581/304307)降至2012年5.23％(42 199/807 131);孕前空腹血糖受损及糖尿病发生率逐年降低,分别从2010年3.17％ (9 652/304 307)和1.64％(4 982/304307)降至2012年2.71％(21 875/807 131)和1.05％(8 505/807 131).孕前轻度及中重度贫血的发生率在逐年下降,分别从2010年12.29％和0.95％降至2012年9.62％和0.78％;孕前高HB含量人群也呈现不断下降趋势.2010至2012年中国育龄妇女3个孕前营养指标的变化趋势在4个分类中均差异有统计学意义(P ＜0.001).结论 中国育龄妇女总体孕前营养状况良好,肥胖、贫血及糖尿病的发生率呈逐年下降趋势.     

曲安奈德联合透明质酸钠治疗膝关节骨性关节炎的Meta分析

目的系统评价使用曲安奈德联合透明质酸钠治疗膝关节骨性关节炎的有效性。 方法依据Meta分析要求，对CBM、CNKI、PubMed、Springer、Embase、万方、维普、Cochrane Library、中国科技论文统计与分析网、专利数据库等进行检索，严格评价纳入以曲安奈德联合透明质酸钠作为主要干预措施，治疗膝关节骨性关节炎的研究文献质量，并收录相关有效的数据资料，检索年限从建库至2019年03月运用Review Manager5.3、Stata/MP 15.1对总有效率和Lysholm膝关节评分进行Meta分析。 结果最终纳入18篇文献，受试者共1576人，16篇文献报道了总有效率，5篇报道了Lysholm膝关节评分。对于膝关节骨性关节炎的治疗，曲安奈德联合透明质酸钠的总有效率（95% CI：2.79~5.25，P<0.01）高于透明质酸钠；Lysholm膝关节评分（95% CI：0.84~1.65，P<0.01）优于透明质酸钠，差异均有统计学意义。 结论在治疗膝关节骨性关节炎时，曲安奈德联合透明质酸钠具有更高的总有效率，治疗后的膝关节功能评分要优于单独使用透明质酸钠。     

脐血单核细胞体外高效扩增NK细胞方法的研究

目的建立1种使用脐血单核细胞(UCBMC)制备较高纯度自然杀伤(NK)细胞的体外高效扩增方法,并初步鉴定扩增后的NK细胞杀伤肿瘤细胞(K562)的能力。方法 6人份脐血标本来自北京妇产医院,取20 mL/份、采用密度梯度离心法分离脐血中的UCBMC,提取后的UCBMC以1×10~6个/mL细胞在4 mL含有白细胞介素(IL)-2、IL-12、IL-15和IL-21的X-VIVO15中培养5 d,期间于d2和d3添加等体积含上述细胞因子的新鲜培养基; 800 g离心将细胞后转入含1 000 IU/ml IL-2和50 ug/mL L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的X-VIVO15培养基中继续培养至14 d,800 g离心收获细胞。无血清RPMI1640重悬后通过台盼蓝染色法做细胞计数测定细胞的扩增倍数;流式细胞仪检测NK细胞重要表面标志物(CD56和CD16等)及与杀伤功能相关的重要分子[CD158a、CD158b、CD158e/k、CD69、CD314(NKG2D)、CD94、CD335(NKp46)、CD337(NKp30)、CD62L、CD226(DNAM-1)、CD57和CD336(NKp44)]的表达情况;胞内染色结合流式细胞仪测定细胞杀伤重要效应分子Perforin和Granzyme B的表达情况,并以乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测扩增后的细胞对K562细胞的杀伤能力。结果 6份UCBMC培养14 d:活细胞总数从培养前的4×106个扩增至(3. 6—5. 5)×10~8个,扩增倍数91—137(116±13. 1); CD3-CD56+细胞(NK细胞)占比85. 6%—95. 5%(90. 2±3. 4)%;培养得到的NK细胞表面除表达CD56分子外,还表达CD16(91. 2±2. 6)%、CD158a(71. 4±4)%、CD158b(52. 1±2. 2)%、CD158e/k(50. 3±6. 9)%、CD69(95. 6±2. 8)%、CD314(NKG2D)(94. 2±1. 7)%、CD94(94. 1±2. 1)%、CD335(NKp46)(26. 6±4. 1)%、CD337(NKp30)(94. 6±1. 5)%、CD62L(12. 8±3. 4)%、和CD226(DNAM-1)(97. 6±1. 3)%,以及CD57(4. 2±0. 9)%和CD336(NKp44)(7. 1±1)%。胞内染色结果显示:90%扩增产物(细胞)内表达与NK细胞杀伤功能相关的Perforin(86. 9±2. 7)%和Granzyme B(94. 1±2. 9)%;体外细胞杀伤试验:扩增的细胞对K562在效靶比为5∶1和10∶1时对靶细胞(K562)具有明显的杀伤作用。结论成功建立了1种从UCBMC不经纯化直接制备高纯度NK细胞的方法——其培养的细胞中表达了NK细胞重要的功能性分子,对K562细胞具有杀伤能力。