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1.
鲤鱼精巢DNA对果蝇和小鼠寿命的影响   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的研究鲤鱼精巢DNA对动物寿命的影响。方法采用黑腹果蝇和NIH小鼠作实验对象,于果蝇培养基或小鼠饮水中掺入一定浓度的鲤鱼精巢DNA,每天观察动物生活状况,并记录动物死亡情况,将实验结果作统计学处理并进行组间t检验;绘出动物的时间-存活率曲线(即存活曲线)。结果鲤鱼精巢DNA使果蝇和小鼠的最小寿命、半数存活时间、平均存活时间、最大寿命都得以延长;DNA给药组动物的存活曲线越位于空白对照组动物的存活曲线的右侧。结论鲤鱼精巢DNA可明显延长果蝇和小鼠的寿命。  相似文献   
2.
采用放射配基结合分析法及光亲和标记技术研究家兔脑前叶皮质苯二氮受体的动力学特征及其分子基础。[~3H]FNP与突触体膜P_2饱和结合的Hill系数为0.74,Scatchard分析为双曲线型。低温(0℃)条件下的动力学显示表观不均一性,但提高温度至25℃时,结合与解离过程均符合一位点反应模型。P_2膜制备与[~8H]FNP光亲和标记后进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳仅见一条放射性区带,其表观分子量为56000±1600道尔顿。实验结果提示家兔前叶皮质中苯二氮受体可能以二种不同亲和力的构象存在。  相似文献   
3.
目的:通过聚氨酯表面偶联重组蛇毒纤溶因子rF Ⅱ来提高其纤溶活性。方法:在聚氨酯(PU)表面上涂覆含羧基硬段的聚氨酯溶液(PU1)制备羧基化表面聚氨酯(CPU),并用次甲基蓝吸附法测定表面羧基含量;在CPU表面上用EDC接枝双端氨基聚乙二醇(PEG),并用滴定法测定该表面的PEG接枝量;在CPU-PEG表面用EDC偶联重组蛇毒纤溶因子(rF Ⅱ),并用放射性同位素法测定该表面的rF Ⅱ偶联量,最后用试管定量法评价样品的纤溶活性。结果:CPU表面羧基含量为6.9μmol/cm^2,CPU-PEG2k和CPU-PEG4k表面PEG含量分别为0.162和0.180μmol/cm^2,CPU-PEG2k-^125Ⅰ-rFⅡ和CPU-PEG4k^125Ⅰ-rFⅡ表面rF Ⅱ含量分别为13.6和38.9ng/cm^2,与对照样品相比都有很大的提高。纤溶活性评价表明,所有偶联rF Ⅱ样品的纤溶活性都有提高,抗血栓性能得到有效改善。结论:具有PEG间隔臂偶联rF Ⅱ的样品其纤溶活性比没有PEG间隔臂的样品更优,采用PEG4k间隔臂偶联rF Ⅱ样品的纤溶活性为最高。  相似文献   
4.
中枢神经元凋亡模型的建立及其信号转导   总被引:12,自引:3,他引:9  
程序性细胞死亡是多细胞机体在发育吕调控机体正常生理功能的重要机制。日益增多的语气表明,某些中枢神经系统疾病的发生与发展涉及到神经元的程序性死亡。应用体外去极化条件下,原代培养的小脑颗粒神经元,经复极化处理可以诱导黄型的神经元程序性死亡。研究发现,小脑中 神经质谷氨酸和乙酰胆碱,育 笥的受体调节神经元的程序性死亡。从而提示,神经质在传导神经冲动的同时,也特异性地传导神经元的生存信号。进一步的实验证明  相似文献   
5.
6.
目的筛选分离低钾诱导的小脑颗粒细胞凋亡的差异表达基因。方法采用低钾处理的小脑颗粒细胞,抽提细胞总RNA,用荧光法mRNA差异显示技术分离差异表达基因,并对差异表达基因片段进行回收、克隆,经反向RNA印迹及RT鄄PCR技术验证。结果发现51条差异片段,成功克隆8个片段,其中2个未知功能的基因片段证实在低钾诱导的小脑颗粒细胞凋亡中表达增加。结论mRNA差异显示法是分离差异表达基因的一个良好的工具,分离出的差异基因与神经细胞凋亡有关。  相似文献   
7.
C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.[结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列.  相似文献   
8.
目的 通过比较抗肿瘤坏死因子 (TNF) α单克隆抗体Remicade治疗强直性脊柱炎(AS)病人前后的膝关节滑膜细胞的基因谱变化 ,筛选出Remicade效应相关的差异表达基因 ,并探讨其在AS发病机制中的意义。方法 用 5例活动期AS病人在Remicade治疗前和 3个月后 (每次 5mg/kg ,第 0、2、6、12周静脉注射 ,以后每 8周用 1次 )的膝关节滑膜细胞 ,提取总RNA ;微阵列基因检测用含 1176个基因的cDNA芯片进行 ;数据用GeneSpring 5 1软件进行基因差异表达和聚类分析。结果  5例AS病人在Remicade治疗前后滑膜细胞基因差异表达和变化趋势总体聚类分析结果显示基因谱相关性强。用K mean聚类分析 ,其中第 5组与炎症相关密切的基因主要包括细胞因子、金属蛋白酶、黏附分子、与凋亡和致癌有关基因、受体、信号转导有关基因等。再按基因功能聚类 ,其中在致癌基因组共有 10个基因。比较AS病人治疗前后的关节滑膜细胞基因表达差异有显著性的基因(P <0 0 5 )共 4 5个 ,其中下调基因 4 4个 ;治疗后下调的基因主要包括三组 :①Th1细胞因子干扰素(IFN) γ ;②黏附分子 (VCAM 1、ICAM 1,Integrinβ4 ) ;③金属蛋白酶家系成员 3、7、8、11(MMP 3、7、8、11)和金属蛋白酶抑制体 (TIMP) 1。多数致炎基因包括TNF α、白细胞介素 (IL)  相似文献   
9.
T4 DNA连接酶介导的5'RACE法克隆大鼠Nor1全长cDNA   总被引:1,自引:1,他引:0       下载免费PDF全文
目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/LKCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5'RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5'端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5'RACE扩增出2.5kb序列后,75AEST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5'RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T4DNA连接酶介导的5'RACE是一种效率较高的克隆mRNA5'端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。  相似文献   
10.
哺乳类动物脑内发现特异的、高亲和力的BZ受体是近年来神经科学领域中的一项重要进展。迄今的大量研究提示,BZ受体存在种属差异,研究不同种属中BZ受体的特性,有助于阐明其生物学功能。本文应用放射配基受体结合分析法研究家兔脑内BZ受体的特性、分布及与GABA受体的关系。  相似文献   
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