益气逐瘀解毒颗粒调控 MMPs/TIMPs 平衡抗大鼠肝纤维化作用研究

目的:探讨益气逐瘀解毒颗粒对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及机制。方法:将SD雄性大鼠给予CCl4橄榄油混合液进行皮下注射7周,制备肝纤维化大鼠模型,随机分为益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组、阳性对照组、模型组、空白组,给予相应治疗,5周后处死大鼠,检测外周血生化指标,逆转录-定量PCR法和蛋白印迹法分别检测大鼠肝组织中基质蛋白酶1 (Matrix metalloproteinase1, MMP-1)、MMP-2、MMP-9、MMP-13及基质蛋白酶抑制因子1 (tissue Inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)表达水平,肝组织苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining, HE染色)、MASSON染色检测肝纤维化程度。结果:治疗后与空白组比较,模型组的ALT、AST无显著性差异(P 0.05),MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达显著降低(P 0.05),TIMP-1基因表达显著升高(P 0.05),肝纤维化半定量计分(SSS)评分显著升高(P 0.01);与模型组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达明显升高(P 0.05),中剂量组MMP-9、MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),低剂量组MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达量无显著性差异(P 0.05),高、中剂量组MMP-13蛋白表达量显著升高(P 0.05),各剂量组TIMP-1蛋白表达量均显著下降(P 0.05),以低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),各药物干预组SSS评分显著降低(P 0.01);与阳性对照组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-2基因表达明显升高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中剂量组MMP-13蛋白表达显著升高(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组TIMP-1蛋白表达显著降低(P 0.05),低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组SSS评分显著降低(P 0.01)。结论:调控MMPs/TIMPs平衡可能是益气逐瘀解毒颗粒抗肝维化的作用机制之一,其通过升高MMP-13、降低TIMP-1表达水平,调控MMPs/TIMPs平衡,促进过度沉积的细胞外基质(Extracelluar matrix,ECM)降解,改善CCl4诱导肝纤维化大鼠模型的肝脏功能,从而改善其肝纤维化程度。     

损伤性肾匀浆体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞转分化效果及可能机制的研究

目的：利用损伤性肾匀浆体外模拟急性肾损伤的微环境,探讨骨髓间充质干细胞（BM SC ）诱导转分化及其可能机制。方法将体外培养的BM SC用10％大鼠缺血再灌注损伤肾匀浆上清液进行培养。7 d后从形态学改变、18型角蛋白（CK‐18）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形态发生蛋白‐7（ BM P‐7）的相应表达水平。结果损伤肾匀浆诱导7 d后,骨髓间充质干细胞形态发生明显变化,并检测到CK‐18阳性表达;同时被诱导的HGF和BMP‐7表达水平明显升高。结论损伤肾匀浆可诱导BMSC部分向肾小管上皮样细胞转分化,其可能机制是BMSC可能以旁分泌的形式产生了 HGF和BMP‐7等“肾脏保护因子”。     

PEDF、END 在UUO 肾组织的表达及ADSCs 对其的影响

目的 动态观察大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）肾组织中色素上皮衍生因子（PEDF）及内皮抑素（END）的变化,以及脂肪干细胞（ADSCs）对其的影响。方法 复制UUO 动物模型,以ADSCs 进行干预,选取UUO 术后第3、7 和14 天为时间点,观察大鼠在UUO 后肾损伤及纤维化的进程,以及PEDF 和END蛋白的表达变化。结果 肾损伤、纤维化程度及PEDF 的表达随梗阻时间延长而加重或增加。END 在术后先增加后降低,但仍高于对照组。ADSCs 干预在各个时间点均能使END 和PEDF 的表达降低。结论 UUO后PEDF 和END 蛋白表达上调可能是梗阻后微血管损伤、血管生成调节异常介导的微血管闭塞产生的重要机制之一。ADSCs 干预可通过抑制PEDF 和END 的表达,促进损伤血管的修复和新生血管的生成。     

大鼠脂肪干细胞分离培养及细胞表型的研究

目的：分离、培养和冻存大鼠脂肪干细胞,并对其相关的细胞表型进行研究,为利用脂肪干细胞治疗梗阻性肾病肾纤维化等实验提供依据。方法取大鼠3只,经消毒麻醉,采集其腹股沟处脂肪组织分离培养其中的脂肪干细胞,用相差倒置显微镜观察细胞生长方式及形态变化。取第三代细胞用流式细胞仪作细胞免疫表型的鉴定。冻存复苏后再次检测干细胞生长情况及表型。结果大鼠脂肪组织中含有大量间充质干细胞,原代培养的ASCs呈小圆形或星形,经传代后的脂肪干细胞形态比较均一,呈长梭形,个别略呈多角形、漩涡样生长。其细胞表型为CD29、CD44高表达,CD73、CD105中等程度表达,CD34极低表达。脂肪干细胞经低温冻存3个月,复苏后,生长活力和存活率与冻存前未见明显区别,CD44和CD29检测与冻存前表达率也一致。结论建立了一种脂肪干细胞的有效分离、培养及保存方法,并对其表面标志物进行鉴定,为利用脂肪干细胞进行进一步的实验研究提供了依据。     

小儿烫伤并发十二指肠穿孔一例

患儿男 ,2岁。因热液烫伤 5 0ｈ入院 ,院外未行补液。查体 :体温不升 ,脉搏 :15 6次 /ｍｉｎ ,呼吸 :2 8次 /ｍｉｎ。面色苍白 ,四肢冷 ,口干 ,尿量 7ｍｌ/ｈ ,反应差。创面分布于面、颈、胸及双上肢。血Ｎａ :12 3ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｋ :45 7ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｌ-:92ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｈｂ :12 6 ｇ/Ｌ。诊断 :(1) 18%ＴＢＳＡⅡ度烫伤 (2 )低血容量性休克。立即补液抗休克 ,抗感染 ,预防性使用甲氰咪胍 0 .2 ｇ静脉滴注 2次 /ｄ ,休克得以纠正。入院第 3天 ,呕吐淡红色血性胃内容物约 10 0ｍｌ,黑便及暗红色血便 4次 ,共约 5 0 0 ｇ ,并出现腹胀但腹…     

血塞通致过敏反应2例

血塞通注射液在临床应用于脑梗死,脑血管病后遗症,眼前房出血等。无明显毒副反应未见报道有过敏反应发生。本人曾遇到2例,现报道如下,希引起同道注意。例1:患者女,47岁,因右侧肢体麻木,言语笨拙5ｄ就诊,体检:Ｂｐ240/16.0ＫＰａ,神清,右侧肢体痛,温觉迟钝,心、肺、腹无异常。即用血塞通(昆明制药股份有限公司制造)400ｍｇ加入5%葡萄糖500ｍｌ静滴,05ｈ后出现全身瘙痒、大片风团,立即停药;静注糖酸钙、地塞米松等抗过敏治疗,皮疹消退。例2:患者女,42岁,因言语笨拙,舌体麻木3ｄ余就诊,体检:Ｂｐ21.0/12.0ＫＰａ,神清、伸舌居中,无震颤及萎缩,…     

2a基因型丙型肝炎病毒体外感染人 CD4＋T 细胞模型的建立

目的：建立2a基因型丙型肝炎病毒（ HCV）体外感染CD4＋T细胞模型。方法密度梯度离心法从抗HCV阴性健康个体的外周血提取外周血单核细胞（ PBMC）,从PBMC中分选CD4＋T细胞,HCV病毒颗粒感染CD4＋T细胞,逆转录聚合酶链反应（ RT－PCR）检测HCV RNA,免疫印迹法（ Western blot ）检测HCV的NS3和NS5A蛋白。结果感染后的CD4＋T细胞中,RT－PCR检测到HCV RNA,Western blot检测HCV的NS3和NS5A蛋白。结论成功建立2 a基因型HCV体外感染CD4＋T细胞模型,为进一步研究HCV慢性持续性感染的机制奠定基础。     

2型糖尿病与肠癌的关系

近年来,2型糖尿病、肠癌在中国发病率均逐年升高。有研究表明,2型糖尿病与肠癌的发生发展密切相关。本文就2型糖尿病致肠癌的发生机制、2型糖尿病合并肠癌患者合理降糖治疗方面展开讨论。     

复方叶下珠胶囊体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

目的研究复方叶下珠胶囊的体外抗乙型肝炎病毒（HBV）的作用。方法将HepG2.2.15细胞分为空白对照组、阳性对照组和不同浓度的复方叶下珠胶囊组,用CCK-8检测细胞毒性,酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBsAg和HBeAg;荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞内、外的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）。结果复方叶下珠胶囊有明显的抗HBV作用,尤其当浓度为50mg/mL时,减少血清中的HB-sAg作用与拉米夫定组相当;当浓度为25 mg/mL,50mg/mL,和100mg/mL时,减少血清中HBeAg作用优于拉米夫定组;但是降低细胞内外的HBV DNA含量方面,与拉米夫定组无明显差别。结论体外试验中,复方叶下珠胶囊具有抗HBV作用。