大孔树脂对黄芪总皂苷的分离纯化研究

目的:优化黄芪中黄芪总皂苷的分离和纯化工艺。方法:以总皂苷为指标,考察5种商品化大孔树脂(D101、AB-8、HPD300、HPD600、DM130)在静态和动态情况下对黄芪总皂苷的吸附和解吸性能。结果:HPD300树脂纯化效果最好,当按上柱生药量∶树脂量=2∶1的吸附量吸附,4 BV 70%乙醇洗脱时,分离纯化效果最佳。黄芪甲苷的洗脱率达86.5%,纯度为33.8%。结论:优化后的大孔树脂纯化工艺稳定,适于黄芪总皂苷的分离和纯化。     

不同基源的瑶药羊开口 HPLC 特征图谱对比研究

目的:建立羊开口药材HPLC特征图谱的质量评价方法,并比较不同基源的羊开口HPLC特征图谱。方法:色谱柱为Phenomenex C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,体积流量1.0 mL/min,检测波长364 nm,柱温35℃,进样量20μL。结果:从羊开口药材特征图谱中分析得出6个共有峰,其中2号峰为鞣花酸,4号峰为3,3',4'-三甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷。结论:本研究建立的羊开口药材的特征图谱特征性和专属性强,且展毛野牡丹和野牡丹的特征图谱相似度较高,这为将野牡丹和展毛野牡丹作为羊开口药用基源开发提供了科学依据。     

HPLC-DPPH评价剑叶龙血树中抗氧化活性成分及构效关系

目的采用HPLC-DPPH法评价剑叶龙血树主要成分的抗氧化活性并分析其构效关系。方法采用HPLC法测定剑叶龙血树中自藜芦醇、龙血素A、龙血素B、紫檀芪、7,4′-二羟基黄酮,色谱条件:PhenomenexluraC_(18)(250mmn×4.6mmn,5μm)色谱柱,甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长306 nm。通过对比剑叶龙血树药材溶液加1,1二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)反应前后的各化合物色谱峰面积衰减情况,以各化合物峰面积比值计算清除率,评价各化合物抗氧化活性。结果二苯乙烯类、二氢查耳酮类成分为剑叶龙血树中主要抗氧化活性成分;抗氧化能力强弱依次为紫檀芪(清除率73.19%)白藜芦醇(清除率71.10%)龙血素B(清除率39.01%)龙血素A(清除率12.14%)。从构效关系上分析,二苯乙烯类化合物,当羟基甲基化后,其抗氧化能力并未减弱;二氢查耳酮类化合物,苯环上甲氧基取代成对称结构有助于发挥其抗氧化能力;而仅有C7,4′位羟基取代的黄酮类化合物未显示抗氧化活性。结论建立的HPLC-DPPH评价方法能量化表达剑叶龙血树中主要抗氧化成分,为筛选药效指标成分及建立全面谱效相关质量标准奠定基础。     

HPLC-CAD法分离测定三金片中同分异构体积雪草苷B和羟基积雪草苷

目的建立一种高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法分离测定三金片中积雪草苷B和羟基积雪草苷2个同分异构体含量的方法。方法采用Thermo AcclaimTM C30色谱柱,甲醇-乙腈-水(35∶8∶57)为流动相,柱温35℃,CAD气化温度为50℃,采集频率为10 Hz,分离测定积雪草苷B和羟基积雪草苷的含量。结果积雪草苷B和羟基积雪草苷线性关系良好,r分别为0.999 8、0.998 4,线性范围分别为0.240 7～2.406 9、0.573 1～5.730 8μg,平均加样回收率分别为100.26%、98.32%,RSD分别为0.69%、1.78%;11批样品中积雪草苷B为1.65～3.18 mg/g,羟基积雪草苷为3.49～7.90mg/g。结论该方法简便、灵敏、准确度高,能有效分离测定积雪草苷B和羟基积雪草苷2个同分异构体,可用于三金片现行药典标准的提高完善。     

HPLC法测定金沙藤中绿原酸、咖啡酸和p-香豆酰葡萄糖

目的建立一种同时测定金沙藤中绿原酸、咖啡酸和p-香豆酰葡萄糖的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Phenomenex Cl8(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-乙腈-1%冰醋酸(5∶5∶90)为流动相,检测波长为325 nm,柱温35℃。结果绿原酸、咖啡酸和p-香豆酰葡萄糖分别在0.368~2.760、0.064~0.480、0.102~0.765μg内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为101.48%、99.56%、101.73%,RSD分别为1.44%、0.92%、1.62%。结论该方法操作简便、准确、重复性好,可用于金沙藤及其提取物的质量控制。     

HPLC法测定壮药剑叶龙血树中7-羟基-4′-甲氧基黄烷和紫檀茋

目的 建立一种同时测定壮药剑叶龙血树中7-羟基-4’-甲氧基黄烷和紫檀茋的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为YMC pack ODS-AQ C18(150 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.2％磷酸(36∶64)为流动相,检测波长分别为281、306 nm,柱温35℃.结果 7-羟基-4’-甲氧基黄烷、紫檀茋分别在0.407 6～1.528 5 μg (r=0.999 8)、1.640 8～6.153 0 μg (r=0.999 7)内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.88％、97.10％,RSD分别为0.82％、0.59％.结论 该方法操作简便、重复性好,可用于剑叶龙血树及其提取物的质量控制.     

瑶药材搜山虎的化学成分研究

目的 研究搜山虎（岭南花椒Zanthoxylumau strosinense的根和茎）的化学成分,为双虎肿痛宁酊剂的药效物质基础研究和质量标准提升提供依据。方法 利用AB-8大孔树脂、硅胶、制备色谱进行成分分离,并结合核磁共振氢谱、碳谱和质谱鉴定化合物结构;采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞对化合物进行抗炎活性的研究;采用小鼠醋酸扭体法、热板法对分离得到的成分进行镇痛活性的研究。结果 从搜山虎根中共分离得到10个化合物,分别鉴定为胡芦巴碱（1）、甲芬那酸（2）、4-羟基肉桂酸（3）、小檗碱（4）、橙皮苷（5）、新绿原酸（6）、白藜芦醇（7）、芥子酸（8）、脯氨酸（9）和甘草次酸（10）。抗炎活性研究结果表明,化合物2、4～7、10能够显著抑制肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的释放。镇痛实验结果表明,化合物2、4、7能够显著降低小鼠扭体次数,显著提高痛阈值。结论 所有化合物均为首次从该植物及花椒属植物中分离得到,化合物2、4、7具有很好的抗炎和镇痛作用。     

HPLC法测定壮药羊开口中没食子酸和鞣花酸的量

目的 建立HPLC法测定羊开口中没食子酸和鞣花酸的方法。方法 采用Phenomenex C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,流动相：乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）,梯度洗脱,0～10 min,5% A;10～15 min,5%～12% A;15～50 min,12% A;体积流量1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温35 ℃。结果 没食子酸、鞣花酸的线性范围分别为0.095～0.950 μg（r＝0.999 9）、0.123～1.839 μg（r＝0.999 8）,平均回收率分别为100.15%、97.20%,RSD分别为2.54%、2.16%。结论 本测定方法简便、准确、重现性好,适用于羊开口的质量控制。     

HPLC法测定壮药羊开口中没食子酸和鞣花酸的量

目的 建立HPLC法测定羊开口中没食子酸和鞣花酸的方法.方法 采用Phenomenex C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈(A)-0.2％磷酸溶液(B),梯度洗脱,0～10 min,5％A; 10～15 min,5％～12％A; 15～50min,12％A;体积流量1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温35℃.结果 没食子酸、鞣花酸的线性范围分别为0.095～0.950 μg(r=0.999 9)、0.123～1.839 μg (r=0.999 8),平均回收率分别为100.15％、97.20％,RSD分别为2.54％、2.16％.结论 本测定方法简便、准确、重现性好,适用于羊开口的质量控制.     

复方罗汉果清肺糖浆HPLC特征图谱及主要成分含量测定

目的建立复方罗汉果清肺糖浆的特征图谱,并测定其中主要成分木犀草苷、罗汉果皂苷Ⅴ的含量。方法采用Waters Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL/min,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果 15批复方罗汉果清肺糖浆HPLC特征图谱确立了10个共有峰,且相对保留时间的RSD均小于2.0%。木犀草苷、罗汉果皂苷Ⅴ分别在0.163 2～0.816 0μg、0.730 8～3.654 0μg范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为96.30%、95.11%,RSD分别为2.28%、2.87%。结论 HPLC特征图谱结合主要成分含量测定能更全面反映制剂内在质量,可用于复方罗汉果清肺糖浆综合质量评价。