黄芪丹参颗粒药对干预肾纤维化Wnt/β-catenin信号通路的实验研究

目的：观察黄芪丹参颗粒药对对肾纤维化信号通路Wnt/β-catenin 的影响,并初步明确其量效关系。方法：40 只雄性SD 大鼠,随机分为5 组,即正常组,模型组,黄芪丹参颗粒药对（1:1）低剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对（1:1）中剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对高剂量（1:1）治疗组。除正常组外,其余大鼠均建立单侧输尿管梗阻（UUO）模型。各组给予相应药物治疗,收集尿液检测24 h 尿蛋白、琢1-微球蛋白（ɑ1-Microglobulin,ɑ1-MG）的含量,光镜观察肾组织病理;Western Blot 技术检测肾组织Wnt4 和β-catenin蛋白表达。结果：①24 h 尿蛋白和ɑ1- MG 检测结果,与正常组比较,模型组24 h 尿蛋白和ɑ1- MG 均明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,各治疗组24 h 尿蛋白和ɑ1-MG 明显降低（P＜0.05）;与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组24h 尿蛋白均明显降低（P＜0.05）,各剂量组之间ɑ1-MG 差异无显著性。②HE 染色结果,各治疗组病理变化较模型组均有明显改善,与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组评分明显减少（P＜0.05）。③肾组织Wnt4 和β-catenin 免疫印迹检测结果,与正常组比较,模型组和各剂量组大鼠肾组织Wnt4 和β-catenin 具有明显有升高趋势,各治疗组均有不同程度下降,尤以颗粒中、高剂量组下降明显。结论：黄芪丹参（1:1）颗粒药对可以保护UUO 大鼠肾小管功能,一定程度改善UUO 大鼠肾脏病理改变,其机制可能与干预Wnt/β-catenin 信号通路有关。黄芪丹参颗粒药对可以干预UUO 大鼠肾组织中Wnt4、β-catenin 的表达,并存在一定的量效关系。     

黄芪丹参“药对”干预肾纤维化抑制因子par-3的量效关系研究

目的探讨黄芪丹参＂药对＂对大鼠肾间质纤维化的保护作用及其干预肾纤维化抑制因子par-3的量效关系。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常组（n=8）和造模组（n=32）。造模组采用单侧输尿管梗阻（UUO）建立肾间质纤维化模型,造模后分为模型组（n=8）,黄芪丹参低剂量组（n=8）、中剂量组（n=8）、高剂量组（n=8）。造模后第2天开始各组给予相应的干预措施;2周后处死大鼠,收集相应标本,检测肾功能、尿α1-微球蛋白,观察肾组织病理改变,并应用Western Blot方法检测肾组织par-3蛋白的表达情况。结果①与正常组比较,模型组及各治疗组血清Cr明显高于正常组（P〈0.05）;除高剂量组BUN水平无差异外,其余各组血清BUN明显高于正常组（P〈0.05）。②与模型组比较,各治疗组尿α1-微球蛋白均降低（P〈0.05）,各治疗组间差异无统计学意义（P〉0.05）。③与模型组比较,各治疗组肾脏组织病理情况均有不同程度的改善。④黄芪丹参＂药对＂可以促进par-3的表达,并且随用药剂量的增高表达量增加。结论黄芪丹参＂药对＂可通过促进par-3的表达,从而保护肾小管功能,减轻肾间质纤维化的进展,并呈一定的量效关系。     

基于河图学说探讨《灵枢》四象体质理论在中风辨治中的应用

基于河图学说及《灵枢》太少阴阳体系的四象体质理论,以阴阳为基点,以人的生理、病理特性为依据,将人的体质划分为太阳、少阳、太阴、少阴四类。中风为临床中常见的危重症,且目前临床存在着治疗方法单一、复发率高等问题, 与患者体质特性密切相关。通过分析四象体质特点及其阴阳盛衰,浅析了四象体质与中风的关系,并提出了通过调节阴阳诊治中风之道,为临床辨治中风提供了新的思路和方法。      

PDGF及PDGFR在肾间质纤维化中的研究进展

肾间质纤维化是慢性肾脏疾病发展到后期的病理学特征之一,它涉及一系列相互关联的复杂过程,细胞因子在其中发挥着重要作用。血小板源生长因子(PDGF)是目前已知多肽生长因子中最强的有丝分裂原,参与了多组织器官生理活动与病理损伤过程的重要细胞因子,其过度表达可导致多种疾病的产生,其在肾纤维化中的作用日益受到重视。本文就PDGF及其受体PDGFR的生物学特性及其在肾间质纤维化过程中的作用进行综述。     

丹酚酸A、C分子药对配伍干预肾纤维化组织凋亡相关蛋白caspase-3、GRP78的实验研究

目的研究丹酚酸A、C分子药对配伍对肾纤维化过程中凋亡相关蛋白半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的调节作用。方法将50只雄性SD大鼠随机分为5组,即正常组,模型组,丹酚酸A组,丹酚酸C组,丹酚酸A、C按1:1配伍组(丹酚酸A+C组)。除正常组外,其余大鼠均采用单侧输尿管梗阻(UUO)造模。造模后第2天开始各组给予相应的干预措施;2周后处死大鼠,收集相应标本,检测尿β2-微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG),光镜观察肾组织病理,TUNEL检测技术观察肾小管间质细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测肾组织caspase-3、GRP78 mRNA的表达。结果 1与正常组比较,模型组及各治疗组尿β2-MG、NAG水平均明显升高(P0.05)。2与模型组比较,各治疗组尿β2-MG水平均明显降低(P0.05),丹酚酸A、C组尿NAG水平明显降低(P0.05)。3与模型组比较,各治疗组肾脏组织病理情况均有不同程度的改善,尤以丹酚酸A、A+C组改善明显(P0.05)。4丹酚酸A、C组及A+C组可以下调caspase-3、GRP78的表达,有效减轻肾小管间质细胞凋亡,且丹酚酸A+C组较丹酚酸C组效果更明显(P0.05)。结论丹酚酸A、C及A+C分子药对配伍可一定程度保护UUO大鼠肾小管功能,并下调肾组织caspase-3、GRP78的表达,减少肾小管间质细胞凋亡的发生,减轻肾间质纤维化程度。上述作用可能与该药物干预凋亡相关蛋白caspase-3、GRP78的表达,抑制内质网应激途径有关。     

丹酚酸A、B及其分子药对配伍对肾纤维化过程中CTGF及Par-3的干预作用

目的：观察丹酚酸A、B及其分子药对配伍对肾纤维化中CTGF及Par-3表达的影响。方法：采用50只雄性SPF级SD大鼠随机分为5组：正常组、造模组、丹酚酸A组、丹酚酸B组及丹酚酸A+B组。除正常组外,其余大鼠均造成UUO模型。各组予相应药物治疗2周,腹主动脉采血检测大鼠Cr、BUN;免疫荧光观察大鼠肾组织CTGF、Par-3表达情况。结果：1）肾功能检测：模型组大鼠血清Cr,BUN水平显著高于正常组（P<0.05）。丹酚酸A组大鼠血清Cr水平明显低于模型组（P<0.05）;丹酚酸A组和丹酚酸B组大鼠血清BUN水平明显低于模型组（P<0.05）;各治疗组间比较,血清Cr和BUN水平差异无统计学意义（P>0.05）。2）CTGF免疫荧光检测：和正常组相比,模型组大鼠肾组织肾小管上皮细胞阳性细胞数目明显增多,荧光强度明显增强（+++）;经丹酚酸A、B及组分配伍治疗后,CTGF荧光强度较模型组明显减弱,其中以丹酚酸A+B组减弱较为明显（±）,丹酚酸B组次之（+）。3）Par-3免疫荧光检测结果：模型组大鼠肾组织肾小管上皮细胞阳性细胞数目比正常组明显减少,荧光强度明显减弱（±）;经丹酚酸A、B及组分配伍治疗后,丹酚酸A、B、A+B组Par-3荧光强度较模型组明显增强,其中以丹酚酸A+B组增强较为明显（+++）,丹酚酸B组次之（++）。结论：经丹酚酸A、B及其分子药对配伍治疗后,可一定程度改善大鼠肾功能,但无统计学意义;丹酚酸组分配伍组能显著抑制大鼠肾组织CTGF的表达、促进Par-3的表达,其效果优于丹酚酸A和丹酚酸B组。该机制可能与其促进Par-3在UUO大鼠肾组织中的表达和减少CTGF的表达有关。     

六味地黄丸治疗小儿脑瘫的疗效及其基于网络药理学的机制研究＊

目的 研究六味地黄丸治疗小儿脑瘫的疗效并使用网络药理学探讨作用机制。方法 选取2021年6月至2021年10月临沂市中医院收治的46例肝肾亏损型PCP患儿作为研究对象，按随机数字表法分成对照组与药物组各23例，对照组给予常规儿童康复治疗，药物组在常规康复治疗基础上给予六味地黄丸治疗，连续治疗4周后观察患儿粗大运动功能测试量表（GMFM）评分的改善情况。使用网络药理学方法获取六味地黄丸的活性成分、靶点与PCP疾病靶点，得到交集靶点后构建交集靶点蛋白质相互作用网络并进行富集分析。结果 药物组疗效评分显著高于对照组（P=0.033），筛选得到6味中药47个主要成分与99个疾病治疗靶点，发现10个关键靶点为：TP53、AKT1、JUN、TNF、MAPK1、IL6、HSP90AA1、RELA、MAPK8、VEGFA，通过靶点富集获取GO条目558个，KEGG条目99个，主要富集到PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路、Toll样受体信号通路等发挥治疗作用。结论 六味地黄丸可通过多成分、多靶点、多通路发挥显著疗效，临床治疗PCP优于常规康复治疗。本文以临床为基础，借助网络药理学探讨六味地黄丸治疗PCP疗效显著的作用机制，分析研究流程符合《网络药理学评价方法指南》要求，具有可靠性、规范性与合理性，为临床应用中药防治PCP提供了案例与理论依据。     

黄芪丹参颗粒药对干预肾纤维化Wnt/β-catenin信号通路的实验研究

目的：观察黄芪丹参颗粒药对对肾纤维化信号通路Wnt/β-catenin的影响,并初步明确其量效关系。方法：40只雄性SD大鼠,随机分为5组,即正常组,模型组,黄芪丹参颗粒药对（1：1）低剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对（1：1）中剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对高剂量（1：1）治疗组。除正常组外,其余大鼠均建立单侧输尿管梗阻（UUO）模型。各组给予相应药物治疗,收集尿液检测24 h尿蛋白、α1-微球蛋白（α1-Microglobulin ,α1-MG）的含量,光镜观察肾组织病理;Western Blot技术检测肾组织Wnt4和β-catenin蛋白表达。结果：淤24 h尿蛋白和α1- MG检测结果,与正常组比较,模型组24 h尿蛋白和α1- MG均明显升高（〈0.05）;与模型组比较,各治疗组24 h尿蛋白和α1-MG明显降低（〈0.05）;与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组24h尿蛋白均明显降低（〈0.05）,各剂量组之间α1-MG差异无显著性。于HE染色结果,各治疗组病理变化较模型组均有明显改善,与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组评分明显减少（〈0.05）。盂肾组织Wnt4和β-catenin免疫印迹检测结果,与正常组比较,模型组和各剂量组大鼠肾组织Wnt4和β-catenin具有明显有升高趋势,各治疗组均有不同程度下降,尤以颗粒中、高剂量组下降明显。结论：黄芪丹参（1：1）颗粒药对可以保护UUO大鼠肾小管功能,一定程度改善UUO大鼠肾脏病理改变,其机制可能与干预Wnt/β-catenin信号通路有关。黄芪丹参颗粒药对可以干预UUO大鼠肾组织中Wnt4、β-catenin的表达,并存在一定的量效关系。