四妙勇安汤稳定动脉粥样硬化斑块拮抗炎症反应的分子生物学机制研究

据世界卫生组织预计,至2020年,全世界由于心血管疾病死亡的人数将增加50%,而其中76%分布在发展中国家.与发达国家相比,发展中国家的心血管疾病的发病率和死亡率均呈持续上升趋势,中国作为发展中国家的重要一员,其心血管疾病的防治已成为国家卫生工作的重中之重.而急性冠脉综合征是心血管疾病致死的首要原因,其主要病理基础为动脉粥样硬化不稳定斑块,本课题即是针对与斑块稳定性密切相关的炎症反应进行了深入研究.     

四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响

目的:探讨四妙勇安汤干预动脉粥样硬化(AS)易损斑块内细胞外基质(ECM)的作用机制。方法:随机将40只日本大耳白兔分为正常组、模型组、辛伐组、四妙组,第24周取材。检测第8、16、24周时血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量;检测动脉壁胶原含量(CA)、细胞外脂质含量(ELA)、脂核与斑块面积比(LCA/PA)及纤维帽厚度(FCT);免疫组化方法检测斑块内MMP-9、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及核因子-κB(NF-κB)阳性面积百分比。结果:给药后各时间点四妙组血清MMP-9水平均低于模型组(P<0.01);斑块内ELA、LCA/PA、MMP-9和NF-κB阳性面积百分比均低于模型组,斑块FCT、CA及α-SMA阳性面积百分比均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:四妙勇安汤能够抑制细胞外基质降解,稳定AS易损斑块,其作用机制可能是通过抑制MMP-9表达实现的。     

四妙勇安汤稳定动脉粥样硬化斑块拮抗炎症反应的分子生物学机制研究

据世界卫生组织预计,至2020年,全世界由于心血管疾病死亡的人数将增加50%,而其中76%分布在发展中国家。与发达国家相比,发展中国家的心血管疾病的发病率和死亡率均呈持续上升趋势,中国作为发展中国家的重要一员,其心血管疾病的防治已成为国家卫生工作的重中之重。     

实验性动脉粥样硬化模型复合建模的方法及评价

目的 建立一种利用复合因素制备兔动脉粥样硬化模型的实验方法.方法 完全随机方法将24只日本大耳白兔分为对照组(8只)和实验组(16只),对照组予普通饲料,实验组用大剂量高脂饲料饲喂加以注射胎牛血清白蛋白和球囊拉伤进行干预,饲养10周.测定血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量,主动脉切片进行病理形态学观察,测量斑块面积占内膜的百分比及内膜厚度及内膜面积等.结果实验组血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平显著升高(P<0.05或P<0.01).主动脉斑块形成,有典型"纤维帽",斑块面积占内膜面积的53.6%±10.5%,相应的对照组未出现以上类似的变化.其主动脉弓、胸主动脉及腹主动脉的内膜厚度、内膜与中膜厚度比和内膜面积与内膜中膜面积的比值实验组都相应的高于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 用高脂饲料加以静脉注射胎牛血清白蛋白和球囊拉伤因素在短时间内可诱发兔动脉粥样硬化,此方法具有一定可行性,可控程度高、易重复.能够更好地模仿人动脉粥样硬化的发病机制,并有助于进一步阐明不稳定斑块的机制.     

补肾抗衰片对实验性动脉粥样硬化家兔的NF-κB及炎症因子的影响

目的 探讨补肾抗衰片对家兔动脉粥样硬化的干预作用及作用机制。     

补肾抗衰片干预动脉粥样硬化的氧化应激机制研究

目的：探讨补肾抗衰片对家兔动脉粥样硬化病变后血红素加氧酶-1（HO-1）mRNA及其相关氧化应激水平的影响。方法：将56只日本大耳白兔随机分为正常组8只,实验组48只,正常组给予普通饲料,实验组建立动脉粥样硬化模型,在第8周时,实验组随机分为模型组、补肾抗衰片组和辛伐他汀组。各组分别于给药前、给药后8、12、16周采血,最后一次采血后处死动物,无菌条件下取主动脉,用QPCR法检测主动脉HO-1 mRNA、PPARαmRNA的表达,免疫荧光技术检测HO-1蛋白水平,ELISA法检测血清HbCO、COX-2活性以及cGMP水平。结果：补肾抗衰片干预后,血清HbCO水平下降,cGMP明显升高,而COX-2活性无明显变化;HO-1免疫荧光检测发现,补肾抗衰组和辛伐他汀组绿色荧光区域均明显增加;主动脉HO-1 mRNA基因在正常组仅有少量表达,动脉粥样硬化病变组HO-1 mRNA表达增加,经补肾抗衰片干预后HO-1 mRNA表达明显升高（P<0.05）,PPARαmRNA经补肾抗衰片干预后各组无均有下降的趋势。辛伐他汀也存在类似的抗氧化效应。结论：中药复方制剂补肾抗衰片在动脉粥样硬化病变中具有重要的抗氧化作用,其保护机制可能是通过调控HO-1 mRNA基因的表达及影响HO-1/CO-cGMP 通路中相关酶的活性,同时补肾抗衰片可能通过对抗过氧化反应稳定动脉粥样硬化斑块。     

辛伐他汀对兔实验性动脉粥样硬化易损斑块的影响

研究目的通过利用复合因素制备兔主动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)易损斑块模型,探讨辛伐他汀对AS易损斑块的影响及机制。方法随机将30只日本大耳白兔分为正常组10只,实验组20只。正常组予普通饲料,实验组利用复合因素制备兔AS易损斑块模型,8周时实验组随机分为模型组、辛伐他汀组,24周取材。检测动脉壁内膜厚度(IT)、内中膜厚度比(IT/MT)、斑块纤维帽厚度(FCT)、纤维帽与内中膜厚度比(FCT/IMT)、易损指数(VI)、脂核面积(LCA)、斑块区CD68、胶原含量(CA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子-κB(NF-κB)蛋白表达及基因表达。结果模型组各指标与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。辛伐他汀组IT、IT/MT、VI、LCA均低于模型组,FCT和FCT/IMT均高于模型组;斑块内CA及α-SMA阳性面积百分比均高于模型组,TNF-α、MMP-9和NF-κB蛋白表达均低于模型组,MMP-9和NF-κB mRNA表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论辛伐他汀能够稳定AS易损斑块,降低斑块易损指数,其作用机制可能是通过抑制斑块内胶原降解、抑制MMP-9、TNF-α及NF-κB表达实现的。     

气滞血瘀与气虚血瘀心肌梗死大鼠模型的生物学标记物表达差异

目的探讨心肌梗死气虚血瘀和气滞血瘀证动物模型的生物学特点。方法雄性Wistar大鼠36只随机分为正常组6只、心肌梗死组10只、气虚血瘀组10只、气滞血瘀组10只。冠状动脉左前降支结扎造成心肌梗死模型,在此基础上,采用饥饿、疲劳、寒湿刺激建立心肌梗死气虚血瘀证模型,采用昼夜失调、闪烁光刺激和夹尾刺激联合冰水处理建立心肌梗死气滞血瘀证大鼠模型,观察大鼠的一般情况、心肌组织病理染色等情况;检测血小板聚集率、血浆血小板膜蛋白140(GMP-140)、降钙素基因相关肽(CGRP)及去甲肾上腺素(NE)水平。结果气虚血瘀组大鼠倦怠嗜睡,活动量少;气滞血瘀证组大鼠活动量增多,精神亢奋,极易激惹。心肌组织NBT染色显示心肌梗死组、气虚血瘀组和气滞血瘀组大鼠均可见灰白色梗死区域。心肌梗死组、气虚血瘀组及气滞血瘀组在60 s、180 s、300 s及最大值的血小板聚集率均高于正常组(P0.01),心肌梗死组、气虚血瘀组及气滞血瘀组各时点的血小板聚集率两两比较,差异均无统计学意义(P0.05)。心肌梗死组、气虚血瘀组及气滞血瘀组GMP-140高于正常组(P0.05或P0.01),且气虚血瘀组及气滞血瘀组GMP-140水平均高于心肌梗死组(P0.05);气虚血瘀组CGRP水平低于其他各组(P0.05);气滞血瘀组NE水平显著高于其他各组(P0.01)。结论心肌梗死气滞血瘀证与气虚血瘀证生物学标记物表达存在差异性,气虚血瘀证血浆GMP-140、血小板聚焦率升高,CGRP降低;气滞血瘀组血浆GMP-140、血小板聚焦率及NE升高。     

实验性兔主动脉粥样硬化易损斑块模型的建立与评价

目的 探索建立实验性兔主动脉粥样硬化易损斑块模型的新方法.方法 24只雄性日本大耳白家兔随机分为对照组8只,实验组16只,对照组给予普通饲料;实验组给予高胆固醇饲料、注射牛血清白蛋白及进行腹主动脉球囊拉伤术,分别于0周、3周、6周、10周检测血脂、ox-LDL、TNF-α、IL-1、IL-10,实验结束时取腹主动脉进行病理形态学分析及NF-κBp65亚基免疫组化染色分析.结果 实验组斑块内膜面积比为53.6%,脂核面积与斑块面积比为54.9%,斑块纤维帽厚度与内膜中膜厚度(IMT)比约为8.5%;除甘油三酯变化不大外,实验组TC、LDL-C、HDL-C、LDL-C/ HDL-C、TC/ HDL-C、ox-LDL、TNF-α、IL-1、IL-10均有明显升高趋势,在3周、6周、10周时与对照组比较差异有统计学意义;且NF-κBp65亚基阳性染色面积较对照组高13.5倍.结论 高脂喂养、免疫损伤加球囊拉伤可以成功建立家兔主动脉粥样硬化易损斑块模型.