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目的:对大肠杆菌DNA复制相关蛋白PriC进行研究。方法:构建重组表达载体pET21a-PriC及pET21a-PriC1-101,并进一步诱导表达纯化。利用Pulldown手段将pET21a-PriC-notag与pET28at-plus-PriB分别转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达及共纯化后检测PriC与PriB的相互作用情况。结果:PriC经Ni柱亲和层析纯化获得的蛋白稳定性较差,易沉淀。根据二级结构和蛋白稳定性预测及限制性蛋白酶水解结果,构建了PriC的截短突变蛋白PriC1-101,经Ni亲和层析和superdex75纯化,获得了稳定性较好的蛋白,经Western blot鉴定为目的蛋白。PriC1-101的圆二色谱分析发现其具有较多的α-helix和无规卷曲,这为更好的了解其结构奠定了重要的基础。通过Pulldown手段发现PriC与PriB存在相互作用,并且PriC的稳定性有所提高。结论:PriC蛋白的C-端氨基酸序列是PriC蛋白与PriB蛋白相互作用的主要区域,并对PriC蛋白的稳定性有较大影响。 相似文献
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利用无机载体固定化青霉素酰化酶的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
以无机材料6201型担体作载体,进行青霉素酰化酶固定化的研究。考察了APTS和戊二醛浓度、给酶量以pH等因素对固定化酶酶活的影响。结果表明,以6201型担体为载体制备得到的固定化酶具有较高的酶活回收,达42.8%;操作稳定性良好;用其连续水解30批青霉素G的钾盐溶液,酶活未见明显下降;该固定化酶与游离酶相比,可在较宽的pH范围保持高酶活。 相似文献
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血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂被应用为降血压的药物已有20余年的历史[1,2]。此类药物可分为2类:肽类抑制剂和非肽类抑制剂。市面上应用较为广泛的是非肽类抑制剂,主要指合成法制备的ACE抑制剂。这类抑制剂成药较早,并且发展很快,药效强劲,降压效果明显,但此类药副作用明显,常见有首剂低血压症、肾功能损害、高血钾症、咳嗽、血管神经性水肿、皮疹、味觉障碍[3,4]等。随着生物技术的发展和对药物安全性的重视的加强,ACE抑制剂的 相似文献
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干细胞技术是近年发展最为迅速的生物医学技术。由于干细胞移植对许多疾病治疗的特殊意义 ,干细胞研究和应用已成为目前医学界最为热门的课题。在干细胞技术的研究应用中 ,造血干细胞移植的临床应用较早 ,始于 2 0世纪 5 0年代后期 ,80年代初有较大突破。由于脐血富含造血干细胞 ,来源广泛 ,为研究人员所关注。 1988年法国科学家为一个患Fanconi症的儿童进行了世界上第一例脐血移植获得成功。至今 ,全球已有数千例患者接受了脐血移植 ,成功率高达 80 %。现就脐血技术的基础及临床应用研究现状作一综述。一、脐血生物学特点的基础研究… 相似文献
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研究了植物细胞膜固定化培养中各种参数对反应器性能的影响,结果表明:细胞层厚度为7~8mm时生产能力可达到较高的水平;孔径为80μm的不锈钢丝网是合适的固定化长春花细胞膜材料;压力脉冲是促进胞内生物碱释放的有效手段;并在理论上建立计算反应器允许细胞层厚度的方法,计算结果与实验吻合较好。 相似文献
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