表没食子儿茶素没食子酸酯抑制LDL的氧化修饰和小鼠巨噬细胞摄取ox-LDL

<正>茶多酚有抗氧化、降血脂和抗动脉粥样硬化(atheroscle-rosis,AS)作用[1-2]。本实验通过对茶多酚的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)进行研究,阐明其抗AS机制。     

儿茶素对小鼠巨噬细胞VCAM-1表达的影响

<正>血管细胞黏附因子介导的血管炎性病变是很多疾病[如动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)[1]、风湿病、肾病等]共同的病理基础。研究发现[2]AS的血管壁中有VCAM-1的大量表达。过量表达的VCAM-1介导的炎症反应参与了AS发生发展的全过程[3]。儿茶素(catechin)是从茶叶中提取的酚类物质,有良好的     

山楂叶总黄酮对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的研究不同剂量的山楂叶总黄酮（hawthorn leaf flavonids,HLF）对实验性高脂血症大鼠脂代谢的影响。方法建立大鼠高脂血症模型,观察不同剂量HLF对高脂血症大鼠血清及肝脏脂质、脂肪积累、不同组织脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase,LPL）的影响。结果与模型对照组相比,一定剂量的HLF能降低高脂血症大鼠血清以及肝脏甘油三酯（Triglyceride,TG）、胆固醇（Tricholesterol,TC）含量（P〈0.05）,并能有效地改善脂肪的积累（P〈0.001）;增加肌肉组织中LPL的含量（P〈0.05）,减少脂肪组织中LPL的含量（P〈0.01）。结论HLF具有降血脂的作用,对高脂饮食引起的高脂血症和脂肪肝具有防治作用。     

固醇调控核因子bHLH-Zip的原核表达及其抗血清的制备

[目的]制备固醇调控核因子bHLH-Zip片段及其多克隆抗血清,为细胞固醇代谢及调脂药物研究提供材料。[方法]将人源固醇调节元件结合蛋白SREBP的N端第323-553位氨基酸残基的基因序列即bHLH-Zip片段克隆到表达载体pcDNA4/hismaxA,得到重组质粒pHis-bHLH-Zip,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达;裂解细菌并纯化目的蛋白;用纯化后的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗血清,采用间接ELISA法测定效价。[结果]获得纯化bHLH-Zip片段,并制备其多克隆抗血清。抗bHLH-Zip抗血清的效价为1:16000。[结论]bHLH-Zip核因子是一段可溶性蛋白,并可制备产生具有较高效价的多克隆抗血清,这为研究细胞固醇代谢及调脂药物对SREBP通路的影响奠定了基础。     

角膜塑形术对青少年近视患者眼调节参数以及立体视觉的影响

目的分析研讨角膜塑形术对青少年近视患者眼调节参数以及立体视觉的影响。方法随机选取我院2016年1月至2017年3月收治的近视患者156例,回顾分析其病历资料,依据其等效球镜度将其分三组,即低度近视组(52例,-0.50D≤屈光度-2.00D),中度近视组(52例,-2.00D≤屈光度-4.00D),高度近视组(52例,-4.00D≤屈光度-6.00D),患者均接受角膜塑形术治疗,观察其治疗效果,如立体视觉、眼调节参数等,并比较。结果患者戴镜后裸眼视力高于戴镜前,柱镜、球镜均低于戴镜前(P0.05)。比较三组患者戴镜后立体视锐度差、近视力差、远视力差值(P0.05);低度近视组远视力差值高于中度和高度近视组(P0.05);中度近视组远视力差值低于高度近视组(P0.05)。结论患者佩戴角膜塑形镜后,裸眼视力明显提高,达到正常水平,双眼视功能与立体视觉得以提高与恢复,应用推广价值高。     

姜黄素对巨噬细胞LDL受体表达的影响

目的:检测降脂中药姜黄醇提物总姜黄素对小鼠巨噬细胞LSL受体表达的影响.方法:用不同浓度的总姜黄素溶液无菌培养小鼠巨噬细胞,用酶联免疫吸附法测定巨噬细胞膜上LDL受体的表达数量.结果:不同浓度姜黄素对巨噬细胞LDL受体的表达数量与对照组比较有显著性差异.结论:0.02～0.05mmol/L的姜黄素溶液能极显著增加小鼠巨噬细胞LDL受体的表达.     

RNA干扰及其技术的应用

RNA干扰(RNAi)是细胞内由双链RNA诱导降解与其配对的特定mRNA的过程。细胞内双链RNA在酶的作用下,形成20-25碱基大小的小干扰RNA(si RNAs),由si RNAs进一步掺入多组分核酸酶并使其激活,从而精确降解与si RNAs序列相同的mRNA,抑制该基因在细胞内的翻译表达。介绍了RNA干扰的分子机制、制备方法、以及RNA干扰技术在功能基因组学、微生物学、基因治疗和信号转导等研究领域里的应用。     

丹参酮对爪蟾卵母细胞外源清道夫受体-AⅠ基因表达的影响

 目的从基因调控水平探讨丹参酮对清道夫受体AⅠ(SR-AⅠ)基因表达的影响以及抗动脉粥样硬化的作用机制。方法将人SR-AⅠ基因构建在其调控元件SRad-SRap的下游,并经显微核注射导入爪蟾卵母细胞,建立SRad-SRap元件调控的SR- AⅠ表达系统；氧化低密度脂蛋白(OXLDL)刺激培养牛主动脉平滑肌细胞,制备平滑肌细胞条件培养液(SCM)；分别用SCM和含有丹参酮的SCM培养注射后的卵母细胞,用荧光标记配体法和ABC-Elisa法定性、定量检测卵母细胞膜上SR-AⅠ的表达。结果丹参酮可以抑制卵母细胞膜SR-AⅠ表达,且有量效关系。结论OXLDL可通过诱导平滑肌细胞产生相关因子,经SRad-SRap调控途径的作用上调SR-AⅠ的表达；丹参酮可以阻止SR-AⅠ的过量表达,可能是治疗As的作用机制之一。     

胶体金-荧光素双标配体法研究细胞低密度脂蛋白受体的功能

 目的建立一种利用胶体金-荧光素双标记配体研究细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)功能的方法。方法①先用荧光素DiI标记LDL,再在一定pH值下将DiI-LDL吸附在胶体金颗粒表面上,获得稳定的双标记配体Au-DiI-LDL。②利用双标配体Au-DiI-LDL结合荧光显微镜、流式细胞仪和透射电镜等技术分别对经LDLR表达诱导剂、抑制剂或姜黄素作用后的ANA-1细胞LDLR进行定性定量分析以及内吞作用的直观检测。结果荧光显微镜、流式细胞仪和透射电镜的检测结果均表明,能够利用双标配体Au-DiI-LDL检测ANA-1细胞LDLR的活性(P<0.05)。结论胶体金-荧光素双标记配体法是一种可用于细胞LDLR功能检测的新型高效的方法。     

姜黄素对人淋巴细胞低密度脂蛋白受体表达影响的研究

 目的建立一种简便的直接检测人类低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinrecepor,LDL-R)活性并筛选降脂中药的细胞模型:人B淋巴细胞永生化细胞系研究不同浓度姜黄素对人类LDL-R在人淋巴细胞中表达的影响,在细胞和受体水平上探讨姜黄素的作用机制。方法EBV转化技术建立的人B淋巴细胞永生化细胞系;以荧光试剂标记配体法,利用流式细胞仪技术和激光扫描共聚焦显微镜技术研究姜黄素对人淋巴细胞LDL-R表达的影响。结果姜黄素在5～50μmol·L^-1内可以增强人淋巴细胞LDL-R的表达,并且具有明显的量效关系。结论利用荧光试剂标记配体法检测人淋巴细胞LDL-R活性是一个简单有效的方法;姜黄素是一个非常强的LDL-R基因表达促进剂,可能通过增加人淋巴细胞LDL-R的表达起到降血脂和抗动脉粥样硬化的作用。