支气管肺泡灌洗液TB-DNA测定与 其它TB检测方法比较研究

目的：探讨支气管灌洗液涂片染色、支气管灌洗液培养及痰培养三种方法中结核杆菌阳 性率与支气管灌洗液结核杆菌DNA拷贝数的关系。方法：对199例确诊肺结核患者分别应用荧光 定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测支气管灌洗液（BALF）结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）,并按 TB-DNA拷贝数分为A（1×103～）、B（1×105～）、C（≥1×107）三组,并对所有患者行灌洗液涂片染色、 灌洗液培养及痰培养结核杆菌。结果：灌洗液涂片染色法 A、B、C 三组阳性率分别为 12.0%、 60.2%、92.7%,三组间阳性率比较差异有统计学意义（P<0.05）,三组间两两比较差异有统计学意义 （P均<0.05）,且阳性率C组＞B组＞A组;灌洗液培养法A、B、C三组阳性率分别为18.7%、56.6%、 87.8%,三组间差异有统计学意义（P<0.05）,两两比较差异有统计学意义（P均<0.05）,阳性率C组 ＞B组＞A组;痰培养法A、B、C三组阳性率分别为26.7%、65.1%、82.9%,三组间比较差异有统计学 意义（P<0.05）,两两比较差异有统计学意义,A组与B组、A组与C组比较P均<0.05,B组与C组比 较P<0.05。结论：支气管灌洗液涂片染色、灌洗液培养、痰培养结核杆菌阳性率均随支气管灌洗液 中结核杆菌DNA拷贝数递增而增高。     

洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌的抑菌作用研究

目的:探讨洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌的抑菌作用。方法:选用56株结核分枝杆菌临床分离株作为研究对象,结核分枝杆菌标准菌株(H_37RV)为对照用菌株,通过分格平板琼脂比例法抑菌试验,观察不同浓度洋葱中黄酮类化合物、黄酮与一线抗结核药物联合使用对结核分枝杆菌的抑菌作用;小鼠腹腔巨噬细胞与结核分枝杆菌共同孵育后,将细胞分为对照组、560μg/m L黄酮组、280μg/m L黄酮组、140μg/m L黄酮组、28μg/m L黄酮组、异烟肼(INH)组,给予相应药物干预,通过实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA水平,通过酶联免疫吸附法检测细胞培养液中细胞因子水平。结果:(1)与2.0μg/m L INH、1.0μg/m L利福平(REP)、5.0μg/m L乙胺丁醇(EMB)、2.0μg/m L链霉素(SM)比较,28μg/m L黄酮敏感率较低,560、280μg/m L黄酮敏感率较高,差异有统计学意义(P0.05),560、280μg/m L黄酮敏感率比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)与2.0μg/m L INH、1.0μg/m L REP、5.0μg/m L EMB、2.0μg/m L SM比较,各药物联合使用280μg/m L黄酮后敏感率均较高,差异有统计学意义(P0.05)。(3)与INH组比较,280μg/m L黄酮组、560μg/m L黄酮组巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较低及拷贝数较高,28μg/m L黄酮组巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较高及拷贝数较低,差异有统计学意义(P0.05)。(4)与INH组比较,280μg/m L黄酮组、560μg/m L黄酮组细胞培养液中水平γ-干扰素、白细胞介素-1β水平较高,28μg/m L黄酮组细胞培养液中水平γ-干扰素、白细胞介素-1β、白细胞介素-6水平较低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌有明显的体外抑菌作用,能够协同INH、REP、EMB及SM抑菌,还能促进巨噬细胞释放γ-干扰素、白细胞介素-1β等细胞因子,提高巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌的能力,在≤280μg/m L范围内,黄酮类化合物浓度越高作用越强。     

新登记肺结核菌阳患者耐药情况分析

目的分析新登记肺结核患者的初始耐药情况,为进一步控制肺结核的发病和流行提供依据。方法对杭州市红十字会医院2012年新登记的活动性肺结核患者进行痰培养获得768株分枝杆菌菌株,对培养阳性菌株进行菌型鉴定并用比例法进行药物敏感性试验。结果2012年非结核分枝杆菌（NTM）分离率为4．42％,结核分枝杆菌（MTB）初始耐药率13．35％,耐多药率4．50％,耐单药率从高到低为INH（8．31％）、RFP（7．22％）、SM（6．40％）和EMB（2．45％）。耐药率随年龄增长呈下降趋势,16岁～组人群初始耐药率明显高于61岁及以上年龄组。结论青壮年肺结核患者初始耐药率高,应加强对重点人群的管理及随访。     

破裂型腰椎间盘突出症的影像学诊断

对经手术治疗的９２例（１０７个）腰椎间盘突出症患者做ＭＲＩ、ＣＴ和椎管造影（Ｍｙｅ）检查，进行破裂型椎间盘突出症诊断的前瞻性研究。以手术所见髓核突出状态为标准诊断，确诊破裂型椎间盘突出３８例（４０个椎间盘），占３７％，其准确率依次为：ＭＲＩ＋ＣＴ＋Ｍｙｅ９６．７％（２９／３０），ＭＲＩ＋ＣＴ９１．２％（３１／３４），ＭＲＩ＋Ｍｙｅ８１．１％（３０／３７），ＣＴ＋Ｍｙｅ８０．Ｏ％（３２／４０），ＭＲＩ７６．９％（３０／３９），ＣＴ６５．２％（３０／４６），Ｍｙｅ６４．４％（２９／４５）。经统计学处理各组差异无显著意义。运用ＭＲＩ不同脉冲序列成像，可清楚地显示髓核、纤维环及后纵韧带和硬膜囊等结构。分别经椎间盘、椎间孔和椎弓根三个断层做ＣＴ扫描，并测量髓核突出率及动力位椎管造影有助于诊断破裂型椎间盘突出。文章讨论了椎间盘突出的分类及各种影像学检查的意义。     

马尾神经根松弛症的椎管造影诊断研究

报告了１５例马尾神经根松弛症（ＲＮＲ）的椎管造影结果。发现ＲＮＲ均发生于腰椎管狭窄症的基础上，在椎管梗阻上方造影剂呈不规则充盈缺损，马尾神经根呈现波浪状或蛇形卷曲，甚至＂打结＂。腰椎屈曲时，上述影像缓解或消失，而伸展位时又重现或加重。造影检查发现ＲＮＲ的程度与椎管狭窄程度无相关关系。     

半夏白术天麻汤加减治疗椎动脉型颈椎病78例

椎动脉型颈椎病(cervical spondylosis of vertebral artery type,CSA)是临床常见的一种疾病,临床常见有眩晕、头痛、耳鸣、眼花、颈后伸或侧弯时眩晕加重,甚至猝倒、昏厥等眩晕为主要症状,故又称"颈性眩晕"。临床又称为椎动脉压迫综合征、椎动脉缺血综合征、椎-基底动脉供血不足等。本病属于中医学"眩晕"、"头痛"、"项强"、"颈肩痛"等范畴。笔者自2002年8月～2011年9月采用半夏白术天麻汤加减治疗本病78例,并与单用西医常规治疗的52例进行对照观察,现报告如下。     

应用pcr-sscp技术检测结核分枝杆菌耐链霉素相关基因rpsl和rrs突变

目的 应用聚合酶链反应-单链构象多态性(pcr-sscp)技术,建立快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsl和rrs突变的新方法.方法 采用常规药敏试验检测112株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的耐药性,建立pcr-sscp法检测耐药相关基因rpsl和rrs的突变.采用pcr直接测序技术(pcr-ds)确定rpsl和rrs基因突变情况并与pcr-sscp法检测结果进行比较.结果 112株结核分枝杆菌临床分离株均携带rpsl和rrs基因,52株(46.4％)对链霉素敏感,其中有1株敏感菌株rrs基因pcr-sscp条带异常,pcr-sscp方法的特异性为98.1％ (51/52).60株(53.6％)结核分枝杆菌对链霉素耐药,用pcr-sscp方法分别检出46株(76.6％) rpsl基因和11株(18.3％)rrs基因条带异常,1株同时出现rpsl和rrs基因条带异常,pcr-sscp检测的灵敏度为93.3％ (56/60).结论 pcr-sscp方法检测结核分枝杆菌耐药相关基因rpsl和rrs突变的特异性和敏感性高,临床上值得推广应用. abstract： objective to establish a novel rapid detection method based on pcr-single-strand-conformational polymorphism (pcr-sscp) to determine mutation of streptomycin-resistance associated rpsl and rrs genes in isolates of mycobacterium tuberculosis (mtb).methods streptomycin-resistance of 112 mtb isolates was detected using the routine drug susceptibility test,and a special pcr-sscp assay was established.the mutations of rpsl and rrs genes in streptomycin-resistant mtb isolates were detected by pcr-sscp and pcr direct sequencing (pcr-ds) ; the results from two techniques were compared.results all isolates had both rpsl and rrs genes.fifty-two isolates (46.4％) were streptomycin susceptible,in which only 1 isolate showed abnormal pcr-sscp fragments from rrs gene,and the specificity of pcr-sscp was 98.1％ (51/52).sixty isolates (53.6％) were streptomycin-resistant,in which 46 (76.6％) and 11 ( 18.3％ ) isolates presented the abnormal pcr-sscp fragments of rpsl and rrs gene,respectively.one streptomycin-resistant isolate showed abnormal pcr-sscp fragments from both rpsl and rrs genes.the sensitivity of pcr-sscp was 93.3％ (56/60).conclusion the pcr-sscp that established in this study is a specific and sensitive method for rapid detection of the streptomycin-resistance associated mutations in rpsl and rrs genes of mtb.