基于网络药理学及分子对接技术探讨利胆化痰活血方治疗代谢综合征的分子机制＊

目的 利用网络药理学和分子对接技术探讨利胆化痰活血方治疗代谢综合征的药效活性成分及作用机制。方法 通过TCMSP数据库（http：//tcmspw.com/tcmsp.php）和SwissTargetPrediction（http：//www.swisstargetprediction.ch）筛选利胆化痰活血方的有效成分及靶点，从DisGeNET数据库（https：//www.disgenet.org）中获取代谢综合征疾病靶点，与利胆化痰活血方有效成分靶点进行韦恩分析。针对利胆化痰活血方有效成分和代谢综合征相关靶点进行GO功能分析与KEGG通路富集分析，并建立交集靶点的PPI网络和有效成分-核心靶点关联网络。利用分子对接技术预测有效成分与靶点的潜在结合活性。结果 网络药理学分析得出38个活性成分和14个靶点组成的129个有效成分与靶点组合可能是其潜在起效组合。其作用通路与内分泌抵抗，EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药，HIF-1信号通路，FoxO信号通路，Rap1信号通路，MAPK信号通路，ErbB信号通路，鞘脂信号通路，Ras信号通路，趋化因子信号通路相关。分子对接将其聚焦到AKT1，PPARG及MMP9三个靶点中，动物实验显示，代谢综合征大鼠肝脏中AKT1，PPARG的mRNA水平显著降低（P<0.05，P<0.01），经过利胆化痰活血方治疗后显著升高（P<0.05，P<0.01）。结论 本研究发现利胆化痰活血方可能作用于肝脏中AKT1和PPARG治疗代谢综合征，对进一步揭示利胆化痰活血方对代谢综合征的治疗作用提供新的证据和研究思路。     

代谢综合征中医证候与血清脂肪因子表达规律研究

目的通过对代谢综合征(MS)常见中医证型的分析和血清脂肪因子水平的检测,研究MS患者中医证候规律及其与血清脂肪因子的相关性。方法对235例代谢综合征患者进行中医辨证分型,分为痰瘀互结组、痰浊阻遏组、气阴两虚组和阴虚热盛组,检测其血清脂肪因子,并对中医证候进行频数分析。结果痰瘀互结组和痰浊阻遏组血清瘦素(LEP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、血清抵抗素(Resistin)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平较高,与气阴两虚组比较差异有统计学意义(P<0.05);痰瘀互结组和痰浊阻遏组血清脂联素(APN)水平较低,与气阴两虚组比较差异有统计学意义(P<0.05);气阴两虚组视黄醇结合蛋白-4(RBP4)较高,与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。代谢综合征中医症状、舌脉及病机出现的频次和频率具有一定规律,其病机出现的频次和频率由高到低依次为痰浊阻遏>痰瘀互结>气阴两虚>阴虚热盛。结论痰浊和血瘀可能是脂肪因子分泌及代谢异常并导致代谢综合征的关键病理环节。     

不同浓度的柴胡人参药对血清对非酒精性脂肪性肝细胞模型的毒性评估和脂肪变的影响＊

目的 通过观察不同浓度的柴胡人参药对血清对混合脂肪酸诱导的HepG2细胞模型脂肪变的影响，探讨NAFLD细胞模型的建立，筛选出药物血清最佳的效应浓度。方法 HepG2常规培养后，分为正常组（C）组，模型组1（M1×）、模型组2（M2×），将C组加入含10%的小牛血清DMEM培养基继续培养，模型组分别加入两种不同体积配置混合脂肪酸0.5 mmol·L^-1（13.5 μL油酸+6.5 μL棕榈酸）和1 mmol·L^-1（27 μL油酸+13 μL棕榈酸）造模，选出最佳的模型后，将正常组大鼠血清（Zq组）、吡格列酮组大鼠血清（P组）和药对组大鼠血清（Y组）按不同浓度干预细胞24 h，用CCK-8试剂盒检测各组血清毒性，对造模组细胞进行油红O染色和TG含量检测，筛选出含药血清最佳的效应浓度。结果 ①1 mmol·L^-1混合脂肪酸可使脂肪变细胞着色明显，其平均光密度值和TG含量显著高于0.5 mmol·L^-1浓度组（P < 0.01）；②每组含药血清IC₅₀浓度分别为：Zq组：44.27%，是Y组：32.34%，P组：36.00%；IC₁₀浓度分别为：Zq组：10.26%，Y组：10.84%，P组：11.49%，各组含药血清浓度 ≤ 10%时，对于HepG2细胞来说较为安全；③与M组相比，10%浓度的含药血清均能够较显著的减少HepG2细胞内脂滴蓄积，显著降低细胞内甘油三脂（TG）含量（P < 0.01）。结论 1 mmol·L^-1油酸：棕榈酸（2：1）可成功诱导HepG2细胞脂肪变模型，并且10%浓度的柴胡人参药对血清的作用最强，能有效改善HepG2细胞的脂肪变。     

逍遥散联合恩替卡韦对肝郁脾虚型乙型肝炎肝硬化代偿期患者纤维化及铁代谢的影响

目的观察逍遥散联合恩替卡韦对肝郁脾虚型乙型肝炎肝硬化代偿期患者的肝纤维化指标、门静脉压力的影响,比较正常人及肝郁脾虚型乙型肝炎肝硬化代偿期患者治疗前后血清中铁代谢相关指标,并初步探讨联合用药的作用机制。方法采用随机数字表法将72例患者分为两组,各36例,治疗组予逍遥散联合恩替卡韦治疗,对照组仅予恩替卡韦治疗,两组疗程均为6个月;观察患者治疗前后总体疗效、肝纤维化指标、肝纤维化评分、腹部彩超参数(包括门静脉内径、脾厚度、脾长度)以及血清铁、铁蛋白、总铁结合力、铁调素(hepcidin)等指标变化。结果治疗组总有效率为90.00%,对照组总有效率为66.67%,治疗组总体疗效优于对照组(P<0.05)。治疗后两组纤维化指标HA、LN、IV-COL、PIIINP各项均较治疗前明显下降,且两组间比较,差异均有统计学差异(P<0.05);治疗组患者治疗后APRI、GPR指数均较前明显下降(P<0.05)。两组治疗后APRI、FIB-4、GPR各项指数改善治疗组疗效均优于对照组(P<0.05)。与健康人比较,肝郁脾虚型乙肝肝硬化代偿期患者血清中铁、铁蛋白、hepcidin显著升高,总铁结合力显著下降(P<0.05)。治疗后治疗组血清中铁、铁蛋白、hepcidin明显下降,总铁结合力明显升高(P<0.05);对照组血清中铁、铁蛋白、明显下降(P<0.05);治疗组改善血清铁、总铁结合力、hepcidin的疗效优于对照组(P<0.05)。结论逍遥散联合恩替卡韦在改善肝纤维化方面疗效优于单用恩替卡韦。联合用药能够在一定程度上改善患者铁过载水平,其作用机制可能与调节机体铁代谢平衡有关。     

傅志泉病证结合论治消化性溃疡经验

傅志泉教授认为脾胃虚弱是消化性溃疡（PU） 的根本发病内因，气血失调是PU 发病的病理关键，湿热蕴结是PU发病的重要因素。临床辨证，当标本兼顾，莫忘气血；临床治疗，当衷中参西，相得益彰。为此，在PU 的治疗中，傅教授常以健脾为主，提高胃黏膜修复能力；理气为辅，缓解胃脘疼痛证候；化瘀为要，改善胃黏膜微循环；清解为治，有助于幽门螺杆菌感染的根除。     

傅志泉论治腹泻型肠易激综合征经验介绍

傅志泉教授系第二批全国名老中医金亚城的学术经验继承人，从事脾胃临床、科研、教学近35年，同时被誉为上海、杭州二地的名中医，对脾胃病疑难病症的临床诊治经验颇丰，尤其是对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的治疗，临证用药精确，别有特色，疗效良好。笔者有幸跟师临诊，现总结傅教授临床诊治IBS-D的特色及经验如下，以飨同道。     

傅志泉基于病证结合治疗慢性萎缩性胃炎经验

傅志泉临床诊治慢性萎缩性胃炎倡导“病证结合”的中西医结合诊疗新思路,其认为脾胃虚弱是慢性萎缩性胃炎的临床病理基础,肝胃不和是慢性萎缩性胃炎的临床病理特点,并且贯穿其发展的全程。临床施治,以理气和胃为主,调整胃动力障碍与胃酸浓度;辅以健脾益气,促使萎缩细胞与胃黏膜修复;佐以活血化瘀,改善胃黏膜血液循环及营养情况;兼顾清热滋阴,辅助根除HP与黏膜病变逆转;同时,调摄饮食,畅达情志,优选辨证论治调控途径,切中慢性萎缩性胃炎的病损关键,以提高临床疗效。     

逍遥散及其功效拆方对慢性铁过载诱导的肝纤维化的影响

目的通过制作慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化模型,观察逍遥散对肝纤维化的改善作用及对体内铁代谢过程的影响,并通过功效拆方研究,探索逍遥散中疏肝药、健脾药、养血药在整方疗效中的作用及地位。方法 通过腹腔注射右旋糖酐铁50 mg/kg/d,连续7周制作慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化模型,药物干预在造模同时每日通过灌胃的方式给予逍遥散全方、逍遥散去疏肝药、逍遥散去健脾药、逍遥散去养血药、去铁胺（DFO）。使用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血清铁（SI）、铁蛋白（SF）水平;肝组织进行病理组织学检测,包括HE染色、Masson染色、苦味酸-天狼星红染色等;免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA）、I型胶原蛋白（COL-1）的表达水平;采用火焰原子吸收光谱法检测大鼠肝组织铁含量。结果 与对照组比较,模型组大鼠肝功能ALT、AST明显升高,病理切片HE染色符合肝纤维化镜下表现,Ishak纤维化评分显著升高,Masson染色、苦味酸-天狼星红染色可见胶原纤维沉积明显,免疫组化结果提示肝组织内α-SMA、COL-1表达显著上升,血清铁、铁蛋白、肝脏总铁含量均显著升高。与模型组比较,逍遥散全方及各功效拆方组可明显降低大鼠肝功能ALT、AST,改善病理过程如Ishak评分及胶原染色半定量等均显著下降,肝组织α-SMA、COL-1表达显著降低,血清铁、铁蛋白、肝脏总铁含量亦明显下降,阳性对照药物去铁胺结果与逍遥散全方相仿。与逍遥散全方相比,逍遥散各功效拆方组均较整方疗效有显著降低。结论 逍遥散可显著改善慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化,其方中疏肝药、健脾药、养血药均对改善铁过载及纤维化有一定作用。推测逍遥散抑制铁过载维持铁稳态的作用可能是其疏肝、健脾、养血功效的核心机制。     

代谢综合征中医证候糖脂代谢及瘦素表达规律研究

目的:研究代谢综合征常见中医证型糖脂代谢及瘦素表达规律,为本病的辨证施治提供客观依据。方法:对235例代谢综合征患者进行中医辨证分型,即痰瘀互结组、痰浊阻遏组、气阴两虚组和阴虚热盛组,观测空腹血糖(FPG)、血脂—甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);血压(BP);腰围(WC);体重指数(BMI);空腹胰岛素(FINS)和瘦素(LEP);计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果:气阴两虚组的BMI和WC与痰浊阻遏组比较有显著性差异(P0.05)。痰浊阻遏组收缩压(SBP)较高,与气阴两虚组比较有显著性差异(P0.05),痰浊阻遏组舒张压(DBP)亦较高,与阴虚热盛组比较有显著差异(P0.05)。气阴两虚组TG较高,与痰浊阻遏组比较有显著差异(P0.05)。痰浊阻遏组FINS较高,与气阴两虚组和阴虚热盛组比较均有显著差异(P0.05);痰浊阻遏组ISI较低,与其他三组比较均有显著差异(P0.05)。痰瘀互结组和痰浊阻遏组LEP与气阴两虚组比较均显著升高(P0.05)。结论:痰浊是代谢综合征发生和发展的关键病理环节,高瘦素血症使"脂肪—胰岛内分泌轴"紊乱和胰岛素抵抗在其中发挥重要的作用。     

利胆化痰活血方对代谢综合征大鼠糖脂代谢及血压的影响

目的:观察利胆化痰活血方对高脂高糖高盐饮食诱导的代谢综合征大鼠糖脂代谢及血压的影响。方法:42只SD大鼠随机分为空白组,模型组,利胆化痰活血方低、中、高剂量(6.25 g·kg^-1、12.5 g·kg^-1、25 g·kg^-1)组。采用喂养12周的高脂高糖高盐饮食建立代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠模型,空白组大鼠喂养普通饲料。各组大鼠分别予相应药物,空白组和模型组予同体积的生理盐水,连续6周。各组分别测量大鼠尾动脉收缩压,并取腹主动脉血检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipid protein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipid protein cholesterol,LDL-C)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting serum lisulin,FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(insulin resistant index,IRI);选取空白组,模型组和利胆化痰活血方高剂量组,取肝脏,行HE染色,观察光镜下脂肪变程度;评估利胆化痰活血方的疗效。结果:利胆化痰活血方干预6周后,与模型组比较,利胆化痰活血方高剂量组大鼠血清TC、TG、FINS、IRI均明显降低(P<0.05),显著降低LDL-C、FBG和收缩压水平(P<0.01);肝脏脂肪变程度明显减轻。结论:利胆化痰活血方能够改善MS大鼠糖脂代谢,并降低血压。