HPLC研究川芎-赤芍配伍的化学成分变化

中药复方配伍理论是中药方剂的精华。中药配伍后多化学成分的变化研究尚未见报道。本文首次应用HPLC-DAD研究川芎-赤芍配伍的多化学成分变化。由于中药成分复杂,需要建立稳定、重复、可靠的液相色谱分析方法;然后用液相色谱的统一方法分离样品和数据处理;通过比较合煎液和单煎液中各成分的保留时间和紫外光谱确定合煎液中各峰的归属;并可研究配伍后化学成分含量的变化。实验结果表明,川芎-赤芍配伍后少数化学成分含量发生变化,但没有发现新峰的产生。     

RP-HPLC测定天麻中天麻素的含量

目的 建立RP-HPLC测定天麻中天麻素含量的分析方法。方法 优化药材的提取及色谱的分析方法得分离良好的色谱图,外标法定量。色谱柱:Hypersil ODS色谱柱(4.6×250 mm);流动相:甲醇-0.1％冰醋酸水溶液(5:95);检测波长:270 nm。结果 色谱图中12个峰均可用其进行准确定量,其中天麻素含量测定的线性范围为0.60~2.41μg(r=0.999 9),平均加样回收率为97.85％,RSD=1.17％(n=5)。结论 本方法简便,准确,重现性好,可用于天麻中天麻素的含量测定,同时也可用于其它水溶性成分的定量。     

基于成分相互作用的中药复方组分配伍研究

传统中药复方是按照七情和合、君臣佐使的原则组成.君臣佐使与西药的加和、协同、拮抗的相互作用模式密不可分.组分配伍遵循了传统中医理论指导,有效成分和作用机理相对清楚,是多种组分间协同、加和、拮抗的协调统一.组分配伍模式可通过组分间直接发生化学成分变化,或影响其它组分的吸收、代谢、药效、毒性等诸多性质.通过组分间相互作用研究可从复杂体系中理清哪些成分对主要功效有协同增效和加和作用,哪些成分对毒副作用有拮抗作用,并且通过多因素、动态药理模型指导辨证施治的组分配伍及组分优化.在此基础上,探讨组分间与靶点间的相互联系,这为阐明组分配伍机制、优化配伍组分,从而推动中药复方的现代开发模式起到积极的作用.本文通过分析配伍研究的基本科学问题,回顾配伍的现代研究进展,结合作者的研究工作,期望获得组分配伍现代研究的突破性启示.     

天麻化学成分研究(Ⅰ)

目的 研究天麻中的弱极性成分。方法 硅胶柱色谱结合制备薄层层析分离，光谱分析鉴定结果。结果 分离并鉴定了7个化合物。他们分别为：对差劲苄基乙基醚（I），β-谷甾醇（Ⅱ），棕榈酸（Ⅲ），2，2’-亚甲基-二（6-叔丁基-4-甲基苯酚）（Ⅳ），对羟苄基甲醚（Ⅴ），邻苯二甲酸二甲酯（Ⅵ）和对羟基苯甲醛（Ⅶ）。结论 化合物Ⅳ和Ⅵ为天麻中首次报道成分，其中，化合物Ⅳ为四取代苯的二聚体，为首次从天麻属及兰科植物中分离鉴定。     

何首乌和菟丝子对破骨细胞和成骨细胞增殖及分化的影响

目的:研究中药何首乌和菟丝子醇提物和主要单体成分对破骨细胞和成骨细胞增殖及分化的影响.方法:MTT法检测小鼠前破骨细胞株RAW264.7和小鼠颅顶前成骨细胞MC3T3-E1 subclone 14的存活率.RANKL诱导RAW264.7分化后,试剂盒检测TRAP酶活力.结果:500 mg·L-1何首乌醇提物作用36 h,RAW264.7细胞存活率降至76.45％.100 mg·L-1菟丝子醇提物作用36 h,存活率为38.47％,并呈时间依赖性.何首乌中的大黄素、大黄酸、大黄素甲醚对RAW264.7的生长有较强的抑制活性;二苯乙烯苷和菟丝子中的金丝桃苷则无此活性.在0.1～1.0 mg·L-1何首乌和菟丝子醇提物不同程度抑制RANKL诱导的RAW264.7的TRAP酶活力.何首乌和菟丝子醇提物对成骨细胞MC3T3-E1生长抑制作用较弱,并在一定剂量和作用时间,表现出一定的促增殖作用.结论:何首乌和菟丝子在高剂量下可直接抑制前破骨细胞增殖,但对成骨细胞毒性较小;在低剂量下可抑制前破骨细胞分化,并对成骨细胞生长略有促增殖作用.     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析何首乌提取物体内外成分

阐明何首乌Polygonum multiflorum体内药源性成分。该研究首次以靶器官肝脏中的药源性成分为研究对象,基于UPLC-Q-TOF-MS技术和Targeted-MS-MS模式,采用安捷伦Mass Hunter,Metabolite ID数据处理软件对保留时间、精确相对分子质量、一级、二级质谱信息进行分析并结合标准品和参考文献比对,从中鉴定出5个原型成分、6个代谢产物。此外,该研究还对何首乌给药后大鼠血浆和提取物中的药源性成分进行了分析,从血浆中推出鉴定8个原型成分、19个代谢产物,从何首乌提取物中鉴定出30个化合物。其中大黄素氧化乙酰化、羟化甲基化、葡萄糖醛酸化氧化、羧基化葡萄糖醛酸化和决明柯酮葡萄糖醛酸化代谢产物为首次报道。通过何首乌体内外成分之间的比对分析,初步明确了肝脏中的药源性成分和提取物-血液-肝脏之间成分的传递和转化规律,同时也进一步深化了对何首乌体内药源性成分的认识。     

中药虎杖雌激素活性组分的分离及活性测试

药材虎杖用70%乙醇冷浸法进行提取。对虎杖中蒽醌类化合物集中分布的乙酸乙酯分配组分首先进行硅胶柱分离,得到6个组分,利用转基因酵母法测定其雌激素活性,结果表明前三个组分具有较高的雌激素活性。进一步对其中的第三个活性组分利用制备高效液相色谱进行了精制,对流出物按2分钟间隔收集,共得到20个馏分。转基因酵母法测定其雌激素活性的结果显示,在这20个馏分当中,有5个馏分具有较强的雌激素活性。分别将其雌激素活性与化学组成进行关联,发现其中的sub-fraction-13中可能存在非大黄素的雌激素活性成分。     

天麻化学成分研究(Ⅰ)

目的 研究天麻中的弱极性成分。方法 硅胶柱色谱结合制备薄层层析分离，光谱分析鉴定结果。结果 分离并鉴定了7个化合物。他们分别为：对差劲苄基乙基醚（I），β-谷甾醇（Ⅱ），棕榈酸（Ⅲ），2，2’-亚甲基-二（6-叔丁基-4-甲基苯酚）（Ⅳ），对羟苄基甲醚（Ⅴ），邻苯二甲酸二甲酯（Ⅵ）和对羟基苯甲醛（Ⅶ）。结论 化合物Ⅳ和Ⅵ为天麻中首次报道成分，其中，化合物Ⅳ为四取代苯的二聚体，为首次从天麻属及兰科植物中分离鉴定。     

HPLC法测定川产道地药材川芎中川芎嗪的含量

目的:建立川芎中川芎嗪的含量测定方法,并测定川产道地药材川芎中川芎嗪的含量。方法:采用高效液相色谱法测定川芎中川芎嗪的含量。色谱柱:Phenomenex Gemini C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-四氢呋喃-20 mmol.L-1醋酸铵水溶液(pH9.5)(68∶7∶425);流速:1.0 mL.min-1;检测波长:280 nm;柱温:35℃。结果:川产道地药材川芎中川芎嗪含量甚微,大多数药材含量低于检测限0.10μg.g-1而未检出。结论:川芎嗪为川芎中主要有效成分是一个认识误区,本方法测定结果可靠,为进一步科学认识川芎药效成分提供参考。     

中药虎杖雌激素活性组分的分离及活性测试

药材虎杖用70％乙醇冷浸法进行提取。对虎杖中蒽醌类化合物集中分布的乙酸乙酯分配组分首先进行硅胶柱分离，得到6个组分，利用转基因酵母法测定其雌激素活性，结果表明前三个组分具有较高的雌激素活性。进一步对其中的第三个活性组分利用制备高效液相色谱进行了精制，对流出物按2分钟间隔收集，共得到20个馏分。转基因酵母法测定其雌激素活性的结果显示，在这20个馏分当中，有5个馏分具有较强的雌激素活性。分别将其雌激素活性与化学组成进行关联，发现其中的sub-fraction-13中可能存在非大黄素的雌激素活性成分。