基于活体成像技术的裸鼠卵巢癌休眠模型的建立

目的 建立基于活体成像的裸鼠卵巢癌休眠模型并利用小动物活体成像技术验证休眠细胞的存在.方法 采用慢病毒载体对人卵巢癌skov-3细胞稳定转染萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase gene),经筛选获得稳定表达荧光素酶基因的人卵巢癌细胞株(skov-3/luc).将skov-3/luc细胞接种至裸小鼠右侧腋部皮下,成瘤后观测荧光并做肿瘤切除手术,术后的裸鼠再常规喂养8周后选取接种肿瘤处肉眼未见肿瘤组织生长的裸鼠进行活体成像观察,显示接种处肿瘤细胞荧光阳性者,即认为卵巢癌裸鼠休眠模型建立成功.结果 筛选到了稳定表达Luc的skov-3/luc细胞株;成功构建了基于活体成像的裸鼠卵巢癌休眠模型,并利用小动物活体成像技术验证了裸鼠体内卵巢癌休眠细胞的存在.结论 利用活体成像技术构建的裸鼠卵巢癌休眠模型为研究肿瘤休眠的机制及诱导和维持肿瘤细胞休眠的方法提供了理想的实验动物模型.     

黄芪多糖可能通过调控细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的敏感性北大核心CSCD

该研究旨在探讨黄芪多糖可能通过调节细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,并探讨其作用的可能机制。该实验将HeLa细胞分为对照组、顺铂组、黄芪多糖组和黄芪多糖联合顺铂组,分别运用MTr法检测各实验组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测各实验组HeLa细胞的凋亡及周期情况;RT-PCR法检测自噬相关蛋白beclinl,LC3II,1062的mRNA表达情况;Western blot法检测自噬相关蛋白beclinl,LC3Ⅱ,LC3Ⅰ,p62的表达水平。MTT结果显示,与对照组相比,各给药组均可明显抑制HeLa增殖（P〈0．05）,联合给药组的抑制作用更加显著（P〈0．01）。流式细胞术结果显示,与对照组相比,各给药组HeLa的凋亡率均明显增加（P〈0．05）,其中联合给药组的凋亡率显著增加（P〈0．01）;与对照组相比,各给药组HeLa细胞均发生了明显的周期阻滞,以G0／G1期的阻滞最为明显,其中联合给药组G0／G1期的阻滞显著。RT-PCR和Westernblot结果显示,与对照组相比,beclinl、LC3Ⅱ基因及蛋白表达上调,p62基因及蛋白的表达下调,联合给药组的上述相应变化更加显著。通过以上实验结果的分析,推测黄芪多糖可能通过调节细胞自噬来增加宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,这一作用的可能机制是通过上调自噬相关蛋白beclinl,促进LC3I转化为LC3Ⅱ,下调自噬标记蛋白p62,增强HeLa细胞自噬活性,从而增加HeLa细胞对顺铂化疗的敏感性。     

联合监测CA125和常规凝血指标及D-二聚体在卵巢癌中的应用价值

目的 探析常规凝血指标及血浆 D-二聚体和CA125水平对卵巢肿瘤的影响及其监测的重要意义. 方法 选择我院2013年1月-2015年1月因卵巢肿瘤住院接受手术治疗的患者184例,其中88例为卵巢癌组,96例为卵巢良性肿瘤组;同期入院的非肿瘤患者88例为对照组.测定3组 CA125、血小板和PT、APTT、Fib、TT 等凝血指标及D-二聚体水平并比较. 结果 卵巢癌组 Fib 、D-二聚体、CA125 均高于卵巢良性肿瘤组和对照组(P<0.05). 3组患者的 APIT、PT、TT 及血小板相比较差异无统计学意义(P>0.05);卵巢癌组中晚期(Ⅲ、Ⅳ期)患者CA125、常规凝血指标、D-二聚体、血小板水平均高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05). 结论 联合监测CA125、血浆D-二聚体及常规凝血指标水平,可早期给予卵巢癌患者预防性的抗凝治疗,防止术后血栓的形成;同时可对高凝状态进行评估,从而控制卵巢癌的发展.     

活体成像动态观察黄芪多糖对裸鼠卵巢癌细胞休眠的维持作用

目的:利用活体成像技术观察黄芪多糖对裸鼠卵巢癌细胞休眠的维持作用。方法:选取建立成功的卵巢癌细胞休眠裸鼠模型30只随机分成3组:即对照组、黄芪多糖组、顺铂组,每组10只,连续给药14天;利用活体成像系统分别在给药前1天、给药后第7天、第14天监测各组裸鼠卵巢癌细胞休眠情况。结果:与对照组比较,黄芪多糖组给药后第7天、第14天,裸鼠体质量无明显变化;而顺铂组在给药后第7天、第14天,体质量明显降低,差异均有统计学意义(P0.01)。对照组裸鼠卵巢癌休眠细胞光子量随着时间而升高。与对照组比较,黄芪多糖组和顺铂组在给药第7天、第14天时,裸鼠肿瘤休眠细胞光子量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:黄芪多糖具有较好的维持裸鼠卵巢癌细胞休眠的作用,活体成像技术可动态地观察肿瘤细胞休眠的情况,为黄芪多糖应用于临床提供理论依据。     

黄芪多糖可能通过调控细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的敏感性

该研究旨在探讨黄芪多糖可能通过调节细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,并探讨其作用的可能机制。该实验将HeLa细胞分为对照组、顺铂组、黄芪多糖组和黄芪多糖联合顺铂组,分别运用MTT法检测各实验组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测各实验组HeLa细胞的凋亡及周期情况;RT-PCR法检测自噬相关蛋白beclin1,LC3Ⅱ,p62的mRNA表达情况;Western blot法检测自噬相关蛋白beclin1,LC3Ⅱ,LC3Ⅰ,p62的表达水平。MTT结果显示,与对照组相比,各给药组均可明显抑制HeLa增殖(P0.05),联合给药组的抑制作用更加显著(P0.01)。流式细胞术结果显示,与对照组相比,各给药组HeLa的凋亡率均明显增加(P0.05),其中联合给药组的凋亡率显著增加(P0.01);与对照组相比,各给药组HeLa细胞均发生了明显的周期阻滞,以G0/G1期的阻滞最为明显,其中联合给药组G0/G1期的阻滞显著。RTPCR和Western blot结果显示,与对照组相比,beclin1、LC3Ⅱ基因及蛋白表达上调,p62基因及蛋白的表达下调,联合给药组的上述相应变化更加显著。通过以上实验结果的分析,推测黄芪多糖可能通过调节细胞自噬来增加宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,这一作用的可能机制是通过上调自噬相关蛋白beclin1,促进LC3Ⅰ转化为LC3Ⅱ,下调自噬标记蛋白p62,增强HeLa细胞自噬活性,从而增加HeLa细胞对顺铂化疗的敏感性。