黄素化颗粒细胞分离提纯方法的比较研究

目的比较不同人卵巢颗粒细胞分离提纯方法的效果。方法收集体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者取卵后的卵泡液,分别采用密度梯度离心法、红细胞裂解法、密度梯度离心法+红细胞裂解法分离、提取黄素化颗粒细胞,比较3种方法获取的细胞数量、存活率、纯度以及生长、贴壁情况。结果密度梯度离心法获取的颗粒细胞数量最低,但体外培养生长状态良好且细胞贴壁状态最佳;红细胞裂解法获取的颗粒细胞数量均多于其他两种方法(P0.05),但细胞存活率低,体外培养生长状态欠佳、细胞贴壁差;卵泡刺激素受体(FSHR)细胞免疫组化及荧光鉴定显示3种方法获取的颗粒细胞纯度均90%。结论密度梯度离心法获取的细胞数目少,但生长状态及贴壁情况最佳,是分离提纯颗粒细胞较为理想的选择方法。     

辅助生殖技术实验教学对生殖医学研究生培养的重要性探讨

基于生殖医学领域快速发展、人才稀缺的现状,本文采用调查问卷的方式,对生殖医学研究生学习辅助生殖技术的意愿、辅助生殖技术实验课的开展情况及教学满意度、开设辅助生殖技术实验课的必要性等问题开展调查。通过分析生殖医学研究生教学的现状和本问卷的调查统计结果,探讨在生殖医学研究生培养过程中加强辅助生殖技术实验室教学的必要性和局限性,并提出相应的教学策略。     

胚胎冻融后体外培养时间对妊娠结局的影响

目的:探讨人卵裂期胚胎玻璃化冷冻-复苏后体外培养时间对妊娠结局的影响。方法:回顾性分析623例冻融胚胎移植(FET)周期的资料,根据解冻后不同移植时间分为当日移植组(A组,n=307)和次日移植组(B组,n=316);再根据卵裂球的生长与否将B组分为全部生长(B1组,n=184),部分生长(B2组,n=101)和均无生长(B3组,n=31)3组。比较各组间的临床妊娠率和胚胎种植率。结果:A组临床妊娠率和种植率分别为36.2%和19.6%,B组为38.3%和20.1%,组间差异无统计学意义(P>0.05);次日移植的B1组临床妊娠率和种植率(41.8%和23.4%)最高,但与B2组(39.6%和22.8%)比较差异无统计学意义(P>0.05);B3组最低(12.9%和5.4%),与B1、B2组比较有统计学差异(P<0.01)。结论:延长冻融胚胎体外培养时间不能显著提高冻融胚胎移植周期的妊娠率和种植率,延长培养时间后,无生长的胚胎发育潜能低。因此可以通过观察复苏后胚胎的生长情况评估其发育潜能,选择优质的胚胎进行移植。     

上焦宣痹汤对小儿支原体肺炎痰热闭肺证临床观察

目的观察上焦宣痹汤对小儿支原体肺炎痰热闭肺证的临床疗效。方法将确诊患儿随机分为治疗组和对照组,各55例。对照组口服阿奇霉素颗粒,并给予对症治疗。治疗组在对照组治疗基础上应用上焦宣痹汤加减治疗,7d为1个疗程,1个疗程后统计疗效。结果治疗组治愈率为74．54％,总有效率为92．73％;对照组治愈率为54．55％,总有效率为85．45％,治疗组的治愈率和总有效率均高于对照组（P〈0．05）。结论上焦宣痹汤可明显改善小儿痰热闭肺型肺炎的临床症状、肺部体征以及中医症候,提高小儿支原体肺炎治愈率,缩短其治疗时间,值得临床推广应用。     

小鼠富含半胱氨酸分泌蛋白-1真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:构建小鼠富含半胱氨酸分泌蛋白-1(Crisp-1)真核表达载体,并观察其在COS-7细胞中的表达。方法:从小鼠附睾组织中提取总RNA,RT-PCR扩增Crisp-1基因开放阅读框(ORF),将目的基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1上,经脂质体介导转染COS-7细胞,并利用间接免疫荧光和RT-PCR检测其在COS-7细胞中的表达。结果:酶切电泳鉴定结果显示Crisp-1基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与基因库(GeneBank)中的Crisp-1序列相符。脂质体转染后,间接免疫荧光和RT-PCR结果均表明重组质粒pcDNA3.1-Crisp-1能在COS-7细胞中表达。结论:成功获得了能在COS-7细胞中表达的小鼠Crisp-1DNA疫苗的真核表达质粒pcDNA3.1-Crisp-1,为后续研究其生物学活性及免疫避孕效应奠定了基础。     

协坤

[理化性质]白色,无臭,在乙醇、丙酮或氯仿中易溶,在植物油中微溶,在水中几乎不溶. [药理作用] 本品为天然雌二醇的戊酸盐,属天然雌激素[1,2],具有雌二醇的药理作用,能促进和调节女性生殖器官和第二性征的正常发育.使血清雌二醇水平升高,用药后达到激素补充治疗(HRT)中有效雌激素浓度(220pmol.L-1),相当于正常早、中卵泡期的平均雌激素水平[3];对垂体促卵泡激素(FSH)的释放有抑制作用,用药4个周期血清FSH水平明显下降[4];对雌激素缺乏引起的症状有明显的疗效[2].     

IVF-ET后妊娠丢失发生的相关因素分析

目的:综合分析体外受精—胚胎移植(invitro fertilization and embryotransfer,IVF-ET)后生化妊娠丢失及临床妊娠流产的影响因素。方法:收集2006～2008年行IVF-ET助孕治疗后妊娠的327例资料,根据其不同的妊娠结局分为A、B、C3组,对可能的影响因素进行回顾性分析,并比较3组在行IVF-ET治疗过程中的各种相关因素之间的差异。结果:单因素分析显示年龄、取卵日的子宫内膜厚度、HCG注射日的E2水平及有无排卵障碍在3组之间差异有统计学意义(P0.05),Logis-tic回归分析表明年龄与妊娠成功率呈负相关,取卵日子宫内膜厚度及HCG注射日的E2水平与妊娠成功率呈正相关。结论:年龄、取卵日子宫内膜厚度、HCG注射日的E2水平是影响妊娠结局的主要因素,排卵障碍也是IVF-ET后导致不良妊娠结局的相关因素。     

角音干预早产儿足跟采血疼痛临床研究

目的:观察角音对早产儿足跟采血时疼痛刺激的改善效果。方法:选取90例早产儿为研究对象,随机分为角音组、西方音乐组和对照组各30例,在进行足跟采血时分别播放中医五行音乐角音、西方音乐(肖邦的《小夜曲》),对照组不播放音乐。比较3组疼痛面容持续时间,早产儿疼痛量表(PIPP)评分,新生儿疼痛评估量表(NIPS)评分,心率、血氧饱和度恢复正常所需时间,啼哭持续时间及啼哭发生率。结果:治疗后,西方音乐组、角音组疼痛面容持续时间均短于对照组,NIPS及PIPP评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P 0.01);角音组疼痛面容持续时间短于西方音乐组,PIPP评分低于西方音乐组,差异均有统计学意义(P 0.01)。治疗后,西方音乐组、角音组心率及血氧饱和度恢复正常时间均短于对照组,差异均有统计学意义(P 0.01);角音组血氧饱和度恢复正常时间短于西方音乐组,差异有统计学意义(P 0.01)。对照组啼哭发生率90.0%,西方音乐组啼哭发生率73.3%,角音组啼哭发生率63.3%,西方音乐组、角音组啼哭发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:音乐疗法对减轻早产儿足跟采血疼痛安全有效,角音在早产儿血氧饱和度恢复正常所需时间、缩短疼痛面容持续时间、减轻疼痛方面较西方音乐效果更明显。     

肥大细胞及IL-33/ST2在复发性自然流产小鼠模型中的作用初探

目的探讨复发性流产小鼠子宫和胎盘组织中肥大细胞的数量及白细胞介素-33(IL-33)/ST2的表达变化。方法 20只雌性CBA/J小鼠随机分为两组,每组10只,分别与雄性DBA/2和Balb/c小鼠按雌雄比例2:1合笼交配,建立正常妊娠组(CBA/J♀×Balb/c/2♂)和自然流产组(CBA/J♀×DBA/2♂)模型。妊娠第13.5天处死各组雌性小鼠,计数存活胚胎数和丢失胚胎数,计算胚胎丢失率。甲苯胺蓝染色法检测小鼠子宫组织中肥大细胞的数量。ELISA检测血清中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4的浓度,qRT-PCR和Western-blotting分别检测胎盘组织中IL-4、IFN-γ、IL-33、ST2的mRNA和蛋白表达水平。结果成功构建了复发性自然流产(RSA)的小鼠模型,RSA模型组胚胎丢失率显著高于正常妊娠组(16.2%vs.4.92%,P0.05);RSA组子宫组织中肥大细胞数显著低于正常妊娠组[(1.50±0.83)vs.(3.35±1.63)个](P0.05);ELISA结果显示,与正常妊娠组相比,RSA组小鼠血清中IFN-γ水平显著升高[(346.79±4.34)vs.(168.84±2.35)ng/L],IL-4水平显著降低[(98.46±5.81)vs.(157.56±9.35)ng/L](P均0.05);qRT-PCR和Western-blotting结果显示RSA组小鼠胎盘组织中IFN-γ表达水平显著升高,IL-4、IL-33、ST2表达水平显著降低(P0.05)。结论肥大细胞和IL-33/ST2可能参与了RSA小鼠体内Th1/Th2的调节,有助于妊娠的维持。     

IL-18及IL-18结合蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达

目的探讨白细胞介素(IL)18及IL18结合蛋白(IL18BP)在人正常月经周期子宫内膜上的表达。方法取因子宫肌瘤或子宫脱垂行全子宫切除术的患者子宫内膜,按月经周期和子宫内膜形态学检查结果分为增生期和分泌期2组,每组10例。免疫组织化学法检测子宫内膜的IL-18及IL-18BP表达;实时定量聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测子宫内膜IL-18及IL-18BP mRNA的表达。结果 IL-18、IL-18BP在人增生期和分泌期子宫内膜中均有表达,且随着月经周期其表达呈现时空性变化。IL18在增生期表达于腔上皮、腺上皮细胞膜及基质细胞,与增生期相比,分泌期基质细胞IL18的阳性表达显著降低(MOD值0.33±0.07 vs.0.52±0.12,P0.05),而IL18BP的表达则显著增加(MOD值0.33±0.20 vs.0.10±0.07,P0.05)。qRT-PCR结果显示,在增生期和分泌期子宫内膜标本均有IL18和IL18BP mRNA表达,与增生期相比,分泌期IL18表达显著下降(P0.05),IL18BP表达显著增强(P0.05),IL18BP/IL18比值显著增高(P0.05)。结论 IL18和IL18BP在整个月经周期人子宫内膜上均有表达,且其表达呈现时空性的变化,可能与月经周期过程中子宫内膜的崩解修复有关。