经典名方小续命汤的历史沿革及临床应用考证

国家中医药管理局颁布的《古代经典名方目录（第一批）》中小续命汤出自《备急千金要方》卷八·诸风，该文对小续命汤来源的追溯、历史发展、变化的进程及临床应用均进行系统的考证。考证结果表明，续命汤及其类方是唐宋以前治疗中风的主要方剂，延绵七八百年，为治风准绳，其中以小续命汤最具代表性。小续命汤由续命汤衍变而来，方名最早出现于东晋《小品方》，唐代孙思邈将其纳入《备急千金要方》，对其治疗中风的疗效推崇备至，曰“诸风服之皆验”，后经《外台秘要》及多部医著记载，被列为治疗中风第一要方。宋以后，随着医家对中风病机认识的变化及对小续命汤认识的局限性导致其在中风证的临床应用中逐渐减少，近现代以来又被重新认知和应用，期间其临床应用也发生了较大的变迁。其临床应用范围广泛，涉及多种脑部及神经系统相关疾病，包括但不限于①脑卒中及其后遗症，②周围性面瘫，③类风湿关节炎，④高血压，⑤其他运动神经系统疾病等。主治为脑卒中及其后遗症，其次为周围性面瘫，还有其他新的适应证正逐渐被发现，以上为小续命汤的临床定位、新药转化研究提供有效性安全性的参考依据。     

基于基线等比增减设计法优选黄芪多糖-皂苷的免疫调节最佳配比

目的:考察黄芪多糖、黄芪皂苷配伍应用对环磷酰胺模型小鼠的免疫调节活性,筛选最优配比。方法:采用环磷酰胺(40 mg·kg^-1)制造免疫抑制小鼠模型,制备脾淋巴细胞悬液,分别进行正常培养和刀豆蛋白诱导培养,同时给予黄芪多糖与皂苷不同配比药液(10:0,4:1,3:2,1:4,0:10),作用48 h后行MTT微量比色法检测OD值;采用该模型,连续5 d灌胃给予相应受试药液,检测各药物组对模型鼠血清TNF-α含量、脾脏指数、胸腺指数的影响。结果:糖-苷10:0组、4:1组、3:2组均可促进体外模型鼠正常培养的脾淋巴细胞增殖(P<0.01),以4:1组作用显著,各配比组均抑制体外模型鼠经ConA诱导培养的脾淋巴细胞增殖,以糖-苷4:1组抑制最弱;与模型组比较,灌胃给药后除0:10组外,各组均能明显提高模型小鼠血清TNF-α含量(P<0.05或P<0.01),亦以4:1组作用显著,且4:1组、3:2组对脾脏指数有明显提高作用(P<0.05),而对胸腺指数各配比组均无显著影响(P>0.05)。结论:黄芪多糖与皂苷不同比例配伍对免疫抑制模型小鼠均表现出不同程度的免疫调节作用,尤以糖-苷4:1组作用最强,为最佳配比。     

灯盏细辛制剂神经保护活性——化学对比研究

目的：研究灯盏细辛制剂脑神经保护的活性与化学成分相关性。方法：采用HPLC法,结合体外大鼠大脑皮层神经细胞存活影响实验,对比灯盏细辛制剂的神经保护活性与化学成分的相关性。结果：各制剂化学组分存在差异,主要以黄酮类成分和咖啡酰类成分为主;各制剂均有一定的促进体外大鼠大脑皮层神经细胞存活的作用。结论：灯盏细辛制剂均有神经保护活性,其活性成分可能与其中黄酮类和咖啡酰类成分有关。     

灯盏细辛黄酮类成分对压力诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的考察灯盏细辛中黄酮类成分(总黄酮、灯盏花素)对体外高压诱导的视网膜神经节细胞(retinal gan-glion cells,RGCs)凋亡的影响,探讨其视神经保护作用的物质基础。方法采用胰酶消化法将24只出生2~3d的SD(Sprague-Dawley)乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的盖玻片中。培养72h后,将覆有细胞的血盖片转入加压装置中,加入黄酮类成分,继续培养48h,采用Fas蛋白免疫组化染色法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Tunel-POD)法进行检测,每天观察细胞形态,同时对部分细胞行NSE染色检查。结果细胞生长良好,NSE染色表明,85%以上的细胞为RGCs。给药组的Fas蛋白阳性表达指数和凋亡指数均明显低于模型组(P<0.05~0.01)。结论黄酮类成分均能对抗压力诱导的RGCs凋亡,为灯盏细辛视神经保护的有效组分。     

基于网络药理学与动物实验探究桂花醇提物对慢性脑缺血神经损伤的保护作用及机制

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路探究桂花醇提物抗慢性脑缺血性神经损伤的保护作用与机制。方法 借助文献检索、TCMSP、BATMAN数据库筛选桂花活性成分及靶点;OMIM、GeneCards疾病数据库检索疾病靶点。取交集靶点构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络。借助DAVID数据库进行基因本体（gene ontology,GO）功能和京都基因和基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析,并建立“成分-靶点-通路”网络。采用右侧颈总动脉结扎法建立慢性脑缺血小鼠模型,随机分为假手术组、模型组、脑络通（195 mg/kg）组和桂花醇提物低、高剂量（125、375 mg/kg）组。采用旷场实验评价各组小鼠自发能力及探索行为;检测各组小鼠海马组织胆碱乙酰化酶（choline acetylase,ChAC）和胆碱酯酶（cholinester...     

基于指纹图谱及多指标成分定量的丹参提取工艺对比研究

目的 对已上市制剂中丹参不同提取工艺的提取效果进行对比分析.方法 按照冠心丹参胶囊、复方丹参片、复方丹参滴丸、丹参片4种代表制剂的提取工艺制备丹参提取液,研究建立同时测定提取液指纹图谱及多指标含量的HPLC方法,测定不同丹参提取液的丹参素钠、丹酚酸B和丹参酮ⅡA含量及指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件计算指纹图谱的相似度.结果 4种丹参提取液中丹参酮ⅡA、丹参素钠、丹酚酸B含量分别为0.27~1.25、1.44~4.46、33.77~93.92 mg·g-1;冠心丹参胶囊与丹参片、复方丹参滴丸、复方丹参片的指纹图谱相似度分别为0.781、0.853、0.758,复方丹参滴丸与复方丹参片的指纹图谱相似度为0.879.结论 4种代表制剂丹参提取工艺的丹参酮ⅡA、丹参素钠、丹酚酸B含量及指纹图谱均存在明显差异,针对相同的临床适应症,需深入研究以实现丹参工艺的标准化、规范化.     

灯盏细辛有效组分对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞的影响

目的：研究灯盏细辛有效组分对体外培养鼠大脑皮层神经细胞存活的影响。方法：取出生1d内的乳鼠大脑皮层制成细胞悬液,接种于经多聚赖氨酸包被的96孔板中。于培养6d后,分别加入培养液及不同浓度的灯盏细辛提取物和灯盏乙素继续培养1d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时行NSE检查。结果：NSE检查结果表明,培养6 d的存活细胞大部分均为神经元。与空白对照组比较,提取物浓度在0.1~1.6mg/ml,灯盏乙素高浓度时,存活细胞数均明显增加,且有一定的量效关系。结论：灯盏细辛两组分均能促进体外培养的大脑皮层神经细胞存活,且提取物活性较强。     

灯盏花中单体成分对体外培养大鼠视网膜神经细胞的影响

目的:考察咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷对体外培养视网膜神经细胞存活的影响,探讨灯盏花中具视神经保护作用的有效成分。方法:采用胰酶消化法将18只出生2-3d的乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的96孔板中。于培养3d后,分别加入PBS液及不同含量的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷溶液继续培养2d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时对部分细胞行Nissel体染色检查。结果:Nissel体染色检查结果表明,培养5d的存活细胞大部分均为神经细胞。与空白对照组比较,咖啡酸含量在3.9-1000μg·mL^-1、东莨菪内酯、野黄芩苷含量在250-1000μg·mL^-1时,其吸收值均明显增加(P<0.05,P<0.01),且有一定的量效关系。结论:咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷三者均能促进体外培养的视网膜神经细胞存活,且咖啡酸活性最强。     

灯盏细辛化学成分及视神经保护活性成分的研究

 目的研究灯盏细辛视神经保护的活性成分。方法采用植物化学分离方法,结合体外视网膜神经节细胞存活影响实验,从灯盏细辛视神经保护有效部位分离化学成分,运用现代波谱方法进行结构鉴定,并进行化合物的视神经保护活性测定。结果从灯盏细辛乙酸乙酯部位分离得到7个化合物,经鉴定为:槲皮素(1)、芹菜素(2)、飞蓬苷(3)、东茛菪素(4)、咖啡酸(5)、3-O-咖啡酰基-奎宁酸(6)和野黄芩苷(灯盏乙素,7)。结论其中东莨菪素(4)、咖啡酸(5)、野黄芩苷(7)具有视神经保护活性。     

灯盏乙素乙酯的体外脑缺血神经保护活性及其作用机制

 目的 考察灯盏乙素结构修饰物灯盏乙素乙酯的透血脑屏障性能,对脑神经细胞的保护作用,并探讨其作用机制。方法 采用体外血脑屏障模型,结合HPLC技术评价药物的透血脑屏障能力,采用体外原代培养大鼠大脑皮层神经细胞,结合噻唑蓝法测定细胞存活率,采用激光共聚焦技术评价药物对谷氨酸、氯化钾诱导细胞内钙超载的影响。结果 与对照组比较,灯盏乙素乙酯对血脑屏障的透过率可达86.9%,能明显提高细胞存活率（P