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目的从血管新生的角度探讨缺氧预处理(HP)骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植联合清热化瘀方对脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠的神经保护作用及可能机制。方法 SD大鼠216只,随机分为假手术组(SO)、模型组(MCAO)、BMSCs移植对照组(N-BMSCs)、经HP后的BMSCs移植组(HP-BMSCs)、BMSCs移植联合清热化瘀方组(BMSCs+QRHY)、HP-BMSCs移植联合清热化瘀方组(HP+QRHY),每组36只。BMSCs移植后在7、14、28 d 3个时间点取材。采用线栓法制作I/R大鼠模型,根据分组情况给予清热化瘀方颗粒剂灌胃及在I/R 24 h后经颈内动脉移植BMSCs或HP-BMSCs;分别于术后7、14、28 d对各组大鼠进行神经功能缺损评分(NSS);TUNEL法检测神经细胞凋亡;免疫组化染色法检测CD31;Western印迹检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达变化。结果 (1)SO组未见神经功能缺损症状,移植组与MCAO组各时间点比较,NSS严重程度降低、凋亡细胞数明显减少(P0. 05),其中以HP+QRHY组改善最为显著(P0. 05)。(2)SO组微血管密度(MVD)及VEGF蛋白呈现低水平表达,移植组与MCAO组的各亚组比较,MVD显著升高,VEGF蛋白表达明显上调(P0. 05);各亚组间以HP+QRHY组增高最为明显(P0. 05)。结论 HP BMSCs移植能够改善I/R损伤大鼠神经缺损症状,减少细胞凋亡,发挥其神经保护作用,清热化瘀方可进一步增强其作用,其机制可能与促进缺血半暗带区的血管新生,上调VEGF的表达有关。 相似文献
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目的探讨清热化瘀方联合缺氧预处理骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及其蛋白表达的影响。方法将216只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、MSCs移植对照组(N-MSCs组)、经缺氧预处理后的MSCs移植组(HP-MSCs组)、MSCs移植联合清热化瘀方组(MSCs+QRHY组)、HP-MSCs移植联合清热化瘀方组(HP-MSCs+QRHY组),每组36只。按移植后取材时间点(7,14,28 d)各组又分3个亚组,每组12只。用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤动物模型,给予清热化瘀颗粒灌胃及颈内动脉移植BMSCs。分别于术后7,14,28 d对各组大鼠进行神经功能缺损评分(NSS)。RT-PCR及Western blot检测大鼠缺血半暗带区eNOS mRNA及其蛋白表达变化。结果与模型组比较,各时间点N-MSCs组神经功能评分明显减少(P0.05),各移植组中以HP+QRHY组神经功能改善最为显著(P0.05)。假手术组eNOS mRNA及其蛋白呈现低水平表达,模型组及移植组其表达较假手术组明显增加(P0.05);各组eNOS mRNA及其蛋白的表达均于7 d达到高峰,14,28 d表达逐渐下降;同一时间点组间比较,HP-MSCs组、MSCs+QRHY组及HP-MSCs+QRHY组的表达均明显高于N-MSCs组(P0.05),而以HP-MSCs+QRHY组增高最为明显(P0.05)。结论 HP-MSCs移植能够显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠eNOS的表达,清热化瘀方能够进一步上调其表达及改善脑缺血大鼠的神经功能,发挥其神经保护作用。 相似文献
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目的:观察清热化瘀方联合缺氧预处理(HP)骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠PI3K/Akt m RNA和蛋白表达的影响。方法:SD大鼠216只,随机分为6组:假手术组(SO)、模型组(MCAO)、MSCs移植对照组(N-MSCs)、经HP后的MSCs移植组(HP-MSCs)、清热化瘀方联合MSCs移植组(MSCs+QRHY)、清热化瘀方联合HP-MSCs移植组(HP+QRHY)。每组按再灌注时间点又分为7 d、14 d、28 d 3个亚组。栓线法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,根据分组情况给予清热化瘀颗粒灌胃及经颈内动脉注入BMSCs或HP-BMSCs,采用改良神经功能缺损评分法进行神经功能评分(NSS),并运用q RT-PCR、Western blot技术检测PI3K/Akt m RNA及其蛋白在缺血半暗带的表达变化。结果:(1)移植组与模型组各时间点比较,神经功能评分严重程度显著降低(P0.05),各移植组间以HP+QRHY组神经功能改善最为显著(P0.05)。(2)MCAO组及各移植组PI3K/Akt m RNA和蛋白表达均较SO组明显增加(P0.05);其表达均于7 d达到高峰(P0.05),14 d、28 d表达开始逐渐下降;其中在7 d、14 d亚组间相比较,HP-MSCs组、MSCs+QRHY组及HP+QRHY组二者的表达均明显优于N-MSCs组(P0.01或P0.05),而以HP+QRHY组增高最为显著(P0.05)。结论:清热化瘀方联合HPBMSCs移植可改善大鼠的神经功能,这可能和其促进大鼠脑缺血半暗区PI3K/Akt的表达相关。 相似文献
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目的观察温肺降浊方联合盐酸多奈哌齐片治疗血管性痴呆的临床疗效,并从氧化应激角度探讨其作用机制。方法将60例血管性痴呆患者随机分为治疗组30例和对照组30例。对照组予盐酸多奈哌齐片口服,治疗组予盐酸多奈哌齐片和温肺降浊方口服,2组均用药2个月。观察2组患者治疗前后简易精神量表(MMSE)评分、日常生活活动量表(ADL)评分和血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化,评价2组临床疗效,统计2组不良反应发生情况。结果治疗后2组患者MMSE评分和血清SOD活性均明显升高(P均0.05),且治疗组均明显高于对照组(P均0.05);2组患者ADL评分和血清MDA含量均明显降低(P均0.05),且治疗组均明显低于对照组(P均0.05)。治疗组临床总有效率为85.7%,对照组总有效率为72.4%,治疗组明显高于对照组(P0.05)。2组患者用药过程中均未出现严重不良反应。结论温肺降浊方联合盐酸多奈哌齐片治疗血管性痴呆疗效明显优于单用盐酸多奈哌齐片,其机制可能与提高血清SOD活性及降低MDA含量有关。 相似文献