龙骨马尾杉环阿屯醇合成酶(HcCAS1)基因的 克隆和生物信息学分析

目的:对大伸筋草的原植物龙骨马尾杉Huperzia carinata环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因HcCAS编码区进行克隆及序列分析。方法:根据本实验室已报道的龙骨马尾杉转录组高通量测序结果分析获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的CAS基因序列,采用RT-PCR技术,以龙骨马尾杉根、茎、叶混合样品总RNA为模板克隆得到龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,并对HcCAS蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析。结果:序列分析表明,所克隆的HcCAS基因编码区开放阅读框(open reading frame,ORF)长为2 274 bp,编码757个氨基酸残基,命名为HcCAS1(GenBank登陆号JN790125)。结论:该研究在国内外首次获得龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,为进一步研究HcCAS蛋白在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及酶活性位点的鉴定奠定基础。     

针灸对CTX小鼠骨髓细胞DNA修复基因XRCC1和ADPRT的调控作用

目的:观察针灸对骨髓抑制小鼠细胞DNA碱基切除修复基因XRCC1、ADPRT的调控作用。方法:选用清洁级、雄性昆明小鼠40只,体质量(20±2)g,自由饲养3 d后按体质量随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,并用CTX造成骨髓抑制模型。针刺组、艾灸组分别选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里"施以针刺、艾灸治疗,空白组、模型组每日陪同固定不予治疗,每日1次,共治疗5 d,于第6天取各组小鼠双侧股骨,用ELISA法检测小鼠骨髓细胞DNA中XRCC1、ADPRT的含量变化。结果:与空白组比较,模型组、针刺组和艾灸组XRCC1、ADPRT含量均降低;与模型组比较,针刺组、艾灸组XRCC1、ADPRT含量均升高,表明针刺和艾灸能够显著上调CTX化疗小鼠骨髓细胞DNA中XRCC1、ADPRT的表达含量,提高DNA碱基切除修复能力,减轻骨髓抑制。结论:通过针刺、艾灸促进骨髓细胞DNA碱基切除修复能力是针灸改善骨髓抑制的关键机制之一。     

食管癌与贲门癌切除术后出血的预防护理

目的:总结食管癌、贲门癌术后出血的预防及护理要点。方法:回顾性统计分析2001年1月～2005年12月2737例食管癌、贲门癌手术中13例术后出血的特点、临床表现及预防措施。主要预防措施为:准确观察胸腔引流量及颜色,术后6h引流量超过900ml需二次开胸止血。密切观察患者生命体征的变化,及早发现患者的休克表现。结果:本组食管癌、贲门癌术后出血的发生率为0.47%。结论:食管癌、贲门癌术后出血有别于其它的并发症,并未随手术技术的提高而减少,密切注意观察患者的生命体征和引流量的变化是早期发现术后出血的关键。     

针灸对环磷酰胺小鼠骨髓细胞DNA核苷酸切除修复基因ERCC1和RRM1的影响

目的通过观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗后小鼠骨髓中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)以及核糖核苷酸还原酶1(RRM1)的调节作用,探讨针灸改善化疗后小鼠骨髓抑制的分子生物学机制。方法选取清洁级雄性(KM)小鼠40只,随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组10只。针刺组、艾灸组选取"大椎"、"膈俞"、"肾俞"和"足三里"分别进行针刺、艾灸治疗,每天1次,连续治疗5天,空白组、模型组每日陪同固定,不做任何治疗。各组小鼠于第6天取股骨ELISA法检测骨髓中ERCCI和RRMI的含量。结果针刺和艾灸可以明显上调CTX模型小鼠骨髓细胞DNA修复基因的表达,促进骨髓细胞DNA损伤的核苷酸切除修复,从而减轻CTX造成的骨髓抑制。结论针灸可以促进骨髓细胞DNA的核苷酸切除修复的能力,保护因化疗引起的骨髓造血细胞损伤,应该是针灸改善小鼠化疗所致骨髓抑制,保护骨髓造血功能的重要机制之一。     

食管癌、贲门癌切除应用胶原蛋白海绵减少渗血量的观察

我们自 1999年 1月～ 2 0 0 0年 6月 ,术中应用供体内使用的胶原蛋白海绵 ,对食管癌、贲门癌切除术后胸腔引流量进行了对比观察 ,现报告如下 :1　资料与方法术后患者 60例 ,随机分为两组。其中对照组 3 0例 ,男 2 8例 ,女 2例 ,年龄 41～ 77岁 ,平均 5 6.9岁 ;贲门癌 9例 ,食管中段癌 2 1例。应用胶原蛋白海绵组 (用药组 ) 3 0例 ,男 19例 ,女 11例 ,年龄 3 3～66岁 ,平均 5 6.9岁 ,其中贲门癌 10例 ,食管中段癌 2 0例。应用北京益而康生物工程开发中心生产的供体内使用的倍菱牌胶原蛋白海绵 (准产注册号 :国药管械 (准 )字 99第3 64 0 2 8…     

转录组学在药用植物研究中的应用

药用植物转录组学研究已经成为药用植物基因组研究中最活跃的领域之一.以转录组学的产生、发展和研究方法为基础,介绍了药用植物中转录组学的应用现状,重点介绍了转录组学当前采用的技术手段以及在西洋参、丹参、乌拉尔甘草功能基因组学中的研究进展.同时对转录组学在药用植物中的发展前景进行了讨论.     

针灸对CTX荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路相关差异基因蛋白表达量的影响

目的选取荷瘤小鼠为研究对象,以环磷酰胺(CTX)化疗后骨髓抑制为切入点,通过观察荷瘤小鼠骨髓细胞Notch信号通路相关差异基因蛋白表达量的影响,揭示针灸改善荷瘤小鼠骨髓抑制新的作用机制,为临床上针灸治疗相关疾病开拓思路。方法选取清洁(SPF)级、雄性昆明种(KM)小鼠40只,自由饲养3d,在一定温度和湿度的无菌环境下复制小鼠荷瘤模型;植瘤7天后,对荷瘤小鼠进行尾静脉采血并查白细胞总数,挑选白细胞接近正常范围,瘤体生长良好的荷瘤小鼠32只。将挑选的荷瘤小鼠分为空白组、模型组、针刺组和艾灸组,每组8只。腹腔注射CTX造成骨髓抑制模型,空白组给予Nacl溶液150mg/kg,其余3组小鼠给予同体积的CTX,一次性完成。腧穴选取"大椎"、"膈俞"、"肾俞"、"足三里",对针刺组施以针刺治疗、艾灸组施以艾灸治疗,空白组和模型组每日只陪同抓取固定。在前期研究筛选的差异基因基础上,运用蛋白质印迹法(Western-Blot)更深层次的检测这4组荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路jag1、notch2、numb1、numb2基因的蛋白表达量。结果经针刺和艾灸治疗后,针刺组和艾灸组numb1、numb2的表达含量比模型组高,而jag1、notch2的表达含量明显比模型组低。结论降低jag1和notch2的表达含量,抑制过度激活的Notch信号通路,可以减轻因CTX化疗引起的骨髓抑制。揭示了针灸改善荷瘤小鼠CTX化疗后的骨髓抑制,是通过调节骨髓细胞中的Notch信号通路实现的。验证了"Notch信号通路是针灸对抗骨髓抑制、改善造血等综合作用的关键机制"之假说。本研究选用带瘤的小鼠,更贴近临床癌症患者,可为临床提供新的实验室依据。     

新型督灸姜泥定型器的设计与应用

正督灸又称"长蛇灸""铺灸""火龙灸"等,为我国传统灸法的一种~[1-3],是沿人体督脉及双侧膀胱经第一循行线上施灸~[4-6]。因其有"温通经脉、调和气血、培元固本、扶正祛邪"等功效,在临床广为应用~[7-10]。督灸操作过程中对姜泥定型是必不可少的,目前临床上尚无高效简便的姜泥定型器。而传统隔姜督灸姜泥定型的操作又存在以下不足:(1)姜泥的手工堆砌过程耗时;(2)手工堆砌的姜泥厚薄不均、长宽不一;(3)手工堆     

胸内手术后两侧腋下体温的观察

1 引言胸内手术后的发热是常见的临床现象,也是正常的生理性反应。没有术后合并症的胸内手术病人,其体温一般于术后6～7天才降至正常。我们在临床工作中发现,几乎每一病人,在同一时间,用同一体温计测量腋下体温,两侧都不同,甚至差异很大。术侧体温常高于健侧的体温。为准确测量开胸     

气管食管穿通伤1例患儿的急救护理

颈部外伤致食管气管同时损伤,并破入胸膜腔,形成食管胸膜瘘,在临床上极其罕见。主要表现为颈、胸部广泛的皮下气肿,颈部、胸腔、肺部严重感染,严重者可危及生命。我科于1994年6月收治1例患儿,经多方抢救、积极治疗和精心护理后,痊愈出院。现将护理体会报告如下: 1 病例报告 患儿,男,11岁。1994年6月28日骑自行车时摔伤,车把扶手刺伤颈部,约50分钟后来我院急诊。当时患儿呼吸困难,轻度紫绀,广泛皮下气肿,伤口渗血,检查发现气管前壁有创口,位于第3、4、5软骨环水平。体检:P120次/分,R30次/分。意识清楚,经气管切开术后症状缓解。患儿第二天呼吸困难进行性加重,查胸片示右胸积液,行胸腔闭式引流术,口服美蓝发现有食管胸膜瘘,遂行胃肠减压,禁食水,并给予胸腔冲洗。经72小