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1.
桂先革  曾晖  陶可 《中国骨伤》2019,32(11):1026-1033
目的 :通过构建和比较经Wnt5a基因修饰的巨噬细胞分别与骨髓干细胞(MSCs)2D单层贴壁与骨髓液跨小室共培养模型,旨在探索Wnt5a信号通过调控巨噬细胞炎症反应对MSCs成软骨分化产生的影响。方法:自2015年9月至2018年12月收集6例重度膝关节骨关节炎拟行全膝关节置换术者的巨噬细胞、MSCs和骨髓液,其中男2例,女4例;年龄58~71岁。膝关节囊滑膜组织常规消化取得单细胞,经反复贴壁并行Ficoll液密度梯度离心和抗CD14抗体流式细胞术测定巨噬细胞纯度。将上述经鉴定的巨噬细胞置于IFN-γ联合TNF-α刺激48 h后,再使用重组腺相关病毒(rAAV)-lacZ或Wnt5a转染24 h,分别与MSCs 2D单层贴壁或骨髓液构建跨小室共培养模型,采用HE染色、软骨特殊染色、X-gal染色、抗Wnt5a、抗Ⅱ和X型胶原免疫组化染色对细胞形态与增殖能力、病毒转染效率和成软骨分化能力等进行检测。结果:抗CD68免疫组化显示骨关节炎患者滑膜组织巨噬细胞明显增多。抗CD14流式细胞术证实经分离的滑膜巨噬细胞纯度为90.31%,IFN-γ联合TNF-α刺激后发现上清液中单核细胞趋化素蛋白-1(MCP-1)水平明显升高,提示巨噬细胞被激活;rAAV-lacZ转染3 d后,X-gal染色发现其能有效转染巨噬细胞,效率高达97.50%,且至少持续21 d;rAAV-Wnt5a转染巨噬细胞后通过刺激其Wnt5a的表达,而增加两种模型中的Wnt5a表达,抑制MCP-1的分泌,两种模型中Wnt5a组MCP-1表达量分别为14.76和61.51 pg/ml;此外,rAAV-Wnt5a转染后能促进细胞增殖及成软骨分化、软骨基质合成。结论:在巨噬细胞与MSCs 2D单层贴壁或骨髓液跨小室共培养条件下,r AAV介导的Wnt5a过表达能通过影响巨噬细胞炎症反应而促进软骨稳态的维持以及MSCs成软骨分化,巨噬细胞可能通过Wnt5a信号影响软骨稳态与MSCs成软骨分化。  相似文献   
2.
目的 探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节.方法 从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养.倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定.根据加入不同培养物,实验分为3组:PMMA组:75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;IL-6R抗体组:10 ng/mL IL6R抗体+75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;空白对照组.采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测IL-6R抗体、PMMA对滑膜成纤维细胞增殖活力影响;实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 表达.结果 原代滑膜细胞贴壁后,初期为短梭形.连续3次传代后,95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞.SABC法染色检测结果显示:上述成纤维样细胞抗CD68抗体阴性,抗vimentin抗体呈棕黄色,为阳性反应.CCK-8检测显示:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组吸光度(A)值明显降低(P<0.01);而空白对照组与PMMA组间吸光度(A)值无统计学差异(P>0.05).FQ-PCR 检测发现:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 的表达明显受到抑制(P<0.01);PMMA组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF表达较空白对照组升高(P<0.05).结论 IL-6R抗体能显著抑制滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的表达,为生物制剂预防和治疗假体无菌性松动提供分子生物学的理论依据.  相似文献   
3.
目的 观察PMMA骨水泥颗粒对体外培养的巨噬细胞SOCSl及SOCS3基因表达的影响。方法 大鼠腹腔灌洗液筛选法培养巨噬细胞,CD68单抗免疫细胞化学法鉴定细胞纯度和活性,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测巨噬细胞SOCSl及SOCS3基因的表达量,分别观察不同浓度PMMA骨水泥颗粒及一定浓度的骨水泥颗粒作用不同时间对巨噬细胞SOCSI及SOCS3基因表达的影响。结果 PMMA骨水泥颗粒促进了体外培养的巨噬细胞SOCSI及SOCS3基因的表达,并表现出一定的浓度及时间相关性;颗粒浓度在0.25 mg/mL时SOCSI及SOCS3基因表达量明显升高(P<0.05);当颗粒作用时间在24 h左右时SOCSI及SOCS3基因表达升高最显著(P<0.05)。结论 PMMA骨水泥颗粒能够促进巨噬细胞SOCSl及SOCS3基因的表达。  相似文献   
4.
目的:脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia,SED)患者因骨骼、关节发育异常,生物力学改变和早年手术干预等往往导致严重的髋关节骨关节炎.本研究探讨人工全髋关节置换术治疗SED患者T?nnis 3级髋关节骨关节炎的早期疗效及可能的影响.方法:2017年1月至2019年6月,将由高年资医生完成人工全髋关节置换术治疗的374例髋关节骨关节炎患者作为研究对象,其中因SED行人工全髋关节置换术的患者9例(男6例,女3例,12髋)符合纳入排除标准,观察人工全髋关节置换术对该类患者的早期疗效.结果:所有患者均选用强生陶瓷内衬-陶瓷股骨头,均获得随访,平均随访时间20个月,除1例出现肌间静脉血栓外,其余患者均未出现无菌性松动、脱位、骨折、血管神经损伤、深静脉血栓和感染等并发症.术前髋关节Harris评分平均35.55分,美国西部On-tario 和McMaster大学骨关节炎指数评分(the Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis index,WOMAC)平均56.56分,SF-12生活质量量表评分平均41.56分,视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)平均7.44分;末次随访时Harris评分平均89.56分,WOMAC骨关节炎指数评分平均41.11分,SF-12评分平均56.33分,VAS评分平均2.67分.与全髋关节置换术术前相比,SED患者术后骨盆入射角、骨盆倾斜角和骶骨倾斜角等骨盆相关参数均有所增加,术前平均骨盆入射角为68.95°±4.60°、平均骨盆倾斜角为52.75°±1.06°、平均骶骨倾斜角为17.45.±1.77°,而术后则相应变为76.98.±5.12°、60.51.±4.35.和18.10°±2.02°.患者术后双下肢均基本等长.结论:人工全髋关节置换是治疗SED患者T?nnis 3级髋关节骨关节炎的一种有效手术方式,且早期疗效满意.  相似文献   
5.
简版:目的:探究三七对激素性股骨头坏死兔股骨头微结构的影响及其机制。方法:选取洁净级新西兰兔120只,随机选取其中30只作为空白对照组D组,其他90只进行造模,随机分为A、B、C3组,每组各30只。A组予以高剂量三七提取液,B组予以低剂量三七提取液,C组作为造模空白组,C组和D组予以生理盐水。对比治疗4周、8周和12周后,4组兔股骨头正常区面积(NR)、坏死区面积(ROE)、骨表面积/组织体积(BSITV)、骨体积/组织体积(BVITV)以及血管内皮生长因子(VEGF)、骨保护素(OPG)和过氧化物酶增值物激活受体吖(PPARl,)的变化情况。……  相似文献   
6.
目的:研究影响老年患者股骨转子间骨折髓内钉内固定术后髋关节功能恢复的相关因素,提出相应措施促进术后髋关节功能恢复。方法:选取2012年6月至2015年6月行股骨转子间骨折闭合复位髓内钉内固定术患者74例,男33例,女41例,平均年龄(75.07±7.89)岁。根据术后1年随访时Sanders功能评分将患者分为功能良好组(55例)和功能不良组(19例),统计患者年龄、性别、骨折分型、骨密度、术前基础疾病、营养状态、麻醉ASA分级、麻醉方式、术中复位情况、术后疼痛评分、术后并发症、尖顶距及是否康复师康复等相关因素。采用单因素和多因素Logistic分析对相关危险因素进行评估。结果 :单因素分析显示患者年龄、骨密度、营养状态、麻醉ASA分级、麻醉方式、复位情况、康复师康复,尖顶距对术后髋关节功能恢复差异有统计学意义(P0.05);多因素Logistic回归分析显示骨密度(P=0.006,OR=0.077),康复师康复(P=0.006,OR=0.070),麻醉ASA分级(P0.001,OR=0.049),营养状态(P=0.046,OR=0.188)是术后髋关节功能恢复的独立影响因素。结论 :骨密度、康复师康复、麻醉ASA分级和营养状态影响老年股骨转子间骨折髓内钉内固定术后功能恢复,通过整合骨科、麻醉科、康复科、营养科等学科,建立快速康复外科体系,可有效促进老年患者术后髋关节功能恢复。  相似文献   
7.
目的探讨骨钙素(bone glaprotein, BGP)及Ⅰ型前胶原N端前肽(procollagenⅠN-terminal peptide, PⅠNP)对骨质疏松性椎体压缩性骨折(osteoporotic vertebral compression fractures, OVCF)患者术后再骨折的预测价值。 方法选取2013-2016年于浙江医院骨科行经皮椎体后凸成形术的100例OVCF患者为研究对象,术后随访2年以上,以骨折再发为随访终点事件。收集患者的一般资料,包括性别、年龄、BMI等,以及初次骨折术前的骨密度T值、血钙值、BGP、PⅠNP、术中骨水泥注入量。采用t检验、秩和检验、Fisher确切概率法进行单因素分析,并将有意义的指标代入多元Cox回归模型进行骨折再发的多因素分析,并以ROC曲线评估BGP及PⅠNP对骨折再发的预测价值。 结果100例OVCF患者行椎体后凸成形术后随访3~37个月,其中33例(22.45%)术后再发骨折。将单因素分析有意义的指标(年龄、骨密度值、BGP、PⅠNP)代入多元Cox比例回归模型,结果显示BGP及PⅠNP仍是骨折再发的独立危险因素(HR=2.053,95%CI=1.128-3.734,P < 0.05;HR=1.250,95%CI=1.150-1.360,P < 0.01)。ROC曲线分析结果显示,BGP、PⅠNP及联合预测的曲线下面积分别为0.794、0.911、0.964;BGP预测截点值为0.474,对应灵敏度及特异度分别为72.7%、25.48%;PⅠNP预测截点值为0.685,对应灵敏度和特异度分别为0.879、0.194。 结论对于骨质疏松骨折术后患者,可通过定期监测血清BGP及PⅠNP水平评估骨代谢的变化,从而早期预测骨折再发风险并及时给予干预措施。  相似文献   
8.
目的 探讨腓浅动脉单一穿支微型皮瓣的临床疗效,并对手足部较小面积的皮肤软组织缺损进行定点修复. 方法 自2009年11月至2011年1月,共对8例(左足1例,右足1例,左手3例,右手3例)皮肤软组织缺损面积为(1.3 cm×5.0 cm~2.5 cm×6.0 cm)的患者进行腓浅动脉单一穿支微型皮瓣游离移植手术;依据术前查阅相关解剖文献,在小腿外侧中部,以腓骨小头与外踝连线为轴线,该轴线中点为腓浅动脉穿支部位,依据皮肤缺损区大小及形状设计皮瓣,并对皮瓣的设计、切取、皮瓣与受区的血管吻合、成活特点及治疗效果进行分析. 结果 8例手足部皮肤软组织缺损应用面积为1.5 cm× 5.2 cm~2.8 cm×6.2 cm的腓浅动脉单一穿支微型皮瓣进行修复后均成活,外形、质地均满意,术后功能恢复效果良好;1例术后出现水疱、暗紫、脱痂后成活;1例术后皮瓣存活顺利,但出现指骨骨髓炎,经治疗愈合. 结论 腓浅动脉单一穿支微型皮瓣游离移植可对手足部较小的皮肤软组织缺损进行精确的定点修复,临床效果满意.  相似文献   
9.
股骨劲骨折是骨科临床上较常见的骨折之一.随着老龄化社会的到来,股骨劲骨折的发生率明显上升,预计到2040年全球每年新发患者数将达到50~60万能例次[1].  相似文献   
10.
局麻下椎体后凸成形术治疗老年骨质疏松性椎体压缩骨折   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的: 探讨椎体后凸成形术治疗老年骨质疏松性骨折的临床疗效. 方法: 自2007年5月至2010年5月,局麻下采用椎体后凸成形术治疗老年骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折129例,男47例,女82例;年龄61~92岁,平均73.7岁;胸椎88节,腰椎101节. 观察手术前后VAS评分的变化、椎体高度改变、局部Cobb角的改善情况. 结果: 所有患者顺利完成手术,随访时间24~60个月,平均34.2个月. 腰痛VAS评分术前为7.9±2.5,术后2周、末次随访时分别为2.8±1.8、3.0±2.2,与术前比较差异均有统计学意义(P<0.01).椎体高度术后得到部分恢复,Cobb角术前(28.3±13.7)°,术后2周、末次随访时分别为(16.2±9.8)°、(19.1±10.3)°,与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05).术中发生骨水泥外漏23例(17.8%),其中1例出现短暂神经根压迫症状. 术后发生呼吸暂停1例,经抢救恢复;肠梗阻1例,经治疗好转;骨水泥致椎体骨折分离1例;邻椎骨折4例. 结论: 椎体后凸成形术是治疗老年骨质疏松性椎体骨折的微创外科手术,其创伤小,止痛效果好,可有效维持骨折稳定,近期、中期疗效肯定,远期有待继续随访. 手术适应证的掌握及手术技术的提高是防止并发症的关键,其中骨水泥外漏是最常见的并发症.  相似文献   
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