柯萨奇病毒A组天津分离株的分型鉴定及分子特征分析

目的 鉴定天津市手足口病病原体柯萨奇病毒A组2、4、5、6和10型,并分析其VP1区基因及分子流行病学特征.方法 提取45株非EV71非CV-A16肠道病毒分离株核酸,利用RT-PCR法扩增其VP1基因并测序,然后根据VP1区基因核酸序列,进行肠道病毒型别鉴定和同源性分析,构建种系发生树.结果 45株非EV71非CV-A16肠道病毒天津分离株分别为6株柯萨奇病毒A组2型(Coxsackie virus A2,CV-A2),14株CV-A4,3株CV-A5,8株CV-A6和14株CV-A10.柯萨奇病毒各型的株间核酸序列同源性均在80％以上,各型分离株与原型株的同源性均在71.2％ ～ 85.8％之间.天津各型分离株在种系发生树上均聚集于各自相对独立的分支,与国内流行株处在同一分支内,而与国外原型株处于不同的进化分支.结论柯萨奇病毒A组2、4、5、6和10型成为天津市手足口病的流行病原体,各型天津分离株株间核酸序列同源性较高,呈现一定的区域聚集性.     

汉坦病毒G2糖蛋白多表位抗原基因的设计与构建

目的构建汉坦病毒SEO型代表株L99G2蛋白的多表位抗原基因(mea)。方法通过生物信息学软件对L99株G2蛋白氨基酸序列进行综合分析及预测,优选B细胞表位,引入GPG间隔序列串联表位,设计mea,然后应用重叠PCR法构建mea,并将其克隆到原核表达质粒pET32a(+)。结果优选出5个B细胞表位,设计并成功构建mea,PCR定向克隆获得pET32a-mea重组表达质粒。结论首次构建了汉坦病毒G2糖蛋白mea及其原核表达系统E.coliBL21/pET32a-mea,为其表达及免疫学应用奠定基础。     

A群链球菌的分子分型研究进展及应用北大核心CSCD

A群链球菌(GAS)是全球范围内的重要致病菌,可引起多种严重感染性疾病、免疫介导性疾病和中毒性疾病。GAS的分子分型鉴定是其分子流行病学的重要研究内容,近年多种分子分型技术应用于GAS分型鉴定研究,该文对A群链球菌的主要分子分型技术的原理、应用和相关性研究进行综述。     

纳他霉素高产菌株的链霉素抗性选育及其发酵工艺的优化

用紫外线对纳他霉素(Natamycin)产生菌褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)ATCC13326菌株孢子进行诱变处理后，利用链霉素抗性突变选育得122株链霉素抗性突变株。其中纳他霉素产量高于出发菌株的有13株。突变株SG-56的生产能力达到出发菌株的146％，研究了其发酵性能，优化了培养基组成和发酵工艺条件，纳他霉素产量为2．81g／L，较出发菌株产量提高了170％。     

脉冲场电泳在霍乱弧菌分型中的应用

目的：了解天津市霍乱弧菌的基因型。方法：选择保留的20株埃尔托霍乱弧菌进行血清分型及生化实验确认，采用琼脂糖包埋胶块法制备染色体DNA，以sfi I内切酶进行切割，选定脉冲电泳参数进行片段分离。结果：20株霍乱保留株用脉冲场电泳分离可得到5种不同的基因型。结论：20株霍乱弧菌经血清学及生化检定确认未发生表型特征变异，脉冲场电泳分析表明，不同年代分离株基因型别重叠出现。     

天津地区汉坦病毒分离株TJJ16 M基因片段克隆和序列分析

目的分析天津地区汉坦病毒分离株TJJ16 M基因的分子特征。方法采用细胞培养法从鼠肺标本中分离汉坦病毒TJJ16,提取TJJ16感染Vero-E6细胞的总RN A,经逆转录扩增病毒cDNA,继而进行PCR分别扩增M1和M2基因片段,克隆于T载体并测序拼接,对其进行序列分析和生物信息学分析。结果汉坦病毒TJJ16株的M基因片段全序列长为3616nt,仅有1个开放读码框架(ORF),编码1 136个氨基酸,序列分析表明其为汉滩型(HTN型)汉坦病毒,与HTN型Q32株同属1个亚型。结论TJJ16病毒株M基因片段的克隆和序列分析证实其为HTN型,系天津地区的首次报道。     

天津市2009——2010年健康人群肠道病毒71型中和抗体血清流行病学调查

目的 调查天津市健康人群肠道病毒71型(EV71)隐性感染状况.方法 采集1611名天津市健康人静脉血标本进行EV71中和抗体测定,对检测结果进行分析.结果 以抗体滴度1:4作为临界值,调查对象EV71中和抗体阳性率为66 79%(1076/1611),0～5岁年龄组的抗体阳性率最低为32 71%,16～25岁年龄组的抗体阳性率最高为76.67%,不同年龄组的抗体阳性率差异有统计学意义.市内六区EV71的抗体阳性率最低为59.05%,远郊五县的抗体阳性率最高为72 35%;不同区域间的抗体阳性率差异有统计学意义.EV71抗体滴度≥1:256的人数占5.71%.经logistic回归分析,年龄、流动人口数量和区域都是影响EV71抗体阳性率的因素.结论 年龄的增长增加了EV71隐性感染的机会,但抗体水平不可能持久保持;流动人口较多、卫生条件差的地区应作为手足口病防控的重点.

Abstract：

Objective To investigate the latent infection caused by enterovirus 71 (EV71) among healthy people in Tianjin and to provide evidence on prevention and control hand-food and mouth diseases (HFMD). Methods 1611 sera specimens were collected from healthy people in Tianjin while EV71 antibody was detected by neutralization test, and then the results were analyzed statistically. Results For determining positivity, the cut-point was set at 1:4. The positive rate was 66.79%( 1076/1611) for EV71 neutralizing antibody. The lowest positive rate was 32.71% in the 0-5 age group while the highest rate was 76.67% in the 16-25 age group. Significant difference was seen in the positive rates among different age groups. The lowest positive rate (59.05%) was seen in the city areas while the highest rate (72.35%) was seen in the surrounding counties. 5.71% of the people being tested showed their neutralizing antibody as ≥1:256. The difference was statistically significant on positive rates among different areas. We constructed logistic regression models with the EV71 neutralizing antibody positive rate as the dependent variable and age, sex, floating population, area etc. as independent variables. There appeared statistical significances in all the independent variables. Conclusion Age seemed a risk factor for recessive infection of EV71, and the neutralizing antibody against EV71 might not be kept permanently. In order to prevent and control the HFMD, more attention should be paid to the areas where more floating population were resided.     

尿道致病性大肠杆菌I型菌毛的研究进展

泌尿道感染（Urinarytractinfections,UTIs）是世界范围内严重的公共卫生问题。尿道致病性大肠杆菌（UropathogenicEscherichiacoli,UPEC）是引发UTIs的首要致病菌。I型菌毛是UPEC重要的毒力因子,在UPEC中分布广泛,介导其在泌尿道的粘附、侵入和定植。该文对UPECI型菌毛的结构、装配和毒力机制进行综述。     

天津市手足口病分子流行病学分析

目的分析天津市手足口病病原学分布及肠道病毒71型(EV71)分子流行病学特点。方法采集天津市各医院2008—2010年手足口病住院患者粪便标本2 377份,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠道病毒核酸;选取部分EV71阳性标本分离病毒,采用RT-PCR扩增其VP1基因,进行序列测定和同源性分析,建立系统发生树。结果 2 377份手足口病粪便标本中,肠道病毒总阳性率为70.72%(1 681/2 377),其中EV71占48.30%,CV-A16占37.36%,其他EV占14.34%;31株EV71分离株与C4亚型的C4a分支参比株具有最高核苷酸序列同源性,同源性为95.7%～99.2%,在系统发生树上均归属于C4a分支。结论天津市2008—2010年手足口病主要病原体为EV71,其流行株为C4亚型中的C4a病毒株。     

天津市感染流行性出血热病毒的重点人群调查分析

目的确认天津市2005年感染(隐性或显性)流行性出血热(EHF)病毒的重点人群,以便有针对性地采取预防控制措施。方法本次选定的EHF“重点人群”包括:废品收购人员、疫点周围人群、食品加工人员和农民;并设研究人员为对照组。根据2004年疫点周围人群初步监测结果(EHF病毒IgG抗体阳性率0.72%)确定本次每类人群的样本量≥140人份(至少查出1例阳性者)。采集各类人群血清,用间接免疫荧光法(IFA)检测血清中的EHF病毒特异性IgG抗体,通过!2检验分析。结果从546例“重点人群”中检出IgG抗体阳性14例,隐性感染率为2.56%,其中废品收购人员高达7.50%,与对照组(研究人员)隐性感染率(0.79%)比较差异有统计学意义(X2=5.473,PX2=0.544,P>0.05);“重点人群”中隐性感染者无年龄和性别差异。结论废品收购人员是天津市感染流行性出血热的重点人群;疫点周围人群、食品加工人员和农民属一般人群。