菘蓝rDNA及端粒多色荧光原位杂交分析

目的对菘蓝45S rDNA、5S rDNA和端粒进行物理定位,并分析其核型。方法使用多色荧光原位杂交技术(FISH)进行定位。结果菘蓝基因组有一对45S rDNA位点位于4号染色体,一对5S rDNA位点位于5号染色体,14对端粒信号位于染色体两端;核型公式为2n=2x=14=10m(2SAT)+4sm,属2A核型。结论为菘蓝核型分析、分子细胞遗传图谱构建提供了稳定、有效的细胞学标记。     

细胞原位PCR方法用于异性别骨髓移植植入验证

为监测异性别骨髓移植（BMT）治疗某些血液系统疾病和遗传性疾病的植入状态，利用人Y染色体特异性片段扩增引物Y3、Y4，采用非放射性核苷类似物Dig－11－dUTP直接掺入法，对2例急性粒细胞性白细胞进行原位聚合酶链反应（insituPCR）。在显微镜下观察，Y染色体阳性细胞内显示有一深蓝色信号班点，以此识别供者源细胞。1例患者BMT后＋14天供者源细胞占37％，另1例＋28天时供者源细胞达96．53％，均获得植活证据。该方法简便快速，灵敏度高，只需计数大约200个细胞，一般在检查次日即可获得结果。     

儿童急性白血病多药耐药基因检测的临床价值

随着联合化疗的应用,儿童急性白血病的疗效已有极大提高,但仍有部分患儿达不到完全缓解或缓解后易复发。多年的研究发现,白血病细胞多药耐药性(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)是白血病难以获得良好疗效的障碍。多药耐药基因(ｍｄｒ1)的扩增和过度表达所引起的ＭＤＲ是其中的一个重要机制[1]。我们以半定量逆转录聚合酶链反应(ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴＰＣＲ)技术检测了33例儿童急性白血病细胞中ｍｄｒ1ｍＲＮＡ基因的表达,初步探讨了其与临床耐药的关系。对象…     

原位PCR技术及其应用

原位PCR技术是通过在染色体上或组织细胞内对靶核酸序列进行原位扩增,用原位杂交技术检测,从而对靶核酸进行定性、定位和定量分析的研究方法。原位PCR大大提高了原位杂交技术的灵敏度,在分子生物学基础理论和临床医学研究方面展示了美好的应用前景。     

一步法PCR联合荧光原位杂交检测曲霉菌属感染标本

目的 联合新颖的一步法PCR检测法和荧光原位杂交(FISH)检测法,检测病理诊断曲霉菌属感染标本.方法 收集病理诊断曲霉菌属感染标本33份作为试验组;随机收集非曲霉菌属感染标本12份作为阴性对照组;采用标准黑曲霉菌株作为阳性对照组;建立新颖的一步法PCR检测技术,联合FISH检测法对试验组及对照组标本进行检测.结果 一步法PCR可以快速、特异地检测量仅0.01 g的黑曲霉菌丝;试验组中,有16份标本两种检测均为阳性,12份检测均为阴性;所有阴性对照组标本两种检测均为阴性.结论 一步法PCR检测曲霉菌属具有很高的检测灵敏性和特异性,其联合FISH检测,可作为一种有潜力的曲霉菌属快速检测方法.     

菘蓝rDNA及端粒多色荧光原位杂交分析

目的 对菘蓝45S rDNA、5S rDNA和端粒进行物理定位,并分析其核型。方法 使用多色荧光原位杂交技术（FISH）进行定位。结果 菘蓝基因组有一对45S rDNA位点位于4号染色体,一对5S rDNA位点位于5号染色体,14对端粒信号位于染色体两端;核型公式为2n＝2x＝14＝10m（2SAT）＋4sm,属2A核型。结论 为菘蓝核型分析、分子细胞遗传图谱构建提供了稳定、有效的细胞学标记。