TLR2对小鼠IL-17分泌的影响及其在抗结核免疫中的作用

目的通过检测TLR2-/-小鼠和WT小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞在TLR2结核菌配体刺激下IL-17的表达水平,阐明TLR2对Th17细胞的作用及其在抗结核免疫的意义。方法选取TLR2-/-小鼠和WT小鼠各6只,分离出小鼠脾脏淋巴细胞与TLR2结核菌配体(19KD脂蛋白、Mtb、Pam3Cys-SK)共刺激培养3 d,通过流式细胞技术检测CD4+T细胞IL-17的表达水平。结果在TLR2结核菌配体刺激下,WT小鼠的CD4+T细胞分泌的IL-17高于TLR2-/-小鼠,在Mtb刺激下两者之间有统计学差异(P<0.05)。结论结核菌通过TLR2直接影响IL-17表达,从而发挥抗结核免疫作用。     

异丁酰紫草素通过PI3K/Akt/m-TOR通路靶向抑制结肠癌细胞增殖的研究

探讨异丁酰紫草素对结肠癌细胞体外生长抑制作用及其对PI3K/Akt/m-TOR通路的影响。MTT法检测不同浓度(0,6.25,12.5,25,50,100 mg·L~(-1))异丁酰紫草素处理人结肠癌HT29细胞24,48 h的增殖抑制率;CCK-8法检测异丁酰紫草素作用人结肠癌细胞HT29,HCT116,DLD-1,Caco-2 48 h的增殖抑制率;Annexin V/PI双标记流式细胞术检测24,48 h异丁酰紫草素对HT29细胞凋亡的影响;细胞周期检测试剂盒检测48 h异丁酰紫草素对HT29细胞周期变化的影响;Western blot及RT-PCR法检测异丁酰紫草素对HT29细胞PI3K,p-PI3K,Akt,pAkt,m-TOR蛋白水平和mRNA水平的变化。结果显示,异丁酰紫草素可抑制人结肠癌细胞生长、增殖,抑制率呈浓度依赖性;异丁酰紫草素促进细胞凋亡,且主要集中在早期凋亡,阻滞细胞于G0/G1期或G2/M期;异丁酰紫草素浓度依赖性下调HT29细胞PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt,m-TOR蛋白及PI3K,Akt,m-TOR mRNA水平。结果表明,异丁酰紫草素能显著抑制人结肠癌细胞增殖,诱导早期凋亡,改变细胞的周期分布,这种生物学效应可能与PI3K/Akt/m-TOR信号通路受到抑制有关。     

老年女性嵌顿性股疝误诊为不完全性肠梗阻1例报告

1 临床资料 患者,女,59 岁.腹痛伴呕吐1周入院.该患者一周前无明显诱因下始出现腹痛,以右下腹为主,阵发性胀痛,有呕吐胃内容物,无呕血,自觉呕吐后腹痛症状缓解.无头晕、乏力、无畏寒、发热,曾于当地医院输液治疗(具体用药不详),症状未缓解,遂来本院门诊拟"不完全性肠梗阻"收治于本科室.自起病来精神、食欲、睡眠一般,1周未解大便,无肛门排气,体重无减轻.查体:生命征平稳,腹平,中下腹部有压痛,无反跳痛,肝脾肋下未及,右侧腹股沟可扪及大小约4×3 cm肿大淋巴结,无压痛,质地软,活动度可,按压不消失,仰卧位不可还纳,咳嗽无冲击感.血常规检查正常.腹部立卧位片示:小肠低位不全肠梗阻.彩超检查:腹水,肠管普遍扩张,考虑肠梗阻.腹部CT示:低位肠梗阻,右下腹近回盲部肠套叠可能.入院诊断:高位不完全性肠梗阻.入院后给予禁食、胃肠减压、灌肠,患者腹痛未缓解,腹胀加重,仍未解大便.2 d后行淋巴结活检术,术中发现右侧腹股沟嵌顿肠管,肠管无坏死,蠕动性好.行右侧嵌顿性股疝松解并修补术.诊断为右侧腹股沟嵌顿性股疝,术后给予抗感染,患者恢复良好.     

肺结核患者外周血记忆性T细胞及B细胞亚群的检测分析

目的探讨肺结核患者外周血记忆性T及B细胞亚群的表达水平。方法采用流式细胞仪检测肺结核患者（TB）、潜伏感染者（LTBI）、健康人（HD）外周血记忆性T、B细胞亚群水平及B细胞表达水平;利用Elispot技术检测外周血单个核细胞（PBMC）结核菌抗原特异性IFN-r分泌水平。结果流式结果显示,TB及LTB1的CD4＊及CD8＊中心记忆性T细胞（Tcm）显著增多,以CD4＊尤为显著;相反,效应记忆性T细胞（Tem）减少。TB记忆性B细胞均低于HD和LTBI（P〈0．01）;而在HD与LTBI及TB这三组CD19＆细胞占淋巴细胞比例中都有明显差异（P〈0．01;P〈0．001）。CD4’／CD8’Tcm与IFN-γ ELISPOT结果成正相关。结论肺结核患者外周血中存在着记忆性T及B细胞亚群的紊乱,中心记忆性T细胞增多,效应记忆性T细胞减少,记忆性T、B细胞的数量及免疫状态与结核菌感染的不同转归有关,记忆性T、B细胞在结核病发病机制中发挥着重要作用。     

黄芩苷对LPS诱导肠道损伤的保护作用研究

目的:探讨黄芩苷对内毒素-脂多糖(LPS)引起的肠损伤的肠黏膜保护作用及黄芩苷对脓毒血症小鼠回、结肠黏膜抗氧化损伤的保护作用。方法:健康雄性BALB/c小鼠50只随机分为5组:正常对照组、模型组、黄芩苷高、中、低剂量组。分别灌胃双蒸水、黄芩苷100,50,25 mg·kg^-1,每日1次,连续3 d,于第3天灌胃后1 h,腹腔注射生理盐水或LPS(17 mg·kg^-1),于腹腔注射LPS后20 h处死小鼠,取回、结肠组织。观察各组小鼠生活、精神状态,记录各组小鼠死亡率,取材后测量结肠长度;光镜下根据Chiu肠黏膜损伤评分方法对肠组织进行分级,以HE染色方法观察肠组织病理学变化;采用紫外分光光度法检测肠组织匀浆液总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX);免疫组化染色方法分析各组肠组织PCNA的表达。结果:小鼠腹腔注射LPS后,出现死亡现象,黄芩苷给药组死亡百分率明显低于模型组。黄芩苷中剂量组小鼠结肠长度较模型组显著增加(P<0.05);肠黏膜损伤程度较模型组显著降低,回、结肠的高剂量组损伤较模型组显著降低(P<0.05),回、结肠的中、低剂量组损伤较模型组显著降低(P<0.000 1);中剂量回肠匀浆液T-AOC,T-SOD,GSH-PX较模型组显著增加(P<0.05);黄芩苷组较模型组PCNA表达无显著性差异。结论:黄芩苷有保护肠上皮细胞免受氧自由基损伤的能力,其通过改善肠黏膜结构与功能减轻LPS引起的肠道损伤。     

新型甲型H1N1流感病毒深圳分离株HA基因的克隆与进化

目的 分析2009年新型甲型H1N1流感病毒深圳分离株A/Shenzhen/71/09血凝素(Hemagglufinin,HA)基因序列,探讨其基因变异与分子进化.方法 采用RT-PCR技术扩增A/Shenzhen/71/09 HA基因片段并进行测序,利用Cluster和Mega3.1软件对不同亚型毒株HA基因核苷酸序列进行分析,绘制发育进化树. 结果 A/Shenzhen/71/09毒株HA基因包含HA1和HA2两个片段,长度分别约为1 032bp和669bp,HA蛋白裂解位点为VPSIQSR↓ GLF,不含连续碱性氨基酸.进化分析表明该病毒株与其它亚型病毒株遗传距离较远,而与深圳地区同期分离的其它H1N1毒株高度同源,同源性在99.0％以上.结论 新型甲型H1N1流感病毒HA基因不具备高致病流感病毒序列特征,深圳地区同期分离的毒株变异率低,但仍需密切关注新型甲型流感的传播情况.     

湿热对溃疡性结肠炎大鼠模型影响的实验研究

目的:探讨湿热对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型的影响。方法:采用内因(高脂高糖饮食)和外因(高湿高温气候)因素刺激,再辅以DNCB/乙酸灌肠建立湿热UC大鼠模型,探讨湿热对UC大鼠证候学、病理学及免疫学指标的变化。结果:湿热UC比单纯UC更早出现与大肠湿热UC患者相似的临床症状,DAI、病理学评分均升高;湿热UC血清SOD、MPO、MIF和组织TXB_2水平明显高于单纯UC(P0.05);湿热UC血清和组织MPO、P选择素、组织MIF、TXB_2与单纯UC表达水平一致,均比正常组升高。结论:血清SOD、MPO、MIF和组织TXB_2水平可作为判断湿热病因所致UC的免疫标识物;湿热能促进UC的发生和进一步加重炎症程度,是UC的主要病因。     

结肠癌化学造模方法研究进展

化学致癌物质是诱导人类癌症发生的重要因素之一,结肠癌化学造模方法是研究结肠癌发生、发展、转移和抗肿瘤药物疗效的重要工具。随着造模方法研究的深入,目前化学造模所常用到的致癌化学物有偶氮类、杂环氨类、芳香胺类、烷基亚硝酰胺类等,种类繁多,且作用机制各不相同;给药途径各异,有口服、灌肠、腹腔注射、肌内注射、皮下注射等;实验动物经常采用不同遗传背景的小鼠。这些因素均能影响造模成功率与成瘤率,本文从致癌剂、给药途径、实验动物及作用机制四个方面对结肠癌化学造模作一综述。     

半枝莲多糖对C26荷瘤小鼠血清Th1/Th2亚群细胞因子的影响

目的观察半枝莲多糖(scutellaria barbata polysaccharides,SPS)对C26荷瘤小鼠血清Th1/Th2亚群细胞因子的影响。方法建立C26结肠癌小鼠移植瘤模型,SPS作用10天后,通过眼眶静脉采血,分离血清,ELISA法测定Th1亚群细胞因子IFN-γ、IL-2和Th2亚群细胞因子IL-4、IL-10的含量。结果 SPS 100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量组治疗组与模型组比较,IL-4和IL-10水平明显下降,IFN-γ和IL-2水平明显上升,差异有统计学意义。结论 SPS可以调节荷瘤小鼠Th1/Th2平衡。