活体肝移植相关技术的改进和探讨

目的　探讨活体肝移植手术 (LDLT)若干技术的改进方法。方法　回顾分析 16例活体肝移植 ,对活体肝移植关键手术的相关技术进行总结。主要技术包括 :在以包含肝中静脉为特点的扩大左半肝切取技术的基础上 ,同时采用肝静脉、腔静脉联合扩大成型吻合技术重建流出道 ;综合显微外科、自体血管移植、血管搭桥及动脉成形等相关技术行肝动脉重建 ;端 端吻合重建胆道。结果　受体的平均手术时间为 (13 2 6± 3 48)h ,平均术中出血为 (3 2 10± 2 967)ml,平均冷缺血时间为 (2 1± 2 0 )h ,平均移植物重量 /受体体重 (GRWR)为 (1 3 9± 0 49) %。供体的平均手术时间为 (5 9± 1 6)h ,平均失血量为 (12 10± 710 )ml,平均移植物重量 (4 2 9± 168)g。术后随访 1～ 2 2个月 ,未见流出道、肝静脉梗阻的相关并发症 ;肝动脉栓塞发生率为 12 5 % ;未见胆道相关并发症。结论　LDLT中GRBW应不低于 0 85 %。联合扩大成型吻合技术重建流出道和综合显微外科、自体血管移植、血管搭桥及动脉成形等相关技术行肝动脉重建是对活体肝移植技术的重要改进     

辛伐他汀预处理对Pringle手法肝细胞癌切除术后肝功能的影响及机制

目的：探讨辛伐他汀（simvastatin）预处理对Pringle手法肝细胞癌切除术后肝功能的影响及其机制。方法：73例肝细胞癌患者随机分为对照组（n=35）和Simvastatin组（simvastatin预处理,n=38,患者术前3 d按20 mg/d口服simvastatin）。分别于手术开腹后和关腹前收集部分肝组织作为标本,于术前和术后第1天采集患者血清。测定血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆红素（total bilirubin,TBIL）和白蛋白（albumin,ALB）以评估肝细胞损伤;逆转录聚合酶链反应（RT?PCR）分析炎症因子白细胞介素（interleukin,IL）?1、IL?6、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,INOS）及肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）?α水平。试剂盒检测血清丙二醛（malondialdehyde,MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）水平;Western blot检测内质网应激蛋白（C/EBP?homologous protein,CHOP）水平。结果：Simvastatin组术后第1天血清ALT、AST和TBIL水平显著低于对照组（P < 0.05）;RT?PCR提示Simvastatin组IL?1、IL?6、INOS及TNF?α水平较对照组明显降低（P < 0.05）。Simvastatin组血清MDA水平明显低于对照组（P < 0.05）;SOD水平显著高于对照组（P < 0.05）。Western blot显示Simvastatin组CHOP表达水平较对照组减少。结论：对于肝细胞癌患者,辛伐他汀预处理可有效缓解Pringle手法肝部分切除术后的肝功能损伤,机制可能与抑制氧化应激和内质网应激水平有关。     

miR⁃1254靶向PAX5调控肝癌的迁移、侵袭与血管形成

目的：探讨miR?1254对肝癌细胞生物学行为的影响及其潜在机制。方法：①RT?qPCR检测miR?1254在肝癌和癌旁组织或细胞系中的表达。②构建过表达和敲低miR?1254的肝癌细胞系,Transwell实验与HUVEC体外成管实验研究miR?1254对肝癌细胞迁移、侵袭与血管形成的影响。③Target Scan预测miR?1254的靶基因,RT?qPCR与Western blot测定靶基因的表达,双重萤光素酶报告基因证实miR?1254的靶基因。结果：①miR?1254在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达上调（P < 0.01）;②miR?1254促进肝癌细胞的迁移、侵袭与血管形成;③配对盒基因5（paired box gene 5,PAX5）在肝癌组织和细胞系中的表达下调,PAX5是miR?1254的直接靶标,miR?1254负向调控肝癌中PAX5的表达;④过表达PAX5能够逆转过表达miR?1254对肝癌细胞进展的的促进作用。结论：miR?1254通过靶向PAX5促进肝癌细胞的迁移、侵袭与血管形成,因而它是肝癌的一个潜在的治疗靶标。     

尾静脉液压法注射转hIL-10在大鼠肝组织中的表达

目的：采用尾静脉液压法注射SB转座元(sleeping beauty transposon)系统转人类白细胞介素10(human interleukin-10,hIL-10)在大鼠肝组织中的表达．方法：采用Ringers溶液20mL经尾静脉10-12 s内快速注射．实验分组：Rinzers 20mL对照组、DOTAP 100μg空白组、DOTAP 100μg pT-hIL-10 50μg转基因组、pT-hIL-10 50μg pCMV-SB 5μg共注射组(每组n=6)．尾静脉注射后采血检测肝功能和转基因组血清中hIL-10的表达．RT-PCR法检测转基因组术后7,14d肝组织中hIL-10 mRNA的表达．结果：尾静脉注射后1,4,7d Ringers 20mL组、DOTAP组、DOTAP pT-hIL-10组、pT- hIL-10 pCMv-SB共注射组ALT水平分别为：4339±602,13516±535,6576±347,4451±465；984±125,4087±600,2117±243,1158±130；592±85,2339±300,1384±165,40±663nkat/L．DOTAP pT-hIL-10组、pT- hIL-10 pCMV-SB共注射组术后1,4,7,14d血清hIL-10浓度分别为：818．3±24．9,640．7±20．6,441．3±25．4,322．3±15．4和1008．3±65．8,820．8±20．9,675．8±31．6,438．2±26．0μg/L,两组相比有显著差异(P＜0．01)．转座元转基因组2wk后仍有hIL-10 mRNA表达,高于DOTAP转基因组．结论：尾静脉液压法注射转hIL-10可在大鼠肝组织中较长时间表达,联合SB转座元系统转hIL-10可提高转基因的效率．     

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目的 探讨和总结临床活估肝移植的手术经验。方法 对12例活体肝移植（13次手术，包括第一次减体积再次肝移植手术）的手术情况进行回顾性分析。结果 13次活体肝移植手术均获成功；所有供体手术后顺利康复，未出现任何严重并发症，并全部纳入术后长期随访中。1例晚期肝癌病人移植后死于胆瘘及继发多器官功能不全；9例Wilson病受体获得长期存活，术后神经系统症状显著改善，复查肝功能、铜氧化酶水平全部在正常范围；1例Wilson瘤，受体于术后72天死于不可递转的排异反应；1例乙型肝炎肝硬化伴亚急性戊型肝炎、肝功能衰竭、Ⅳ期肝性脑病的病人，行急诊成人右叶供肝活体肝移植，术后恢复顺利，现为术后第11周，未出现严重并发症，已恢复正常生活。结论 精湛细致的手术技术是活体肝移植成功的关键，活体肝移植适合我国国情，是解决当前全球性供肝来源匮乏问题的有效途径。     

活体肝移植供体术后随访五例

活体肝移植与尸体肝移植相比 ,有其优越性 ,严格的供体选择及丰富的供肝切取经验 ,才能最大限度地保证供体的安全性。现结合我院施行的 5例活体部分肝移植对供体作一回顾性分析。1.临床资料 :1995年 1月至 2 0 0 1年 3月我院共施行了 5例活体供肝肝移植 ,供肝者 1例为男性 ,35岁 ,4例女性 ,2 5～ 4 2岁 (平均 34岁 )。 5例自愿捐肝者均为直系亲属。供体术后随访分别为 6年、2 .5年、6个月、5个月和 4个月。2 .结果 :供肝切取 5例均为肝左叶(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ段 )。术后供体按常规肝叶切除处理 ,仅 1例术后发生供肝切取断面出血 ,后给予止血药物及…     

血管重建技术在预防活体肝移植小移植肝综合征中的地位

目的:从外科技术角度探讨活体肝移植后小移植肝综合征的防治?方法:回顾性分析本组2002年9月至2008年10月完成的59例活体肝移植临床资料,其中移植物重量/受体体重(graft-recipient weight ratio,GRWR)≤0.8%者共4例,评估为小移植肝?采用血管成型?血管架桥方法保证“宽敞”的流出道,综合显微外科?血管搭桥及动脉成形等相关技术行肝动脉重建?结果:4例小移植供肝受体中仅1例发生小移植肝综合征,经药物治疗后,移植肝肝功能逐步好转,4周后痊愈?随访17~90个月,均获长期存活,生活如常人?结论:小移植肝综合征重在预防?在充分保证供体安全的前提下,尽量获取较多肝容量,重建足够“宽敞”的流出道,保证门静脉和肝动脉重建质量,是预防小移植肝综合征发生最重要的措施?     

抗病毒治疗在伴高滴度HBV-DNA原发性肝癌术后复发中的作用

目的:评价拉米夫定抗病毒治疗伴高滴度HBV-DNA肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)术后的临床疗效?方法:93例伴高滴度HBV-DNA HCC术后患者随机分治疗组与对照组?43例对照组采用单纯手术切除,50例治疗组采用口服拉米夫定(LAM) 100 mg/d?采用SPSS13.0软件进行统计分析,Kaplan-Meier法计算无瘤生存率,Log-rank法进行组间差异分析?结果:所有病例均获随访,期间肿瘤复发73例(78.49%),死亡65例(69.89%)?单纯手术切除组和手术切除联合抗病毒治疗组1?3?5年的无瘤存活率分别为:76.74%?44.19%?13.95%和88.25%?69.78%?28.73%,两组之间差异有统计学意义(P = 0.014 3)?结论:肝癌根治术后抗病毒治疗能降低肿瘤复发率, 对术前 HBV-DNA高水平复制肝癌患者,宜尽早联合抗病毒治疗?     

重组肝细胞生长因子促进大鼠移植肝细胞的再生

目的探讨术后应用重组肝细胞生长因子(r HGF)对大鼠移植肝细胞再生的促进作用。方法采用改良“二袖套法”建立SD大鼠原位部分肝移植模型,受鼠分为实验组和对照组,术后经尾静脉分别给予r HGF和相同体积的生理盐水,2次/d。两个组分别在术后第1、2、4、7d时随机挑取5只大鼠处死,称取移植物湿重,采血检测血清丙氨酸转氨酶及白蛋白,流式细胞仪检测移植肝的增殖活性,免疫组织化学法检测移植肝Ki-67的表达情况。结果术后第1、2d,实验组移植物湿重较对照组同时间段明显增加;术后第4、7d,实验组血清丙氨酸转氨酶水平较对照组同时间段明显降低,而白蛋白水平较对照组同时间段明显增高;术后第2、4d,实验组的移植肝增殖指数和Ki-67表达较对照组高(P<0.05)。结论大鼠部分肝移植后使用r HGF能够明显促进移植肝细胞的再生。     

Wilson''''s病患者亲体部分肝移植和全肝移植术后血清铜蓝蛋白及尿铜水平的变化

目的　总结Wilson’s病患者亲体肝移植和全肝移植术后血清铜蓝蛋白及尿铜水平的恢复情况。方法　自 2 0 0 0年 9月至 2 0 0 3年 11月我院为 2 6例Wilson’s病患者施行了肝移植术 ,均并发终末期肝硬变 ,其中 3例发生急性肝功能衰竭。术前血清铜蓝蛋白和尿铜水平分别为 (12 4 .8± 2 2 .8)mg/L和 (15 2 4 .8± 32 8.6 ) μg/ 2 4h ,其中行活体部分肝移植 2 2例 ,全肝移植 4例 ,亲体肝移植供体术前血清铜蓝蛋白水平为 (2 30 .4± 2 9.6 )mg/L ,尿铜水平均 <5 0μg/ 2 4h。结果　所有患者手术顺利 ,全肝移植患者术后 1、3、6及 12个月血清铜蓝蛋白和尿铜水平分别为 (32 0 .2±36 .8)mg/L、(380 .4± 4 5 .6 )mg/L、(36 0 .5± 37.6 )mg/L、(35 6 .2± 2 7.6 )mg/L和 (2 4 0 .4± 2 2 .8) μg/ 2 4h、(86 .5± 10 .6 ) μg/ 2 4h、(5 4 .2± 6 .8) μg/ 2 4h及 (46 .8± 3.4 ) μg/ 2 4h ;亲体肝移植患者术后 1、3、6及 12个月血清铜蓝蛋白和尿铜水平分别为 (2 16 .8± 2 0 .4 )mg/L、(2 4 8.5± 32 .6 )mg/L、(2 85 .4± 4 4 .3)mg/L、(2 6 0 .2± 36 .6 )mg/L和(380 .8± 37.6 ) μg/ 2 4h、(15 0 .6± 2 4 .5 ) μg/ 2 4h、(75 .5± 9.6 ) μg/ 2 4h及 (6 0 .3± 5 .8) μg/ 2 4h。结论　全肝移植和亲体肝