调控血管生成中药的研究现状

从抗血管生成和促血管生成两方面综述调控血管生成中药的研究成果。此类中药可广泛应用于与血管生成有关疾病的治疗。     

川芎嗪对VEGF诱导的血管内皮细胞增殖的影响

目的:研究川芎嗪对血管内皮细胞和对VEGF诱导的血管内皮细胞生长、增殖的影响.方法:采用台盼蓝排染法测定人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞计数,MTT法测定川芎嗪对血管内皮细胞和对VEGF诱导的血管内皮细胞增殖的抑制.结果:川芎嗪直接作用于ECV304细胞,其细胞计数、吸光度(A)值均较对照组显著减少(P＜0.05);川芎嗪作用于VEGF诱导的ECV304细胞,其A值较对照组显著降低(P＜0.05).结论:川芎嗪能直接抑制血管内皮细胞的增殖,对VEGF诱导血管内皮细胞的增殖也有抑制作用.     

川芎嗪注射液对血管内皮细胞DNA合成的影响

目的 :探讨川芎嗪注射液对血管内皮细胞DNA合成的影响。方法 :采用3H -TdR掺入法 ,测定经川芎嗪注射液作用后体外培养的人脐静脉血管内皮细胞的放射性强度 (CPM )值。结果 :川芎嗪注射液可显著降低血管内皮细胞的CPM值 ,且均呈剂量依赖性。结论 :川芎嗪注射液抑制肿瘤血管生成的作用可能与其抑制血管内皮细胞DNA合成有关。     

三棱丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成及VEGF,TNF-α表达的研究

目的:考察三棱丸(SLW)抑制子宫内膜异位症(EMS)血管生成作用及机制。方法:以SLW作用于子宫内膜异位症大鼠模型,免疫组化方法检测异位内膜组织中微血管密度(MVD)、血管生成因子VEGF及TNF-α蛋白的表达,RT-PCR方法检测异位组织中VEGF mRNA和TNF-α mRNA的表达。结果:SLW能有效降低MVD,抑制异位内膜组织中VEGF,TNF-α蛋白和mRNA的水平。结论:SLW具有良好的抗EMS血管生成作用,其作用机制与抑制血管生成因子VEGF,TNF-α的水平有关。     

梓葛冻干粉对人脐静脉内皮细胞缺氧/ 复氧损伤的保护作用

目的:研究中药单体组方梓葛冻干粉对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECs,采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型。用梓葛冻干粉干预后,采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Western blot法分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达。结果:与模型组相比,梓葛冻干粉12.5 mg.L-1显著提高细胞活力(P<0.05);梓葛冻干粉49.0,24.5,12.5 mg.L-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性(P<0.05);梓葛冻干粉24.5,12.5 mg.L-1能显著减少LDH的释放量及降低MDA和NO的含量(P<0.05),并上调细胞Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01);梓葛冻干粉49.0,24.5,12.5 mg.L-1显著降低Bax的表达并上调Bcl-2/Bax(P<0.05,P<0.01),且梓葛冻干粉49.0,24.5 mg.L-1显著降低Caspase-3的表达(P<0.01)。结论:梓葛冻干粉可显著拮抗缺氧/复氧对HUVECs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化和抗凋亡能力有关。     

RP-HPLC法测定银天颗粒中主要药效成分的含量

目的:建立测定银天颗粒中绿原酸和栀子苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。绿原酸检测色谱条件:色谱柱为Platisil-ODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸(20:80),检测波长为326nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为25℃。栀子苷检测色谱条件:色谱柱为AgilentZorbaxSB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(10:90),检测波长为238nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为25℃。结果:绿原酸、栀子苷的检测浓度分别在5.4～108.0、11～110μg·mL-1范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.9999);平均回收率分别为99.04%(RSD=2.66%,n=6)和97.69%(RSD=2.07%,n=6)。结论:本方法专属性强、重复性好、结果准确,可用于银天颗粒的质量控制。     

丹七片的质量标准研究

[目的]建立丹七片的质量标准的方法。[方法]采用薄层层析法对方中丹参和三七进行了定性鉴别,采用反相高效液相法测定了制剂中所含丹酚酸B的含量。[结果]鉴别方法专属性强、重复性好,含量测定丹酚酸B在线性范围内线性关系良好,回收率为101.7%,RSD为1.77%。[结论]本质量标准可有效地控制丹七片的质量。     

普拉克索治疗不宁腿综合症的疗效研究

目的探讨普拉克索对不宁腿综合症(RLS)患者治疗的临床疗效。方法将30例患者随机分为对照组和治疗组,两组为继发性RLS患者均治疗原发病,同时给予非药物治疗和氯硝西泮,治疗组在上述治疗的基础上加用普拉克索,以治疗前后匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)和RLS严重程度量表(IRLSSG)评分进行评估疗效。结果两组治疗后PSQI和IRLSSG评分明显降低,组内和组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论普拉克索治疗RLS有效,值得临床应用。     

川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素在模型与正常大鼠体内药动学比较研究

目的探讨川芎、延胡索中主要活性成分在模型与正常大鼠体内药动学规律与差异。方法 SD大鼠分为对照组和子宫内膜异位症模型组,每组8只,各组均按川芎嗪50mg/kg、阿魏酸30mg/kg、延胡索乙素20mg/kg ig给药,采用高效液相色谱法测定各组大鼠血浆中川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素的质量浓度,DAS2.0程序计算药动学参数。结果模型组川芎嗪药时曲线下面积(AUC_(0~t))、达峰浓度(C_(max))、达峰时间(t_(max))、半衰期(t_(1/2))和平均驻留时间(MRT_(0~t))与对照组相比差异均不显著(P0.05);模型组阿魏酸AUC_(0~t)、C_(max)、t_(max)都小于对照组,但差异没有显著性(P0.05),t_(1/2)、MRT_(0~t)显著小于对照组(P0.05);模型组延胡索乙素AUC_(0~t)、t_(max)、MRT_(0~t)均显著大于对照组(P0.05)。结论川芎、延胡索主要活性成分在正常大鼠和模型大鼠的体内过程有所不同。阿魏酸在模型大鼠体内消除更快,延胡索乙素在模型大鼠体内吸收浓度更高、消除更慢,川芎嗪在正常及模型大鼠的体内过程无显著性差异。     

糖皮质激素受体GR真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建糖皮质激素GR的真核表达载体,为探讨GR与中医肾阳虚的关系奠定基础.方法:以GR基因为靶基因,以pBS/U6-Neo质粒为载体,设计构建重组体,根据GR mRNA基因序列,设计有小发夹结构的2对寡核苷酸序列,克隆到空载体pBS/U6-Neo,转化DH5a菌株,提取质粒,进行PCR鉴定和测序分析.结果:经PCR鉴定筛出的重组体测序结果与目的序列相同,重组载体构建成功.结论:利用RNA干扰技术可成功构建小干扰RNA重组体,为后续稳定转染及培育转基因小鼠奠定基础.