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1.
压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究 总被引:5,自引:1,他引:4
目的:探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法:收集临床64株葡萄球菌标本,对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测,并以PCR电泳检测作参照,与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果:传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致,而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中,2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的mecA为阴性,2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的mecA为阳性,1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌(MRCNS)的mecA为阴性;2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)的mecA为阳性。结论:以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因,既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌,又可判断其耐药类型,能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。 相似文献
2.
长、短链探针以链延伸反应提高基因传感器检测MRSA灵敏度的实验研究 总被引:16,自引:8,他引:8
目的:利用链延伸反应的原理延长引物链以提高石英谐振式基因传感器表面的质量负载,从而提高传感器检测MRSA的灵敏度。方法:以不对称PCR的反应产物做为长链探针,人工合成的寡核苷酸片段为短链探针,在基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌mecA和femA的长链及短链探针共4种探针片段,与相应的靶序列杂交后,加入Klenow酶,37℃进行链延伸反应1h。结果:长、短链探针均有效地固定了传感器表面。mecA,femA短链探针在链延伸反应前的检测灵敏度为0.5nmol/L,但经链延伸反应后检测灵敏提高到了0.05nmol/L;而长链探针却无法与相应的基因组靶序列发生杂交。结论:短链探针链延伸反应有效地提高了石英谐振式基因传感器的灵敏度,但该法不适用于链探针。 相似文献
3.
4.
尹辉 《中国医疗器械杂志》2004,28(6):463-463
1 故障一 故障现象:透视时荧光屏上无图像,毫安表无指示;转到普通摄影条件,毫安表显示值很小,远达不到所要求的毫安量. 相似文献
5.
流式细胞术检测98例献血者外周血HLA-B27的临床意义 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 通过对98例献血者外周血HLA—B27的检测,建立并优化测定HLA-B27的流式细胞术,并评价B7在早期辅助临床诊断以强直性脊柱炎为代表的脊柱关节病中的应用价值。方法 分别采用EDTA和肝素钠两种不同的抗凝剂,以及加单抗不同的量(7~30μl)检测2个B27阳性和9个B27阴性个体的全血,采用EDTA抗凝和15μl的单抗剂量检测献血者外周血,探寻流式细胞术检测HLA-B27的最佳实验条件;另以微量淋巴细胞毒实验分别对2例阳性标本和9例阴性标本进行验证。结果 通过微量淋巴细胞毒和流式细胞术两种方法检测98例献血者外周HLA-B27中2例为阳性,96例为阴性,且EDTA和肝素钠两种不同的抗凝剂,以及加单抗不同的量(7~30μl)对流式细胞术检测HLA-B7无任何影响。结论 优化并建立了一种简便省时、稳定性和重复性皆好的流式细胞仪用于检测HLA-B27的方法;HLA-B27与强直性脊柱炎高度相关,HLA-B27检测已成为临床支持以强直性脊柱炎为首的脊柱关节病的诊断与鉴别诊断的重要依据,具有重要的临床意义。 相似文献
6.
7.
不同温度对压电传感器基因杂交效应的影响 总被引:3,自引:2,他引:1
目的:探讨温度对压电传感器基因杂交效应的影响。方法:在压电传感器阵列上固定20碱基的疏基DNA探针,而后分别在15℃、20℃、25℃、30℃下与同长度的互补靶序列进行杂交,计算机采集并分析传感器频率数据,比较各温度下杂交达到平衡所需时间,杂交前后频率差,并计算杂交动力学参数。结果:随温度增加,杂交时间有缩短趋势,杂交前后的频率差值逐渐减小。结合常数变化不明显,解离常数增大,使平衡常数显著增大。结论:在石英晶体传感器阵列上,基因杂交量随温度增高而减小。 相似文献
8.
目的:构建一种太赫兹(THz)超材料传感方法用于microRNA-21(miRNA-21)的信号放大检测。方法:首先构建THz超材料传感方法,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳及zeta电位验证方法的可行性;对传感器检测条件进行优化之后,对不同浓度的miRNA-21以及其他不同的miRNAs进行检测,并与其他microRNA检测方法进行比较;最后,对该传感器的回收率进行了评价。结果:在最优实验条件下,通过双链特异性核酸酶(DSN)循环识别与滚环扩增(RCA)的双重信号放大策略,该THz超材料传感器对靶标miRNA-21的响应范围为10 fmol/L至10 nmol/L,检测限为8.49 fmol/L。并且该传感器具有较好的特异性,具备了从多种miRNAs中识别靶标miRNA-21的能力,并且在商业化人血清样本中的回收率可达94.33%到115.33%。结论:该THz传感器可以实现靶标miRNA-21的高灵敏、高特异性检测,具备了在miRNA相关疾病无标记诊断与早期预警的潜力。 相似文献
9.
离子交换层析微柱法及亲和电泳法与液相色谱分析法对糖化血红蛋白含量测定的比较 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 探讨微柱法对HbA1C定量检测的意义。方法 采用微柱法、电泳法与HPLC法分别对同一标本进行HbA1C 含量测定,比较3种方法对HbA1C含量检测结果。结果 微柱法精确度和重复性好(批内变异系数CV<1.5%,批间CV<5%),与参比方法HPLC经相关处理,其相关系数r=0.945,两法具有高度的相关性(P<0.001)。结论 采用微柱法对HbA1C定量测定,无须贵重仪器设备,是一种简便快速的测定方法,能在大多数临床实验室广泛推广。 相似文献
10.
目的 探讨探针浓度对压电传感器基因杂交效应的影响。方法 9种浓度的探针与同一浓度的靶序列在压电传感器阵列上进行杂交,计算机采集并分析传感器频率数据,比较各探针浓度下固定前后频率差,杂交达到平衡所需时间,杂交前后频率差,同时,根据较低浓度数据得出的杂交动力学参数。计算各浓度下的频率变化理论值。结果 随探针浓度增加,固定引起的频率变化值逐渐增加,杂交时间有缩短趋势,杂交前后的频率差值在探针浓度较低(1nmol/L-0.5μmol/L)时逐渐增大,而探;针浓度较高(1.0-3.5μmol/L)时反而减小,高浓度时杂交前后频率变化理论值与实际值存在明显差异。结论 在石英晶体传感器阵列上,基因杂交效率随探针浓度增加而增大,但探针浓度过高反而抑制杂交,其原因可能主要在于探针之间的空间构象关系和静电排斥。 相似文献