锶盐对高浓度地塞米松作用下大鼠成骨细胞的影响

目的 探讨雷奈酸锶(Sr)对高浓度地塞米松(Dex)作用下大鼠成骨细胞（OB)的影响。方法 采用大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)来源的成骨细胞,运用MTT试剂盒和AKP试剂盒分别测定Sr对细胞增殖和分化的影响,定量PCR方法测定Sr对高浓度地塞米松作用下成骨钙素（OC)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响。结果 Sr浓度在10-5、10-4 mol/L时,能够促进OB增殖和分化(P < 0. 01); Sr浓度为10-4mmol/L能够有效拮抗高浓度Dex( 10-5 mol/L)对成骨细胞分化抑制作用（P <0.01),并能逆转Dex对成骨相关基因OC和TGF-β的抑制作用(P <0. 05,P <0. 01)。结论 Sr能够对大鼠BMSCs来源的成骨细胞的增殖、分化有促进作用,同时10-4 mol/L Sr可以拮抗Dex( 10-5 mol/L)对ALP和成骨相关基因的抑制作用。为Sr防治糖皮质激素性骨质疏松提供了细胞学依据。     

基于iTRAQ多重标记串联质谱技术系统性筛选乳腺癌患者血清蛋白表达的差异分析

目的:观察串联质谱技术在乳腺癌血清蛋白表达中的差异。方法:选取2020年2月－2021年2月黑龙江省牡丹江医学院附属二院收治的乳腺癌新辅助化疗患者20例作为研究组,包含10例化疗有效患者及10例化疗无效患者,同时选取8名健康者作为对照组。采集所有患者的肘静脉血,分别采用高通量miRNA、iTRAQ表达谱测序技术,从“组学”的角度对乳腺癌新辅助化疗不同疗效患者miRNA差异表达谱、外周血单个核细胞蛋白组进行研究。随后,先进行Pathway通路分析,该过程在蛋白质层面进行,然后找出sRNA的成熟体序列,在此过程中严格根据miRbase18数据库。将已知的cDNA序列整理为一行,对得到的sRNA对应靶基因进行预测,Pathway分析靶基因,最后将同一Pathway通路中的sRNA靶基因及蛋白质寻找出来。结果:研究组和对照组共筛选出19个差异表达蛋白,选取其中具有较大表达差异的肝细胞生长因子(HGF)进行验证。iTRAQ标记图谱显示,研究组和对照组的血清HGF表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的血清HGF表达水平逐渐升高(P<0.05),均高于对照组(均P<0.05),符合i TRAQ标记图谱鉴定结果。结论:串联质谱技术用于筛选发现乳腺癌细胞HGF表达水平升高具有显著效果,可有效指导临床诊治乳腺癌的工作,将有效参考提供给靶向治疗药物的开发。     

中药复方护骨胶囊对糖皮质激素诱导骨质疏松 大鼠骨密度和骨形态计量学的研究

目的 探讨中药复方护骨胶囊(主要由制何首乌、淫羊藿、熟地黄等多味中药加工而成的复方制剂)对糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠骨丢失的影响.方法 3月龄SPF级雄性SD大鼠30只,随机平均分为3组:正常对照组(Nrm)、激素组(Met)和中药组(CH).Met组:皮下注射甲强龙(Met)5mg/kg/d,每周5次;CH组:在Met组基础上给予中药复方护骨胶囊(150 mg/kg/d)灌胃,实验期12w.大鼠右侧股骨和腰椎行骨密度(BMD)测定,右侧胫骨行骨形态计量学分析.结果 Met组腰椎和股骨BMD显著低于Nrm组;CH组腰椎和股骨BMD显著高于Met组.Met组Tb.N、%Tb.Ar、MS/BS、MAR和BFRs显著低于Nrm组,Tb.Sp、ES/BS显著高于Nrm组;中药组Tb.N、%Tb.Ar、MS/BS、MAR和BFRs显著高于Met组,Tb.Sp,ES/BS显著低于Met组.结论 中药复方护骨胶囊在提高激素诱导骨质疏松大鼠的骨密度,促进骨形成,降低骨吸收,延缓骨丢失方面有积极作用,对继发性骨质疏松的预防和治疗有一定前景.     

亲代三丁基锡暴露对F1代KM小鼠血常规的影响

目的 探讨亲代三丁基锡暴露对F1昆明小鼠血常规的影响。方法 将雌、雄各40只小鼠随机分别分为空、低、中、高浓度组(0、0.2、2和20 μg/kg), 每天进行染毒, 持续45 d。在第60天时, 将同浓度组的雌:雄鼠按1:1进行同笼配种。仔鼠出生60 d后取血, 进行血常规的检测。结果 与对照组相比, F1代雄性低浓度和高浓度组的红细胞数量和血红蛋白量显著增加(P < 0.01);F1代雄性低浓度组红细胞体积、平均血红蛋白含量(P < 0.01)和淋巴细胞绝对值(P < 0.05)显著降低;F1代雌性高浓度组的红细胞数量显著增加(P < 0.01), F1代雌性小鼠的血红蛋白量、红细胞压积、血小板量三项指标随着TBT浓度的增加呈剂量依赖性。结论 亲代TBT暴露影响F1代小鼠的血常规, 且低浓度时对F1代雄性小鼠的影响最大, 高浓度时对F1代雌性小鼠的影响最大。     

TRIM11靶向调控miR-24-3p促进乳腺癌细胞系MCF7增殖和侵袭

目的探讨TRIM11靶向调控miR-24-3p对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响,明确TRIM11高表达与乳腺癌预后的相关性。方法免疫组化法检测TRIM11在31例乳腺癌和31例癌旁正常组织中的表达。用siRNA TRIM11和miR-24-3p慢病毒转染人乳腺癌MCF7细胞,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western bolt检测TRIM11、miR-24-3p mRNA和蛋白表达变化及相关性分析;荧光素酶报告实验验证miR-24-3p为TRIM11的潜在靶点;MTT法和Transwell检测细胞增殖数量、增殖活力和侵袭。结果 TRIM11在乳腺癌组织及MCF7细胞中表达显著增高(P0.05)。TRIM11高表达患者生存率显著降低(P0.05)。siRNA TRIM11转染显著抑制MCF7细胞中TRIM11表达,而且抑制MCF7细胞增殖数量、增殖活力和侵袭能力(P0.05)。miR-24-3p显著降低野生型3'-UTR TRIM11荧光素酶活性(P0.05),但对突变型没有作用。miR-24-3p mRNA在MCF7细胞下调,miR-24-3p抑制MCF7细胞TRIM11蛋白和mRNA表达,miR-24-3p mRNA与TRIM11 mRNA在MCF7细胞中表达显著负相关(P0.05),miR-24-3p抑制MCF7细胞增殖数量、增殖活力和侵袭能力(P0.05)。结论 TRIM11在乳腺癌组织及MCF7细胞中表达上调,并可能通过靶向调控miR-24-3p促进乳腺癌细胞增殖和侵袭,进而影响乳腺癌预后,TRIM11/miR-24-3p轴有望成为治疗乳腺癌的新靶点。     

尿道下裂的MAMLD1基因研究

目的分析尿道下裂患儿MAMLD1基因突变的比例，探讨该基因在尿道下裂发病中的作用。方法收集100例单纯尿道下裂患者进行MAMLD1基因检测，为实验组，随机选取健康人群来源的200条x染色体为对照组。直接测序检测MAMLD1基因编码区外显子的序列。结果发现2个位点碱基改变（c．1699C〉T，c．1985A〉G），其中C．1985A〉G为已报道的SNP；c．1699C〉T未报道过，通过Fisher精确概率法比较正常和尿道下裂患者中出现的频率，结果无统计学意义（P=0．625）。结论MAMLD1基因不是我国单纯尿道下裂发生的热点基因。c．1699C〉T是MAMLDl基因新发现的SNP。     

固相萃取-HPLC法同时测定盐酸帕洛诺司琼注射液中6种杂质

目的：固相萃取—高效液相色谱法同时测定盐酸帕洛诺司琼注射液中差向异构体、对映异构体、氮氧杂质等6种杂质的含量。方法：样品经1 mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH,经Agilent Bond Elut C8固相萃取柱（200 mg,3 mL）去除大部分基质干扰,实现净化与富集,再用乙醇洗脱得到富集物。采用USP40盐酸帕洛诺司琼原料药已知杂质测定方法,以Astec CHIROBIOTIC?誖V（250 mm × 4.6 mm,5 μm）为色谱柱对其进行分离检测。结果：6种杂质在0.2~4.3 μg·mL-1范围内线性良好,相关系数r≥0.999 5,方法的检测限为0.056~0.065 μg·mL-1,低、中、高3个浓度的加样回收率为90.60%~105.7%。结论：本方法可用于同时检测盐酸帕洛诺司琼注射液中的6种杂质。     

腹腔镜胆囊切除术预防肝外胆管损伤的体会

腹腔镜胆囊切除术(Laparoswpic cholecyslectomy,LC)以其损伤小、痛苦少、恢复快等优点,普遍被应用于各临床单位并广为患者接受。但因胆囊疾患具有"危险的解剖、危险的疾病、危险的手术"[1]的特点,因此在对Calot三角解剖困难、镜下胆囊管与胆总管走行汇合关系分辨不清的处理上,多应用中