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1.
目的 基于重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建转录因子EB(TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化。 方法 根据SOE PCR技术原理设计突变引物,以pGEX-6p-1-TFEB质粒为模板,分别采用外侧引物F和R及突变引物Fn和Rn进行第1步PCR扩增,获得含突变位点的产物1和产物2。经第2步PCR退火延伸对产物1和产物2进行重叠拼接,以拼接后DNA片段为模板,采用外侧引物F和R进行第3步PCR扩增获得含突变位点的目的DNA;将其克隆至pGEX-6p-1载体,采用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ进行酶切鉴定,DNA测序验证突变结果。于大肠杆菌(E.coli)中分别采用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在不同条件下诱导TFEB及其突变体重组蛋白表达。Glutathione-Sepharose 4B琼脂糖凝珠分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳检测纯化产物蛋白浓度和相对分子质量。 结果 第1步PCR扩增获得均含有突变位点的2条DNA片段,经第2步PCR退火延伸和第3步PCR扩增后获得大量含有突变位点的完整DNA片段。双酶切鉴定,连接的DNA片段与目的片段大小一致。DNA测序显示TFEB的114位丝氨酸(TCT)成功突变为丙氨酸(GCT)。在0.5?mmol·L-1 IPTG、16?℃诱导过夜条件下获得TFEB及其突变体的可溶性蛋白表达。SDS-PAGE凝胶电泳,纯化后蛋白浓度较高,分子大小正确。 结论 利用SOE PCR技术成功实现了TFEB丝氨酸114位点的定点突变,并且TFEB及其突变体基因在E.coli中成功表达。 相似文献
2.
目的 探讨影响山东省发热伴血小板减少综合征(SFTS)发病的危险因素,为科学防制该病提供依据。方法 应用1∶2匹配的病例对照研究方法,调查收集病例、对照的基本情况、可疑暴露因素等信息,采用单因素和多因素的配对条件logistic回归分析发病危险因素。结果 本研究共纳入374例SFTS确诊病例和748例对照。分析结果显示,有病例接触史(OR = 5.84,95%CI:1.11~30.88)、有家养动物(OR = 1.74,95%CI: 1.02~2.96)、近1个月见过蜱(OR = 5.85,95%CI: 2.73~12.53)、近2周有蜱叮咬史(OR = 29.58,95%CI: 6.70~130.60)、从事田间作业(OR = 2.63,95%CI:1.41~4.91)、住宅周围环境有杂草/农作物/菜地(OR = 3.24,95%CI:1.74~6.05)和住宅卫生条件差(OR = 2.20,95%CI:1.32~3.66)是SFTS发病的危险因素(P<0.05),近1个月有亲邻发病(OR = 0.01,95%CI:0~0.03)、采取防护措施(OR = 0.21,95%CI:0.10~0.46)是SFTS发病的保护因素(P<0.05)。结论 接触病例、饲养家养动物、蜱叮咬、无防护措施的野外作业及住宅周围环境卫生较差等是影响山东省SFTS发病的危险因素。应加强重点人群SFTS健康教育和行为干预,减少危险因素暴露,以控制SFTS传播。 相似文献
3.
4.
目的 探讨奥希替尼靶向药联合培美曲塞、顺铂方案化疗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者无进展生存期及总生存期的影响。方法 选取收治的82例晚期NSCLC患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组各41例。对照组予以培美曲塞联合顺铂化疗,观察组在对照组基础上联合奥希替尼化疗。比较两组临床疗效、毒副反应,治疗前、治疗后评估两组患者血清肿瘤标志物[糖类抗原50(CA50)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)]、免疫功能,随访观察患者预后状况。结果 观察组治疗总有效率更高(P<0.05)。治疗9周后,两组CA50、CEA、CYFRA21-1均低于治疗前(P<0.05),观察组治疗后各指标水平更低(P<0.05)。治疗9周后,观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于治疗前(P<0.05),对照组CD3+低于治疗前(P<0.05),观察组治疗后各指标水平高于同期对照组(P<0.05)。... 相似文献
5.
目的探讨朗格汉斯细胞组织细胞增生症的临床病理特征。 方法回顾性分析2016年1月至2021年9月泰安市中心医院病理科确诊的5例朗格汉斯细胞组织细胞增生症患者的临床资料,分析其病理形态学特点及免疫表型。 结果男性2例,女性3例;3例累及骨组织,1例累及腭部软组织,1例累及淋巴结;形态学均表现为肿瘤细胞呈圆形或卵圆形,有核沟,细胞质轻度嗜酸性,背景为数量不等的嗜酸性粒细胞、组织细胞、小淋巴细胞及中性粒细胞。免疫表型方面,肿瘤细胞一致性表达CD4、CD1α及S-100。 结论朗格汉斯细胞组织细胞增生症是一种少见的朗格汉斯细胞克隆性增生性病变,免疫组织化学表达稳定,选择合适的免疫组织化学抗体并结合病理形态学特征方能正确诊断。 相似文献
6.
目的:对妊娠期糖耐量异常(GIGT)的孕妇开展产科门诊护理,分析其临床应用价值。方法:选择2019年1月-2020年9月门诊接诊的GIGT孕妇74例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组37例。对照组实施常规门诊孕期保健宣教,观察组在对照组基础上开展针对性门诊护理干预,比较两组护理干预效果。结果:两组孕妇入组时空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PPG)和孕36周及分娩时的FPG水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组孕36周和分娩时的2 h PPG水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组入组时体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组孕妇孕36周、分娩时体质量以及孕妇孕期增重值均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组胎膜早破、巨大儿、产后出血发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组妊娠期糖尿病(GDM)、妊娠期高血压(HDCP)、早产发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:给予GIGT孕妇产科门诊护理干预,能有效控制其血糖水平与体质量,降低孕期并发症发生率,改善分娩结局。 相似文献
7.
目的:探讨公立医院医疗新技术临床应用管理体系及实践效果。方法:以某公立医疗机构为研究对象,通过文献理论研究和实践验证法探索建立新技术临床应用管理体系,并分析其在实践过程中的效果。结果:提高了医务人员申报新技术的积极性,医院专科综合实力得到显著增强,患者满意度大大提高。结论:公立医院医疗新技术临床应用管理体系有助于规范临床新技术应用的全过程管理,可促进新技术的良性发展,提高医疗服务水平。 相似文献
8.
目的:探讨巡回护士工作程序表在腹腔镜胆囊切除术患者手术护理配合中的应用效果。方法:将2019年1月1日~7月31日120例行腹腔镜胆囊切除术患者设为对照组,采用手术室常规护理。将2019年8月1日~2020年6月30日120例行腹腔镜胆囊切除术患者设为观察组,在手术配合中使用巡回护士工作程序表。比较两组临床效果。结果:两组手术依从性、手术时间、术中护士在位率、物品准备合格率及手术相关并发症发生率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:巡回护士工作程序表能够提高腹腔镜胆囊切除术患者的手术配合效率,减少手术相关并发症,促进医护配合默契。 相似文献
9.
目的探讨肾周脂肪梅奥粘连概率评分系统(MAP)在肾癌后腹腔镜肾部分切除术中的临床应用价值。 方法回顾性分析2015年1月至2020年6月徐州医科大学附属淮安医院泌尿外科收治的行后腹腔镜肾部分切除术的153例肾癌患者的临床病例资料。依据MAP评分系统将其分为低度复杂组、中度复杂组和高度复杂组三组。比较各组间的手术时间、术中出血量、术中及术后并发症、术中热缺血时间、术后住院时间及术后血肌酐变化情况。 结果在153例患者中,低度复杂组68例,中度复杂组58例和高度复杂组27例。三组患者在年龄、性别、术前血肌酐水平、肿瘤最大径、肿瘤位置、BMI、RENAL评分等方面差异无统计学意义(P>0.05)。随着复杂程度的提高,手术时间、术中出血量也在不断增加(P<0.05);而术中热缺血时间、术后住院时间及术后血肌酐水平无明显变化(P>0.05)。在术中并发症方面,随着复杂程度的提高,术中并发症的发生率也在增加(P<0.05),且高度复杂组的术后并发症发生风险是低度复杂组的13.895倍(P=0.002),MAP评分系统预测术中并发症发生的精度较高(AUC=0.757,P=0.002)。但是术后并发症各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论MAP评分系统在肾癌后腹腔镜肾部分切除术中,对预估手术难度及术中并发症发生风险有较好的临床应用价值。 相似文献
10.
儿童早期发展是从受精卵到8岁儿童体格、心理和社会能力的生长和发育,其发展过程受到遗传、环境等多方面影响。其中,新生儿的优质营养是儿童早期发展的重要物质基础,新生儿期的母乳喂养、新生儿疾病的筛查、早产儿和低出生体重儿的合理喂养都是促进儿童早期发展的关键之一。本文将从新生儿营养的角度,全面总结其对儿童早期发展的作用,为更好地优化母婴营养,促进儿童早期发展提供新的方向与参考。 相似文献