应用SYBR GreenⅠ实时荧光聚合酶链反应检测SpA患者人类白细胞抗原-B27

目的评价SYBR GreenⅠ实时荧光聚合酶链反应检测人类白细胞抗原-B27。方法对65例SpA患者和100例健康人群,分别以PCR-SSP和SYBR GreenⅠ荧光PCR检测外周血HLA-B27 DNA进行检测,比较两种检测方法。结果丳CR-SSP检测HLA-B27阳性样本呈现135bp和268两个条带,阴性标本仅有268bp一条条带。SYBR GreenⅠRT-PCR检测结果示,阳性标本的熔解曲线呈现HLA-B27的90.37℃和β-globin的86.71℃两个Tm峰,阴性标本仅有β-globin一个Tm峰;侾CR-SSP和SYBR GreenⅠRT-PCR结果符合率为100%;僑pA患者和健康人的HLA-B27阳性率分别为70.76%和6%。结论 SYBR GreenⅠRT-PCR是一种可靠、快速的检测HLA-B27方法。     

浙江省近年来流感病毒株的抗原性及人群免疫状况分析

目的 为了解1998－1999年浙江省分离的流感病毒株的抗原性以及杭州市区人群对各类流感病毒的体液免疫力。方法 我们采用常规大量半加敏双向血凝抑制（HI）试验检测相应毒株的交叉HI滴度并计算相应的抗原比。用微量半加敏HI试验检测人群流感HI抗体滴度。结果 浙江省近2年来共分离到12株流感病毒代表株，其中11株为甲3（H3N2）亚型，1株为乙型。A3／浙防／10／98毒株与A3／汉防／359／95、A3悉尼／5／97、A3／沪防／1／98毒株的抗原比分别为1．4、4．0和16．0；A3／浙防／7／99毒株与上述3种标准毒株的抗原比分别为22．6、2．0和1．4。B／浙防／31／99毒株与B／京防／172／97和B／深防／12／97毒株的单向HI滴度分别为≥10240和40。杭州市区人群各型流感HI抗体阳性率为62．4％－100．0％，GMT在11．67－275．49之间。提示，除A3／浙防／10／98毒株抗原性类似于A3／汉防/359/95外，其余甲3亚型毒株的抗原性均类似于A3／沪防／1／98病毒。B型毒株抗原性属于巴拿马类病毒。结论 杭州市区人群对甲3亚型和B型巴拿马类毒株普遍具有HI抗体免疫力。     

浙江省2004-2007年HIV-1亚型CRF01_AE流行毒株的基因型耐药分析

目的 了解浙江省HIV-1主要流行毒株CRF01_AE在治疗人群和未治疗人群中的基因型耐药变异情况.方法 选取2004-2007年间收集的HIV感染者样本,对HIV蛋白酶(PR)全长和部分反转录酶(RT)基因区进行RT-PCR扩增测序.分析56个感染CRF01_AE重组亚型样本的序列,其中未治疗组43例,已治疗组13例.使用Stanford HIV Drug Resistance Database(http://hivdb.stanford.edu)的在线耐药序列分析软件HIV DB进行序列分析,寻找耐药相关突变位点.结果 未治疗组CD4+T淋巴细胞中位数为229个/mm3,病毒载量log10.中位数为3.41,存在基因型耐药突变率的发生(5/43,11.6%),检出包括PR区第10、46、71位和RT区的第103、118位氨基酸的耐药相关突变;治疗组CD4+T淋巴细胞中位数为186个/mm3,病毒载量log10中位数为3.91,13例中有8例发生了基因型耐药变异(61.5%).检出29个基因型耐药突变.耐药率较高且多表现为交叉耐药.结论 浙江省未治疗的HIV感染者存在一定程度的基因型耐药突变;已开始治疗的HIV感染者基因型耐药突变发生率较高,而且交叉耐药现象广泛存在.     

2002年浙江省HIV检测筛查实验室质量考核结果分析

省疾病预防控制中心艾滋病确认实验室受省卫生厅委托 ,于 2 0 0 2年 11月 2 0～ 2 9日对省内已通过省卫生厅评审的HIV筛查实验室进行一次艾滋病检测工作的室间质量考核工作 ,现将考核结果报告如下。对象与方法1　对象　全省 11个地级市和 4 2个县市区的 96家省市县三级医疗卫生单位参加质量评估。其中卫生防疫站 (疾控中心 ) 4 1家 ,采供血机构 2 7家 ,检疫局 5家 ,人民医院(包括输血科和血库 ) 14家和皮防所 5家 ,2家戒毒研究中心 ,妇幼系统 2家。这些单位均经过省级卫生行政部门的正式评审 ,获得开展HIV抗体筛查资格 ,另有 1家单位由于…     

浙江省HIV-I流行毒株GAG基因序列测定和亚型分析

〔目的〕利用分子生物学方法了解浙江省境内HIV -I流行毒株的亚型。〔方法〕采集 14份浙江省检出的HIV -I抗体阳性者的抗凝全血 ,从中提取前病毒DNA作为PCR扩增的模板 ,设计特异性引物对gag基因区进行扩增并测定其序列。所得序列与国际标准或参考序列进行比较 ,确定亚型。〔结果〕14份样本中有 9份扩增阳性并得到相应序列 ,扩增率为 6 4 .3%。经过离散率计算和系统树分析后证实 4份样本为A/E流行重组模式 ,3份样本为B亚型 ,1份样本为B/C流行重组模式 ,1份样本为G亚型。〔结论〕目前浙江省境内有多种亚型的HIV -I毒株存在。迫切需要对高危人群进行宣传教育和行为干预措施以阻断HIV/AIDS的流行和传播。     

浙江省HIV/AIDS未治疗人群耐药基因特征研究

目的：横断面了解浙江省未治疗人群耐药基因变异情况,补充耐药监测本底数据。方法：选取2004-2006年期间在各市县接受流行病学调查的104例未治疗HIV/AIDS感染者,对病毒载量高于最低检测限的99个样本进行HIV蛋白酶（PR）全长和部分逆转录酶（RT）基因区进行RT-PCR扩增测序。使用Stanford HIV Drug Resistance Database（ht-tp：//hivdb.stanford.edu）的在线耐药序列分析软件HIV DB进行序列分析,寻找耐药相关突变位点,并做出样本对各药物敏感性的结论。结果：扩增得到74份PI区序列,1份样本存在蛋白酶抑制剂（PIs）主要相关突变,耐药突变率为1.35%;得到83份RT区序列,4份样本存在逆转录酶抑制剂（RTIs）相关突变,耐药突变率为4.8%。总耐药突变率为6.02%（5/83）。结论：浙江省未治疗HIV感染者中耐药相关突变处于低流行状态。但具体感染者体内存在的PR和RT区主要耐药突变位点,会导致对抗病毒治疗药物不同程度的耐药,应该争取条件对治疗前病人进行基因型耐药检测。     

浙江地区健康青少年和成人外周血T淋巴细胞免疫表型调查及正常参考值范围的建立

目的通过对健康青少年和成人外周血T淋巴细胞免疫表型分布调查，建立健康人外周血T淋巴细胞免疫表型正常参考值范围。方法选择浙江地区义务献血和健康体检者385例，血样用Multi TEST四色特异性T淋巴细胞亚群荧光抗体进行荧光标记，FACS Callibur流式细胞仪检测样品，Mulfiset程序获取数据并分析结果，SPSS 12．0软件包进行统计分析。以百分位数法，采用95％可信区间确定正常参考值范围。结果男性和女性的CD3^＋的百分率和CD3^＋CD4^＋百分率和绝对数均有差异，表现为女性高于男性。而CD3^＋绝对数和CD3^＋CD8^＋百分率和绝对数没有性别差异。T淋巴细胞免疫表型各个指标在不同年龄组之间均有差异，表现CD3^＋CD8^＋（相对数和绝对值）随年龄组增大而逐渐下降趋势，而CD3^＋CD4^＋（相对数和绝对值）则随年龄组增大而逐渐增加。浙江省健康人T淋巴细胞免疫表型参考值范围：CD3^＋百分数（％）：47．98～82．60；CD3^＋绝对数（个／μl）：712．49～2367．55；CD8^＋百分率（％）：14．24～41．48；CD8^＋绝对数（个／μl）：219．14～1109．81；CD4^＋百分率（％）：24．15～51．66；CD4^＋绝对数（个／μl）：383．61～1345．60；CD4／CD8：0．70～3．25。结论健康人淋巴细胞免疫表型的分布存在性别和年龄差别。由于这种差别细微，可以在同一种族同一区域建立统一的正常参考值范围。     

浙江省2002～2005艾滋病职业暴露分析

目的 为了解艾滋病(HIV)职业暴露现状,探讨职业暴露后应急预防处理的影响因素.方法 对浙江省2002～2005报告的由于职业因素引起的HIV暴露案例进行调查并统计分析.结果 44起56人包括医务人员,公安司法职业暴露,暴露类型包括针头刺伤,抓咬伤和血液接触皮肤或粘膜,50人实施暴露后预防(PEP),有43人采用基本用药程序进行干预治疗,占76.8%(43/56);有7人采用强化用药程序;有6人自愿不实施PEP.目前所有病例随访未发现HIV抗体阳转者,有一例发生丙肝病毒(HCV)抗体阳转.结论 HIV职业暴露后感染的危险度较低,但是要注意加强对其他各类血液传播疾病的阻断防护.     

婴幼儿急性腹泻患者轮状病毒抗原及核酸检测

轮状病毒是引起婴幼儿急性腹泻的重要病原,在世界范围内广泛流行,在发达国家和发展中国家均有较高的发病率,但病死率后者明显高于前者。为了解本地区由轮状病毒引起的婴幼儿急性腹泻情况,我们于１９９７、１９９８年秋冬季节在浙江省儿童保健医院采集粪便标本进行轮状病毒抗原及核酸检测,现将结果报告如下。 材料和方法 １．粪便标本来源： １９９７、 １９９８年秋冬季（ １１～１２月份）,在浙江省儿童保健医院门诊部采集婴幼儿急性腹泻患者的粪便标本１０４份,置洁净的容器内,带冰运送到实验室,置－７０℃低温冰箱保存备检。 ２…     

丹参注射液联合甲基泼尼松龙治疗重症肺炎支原体肺炎临床研究

目的:观察丹参注射液联合甲基泼尼松龙治疗重症肺炎支原体肺炎的疗效及安全性。方法:将60例重症肺炎支原体肺炎患者按随机数字表法分为2组各30例。对照组给予阿奇霉素、甲基泼尼松龙治疗;观察组在对照组基础上加用丹参注射液,序贯治疗,2组治疗时间均为2个疗程;评价2组患者的退热时间、咳嗽好转时间、啰音明显好转时间、肺部X线改变好转时间与住院时间等临床症状改善情况,测定2组患者治疗前后血清降钙素原(PCT)与C-反应蛋白(CRP)水平;观察并统计疗程内不良反应发生情况。结果:总有效率观察组为86.67%,对照组为66.67%,2组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。观察组退热时间、咳嗽好转时间、啰音明显好转时间、肺部X线改变好转时间与住院时间低于对照组,2组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。2组患者治疗前PCT与CRP水平比较,差异无统计学意义(P 0.05)。治疗后,2组PCT与CRP水平较前改善(P 0.05)。2组治疗后PCT与CRP水平比较,差异有统计学意义(P 0.05)。治疗过程中,2组患者均未出现与用药相关的不良反应情况。结论:甲基泼尼松龙联合丹参注射液治疗重症肺炎支原体肺炎患者,疗效显著,且安全性较好。