中药炮制学实验教学存在的问题及改革思路

实验教学是中药炮制教学的重要组成部分,是学生掌握中药炮制的基本技能、方法、炮制工艺的重要途径,是培养中药炮制人才的重要实践性环节。本文在分析中药炮制实验教学现行教学模式和内容基础上,对其存在的问题及改革思路进行探讨,以期提高中药炮制实验课教学质量,提升中药专业学生的综合实验能力。     

蒙古黄芪和膜荚黄芪水溶性蛋白表达

目的:蒙古黄芪和膜荚黄芪都为药用黄芪,二者亲缘关系近,成分相似,药用价值尚未区分。该研究旨在建立蒙古黄芪和膜荚黄芪的水溶性蛋白表达谱,了解两种黄芪之间存在的差别。方法:样品采用水超声提取和丙酮沉淀的方法得到黄芪水溶性蛋白成分,质谱级胰酶酶解后的肽段经nano ESI-LC-MS/MS分析,采用Proteome Discoverer 1. 4软件比对豆科蛋白数据库鉴定蛋白,再使用非标记定量软件SIEVE分析蒙古黄芪与膜荚黄芪水溶性蛋白质表达的差异。最后运用生物信息学方法分析2种黄芪共有蛋白的分类、分子功能、参与的生物过程和信号通路。结果:蒙古黄芪鉴定特异性蛋白有920个,膜荚黄芪鉴定的特异性蛋白有717个,2种黄芪中共同表达的蛋白有472个,其中二者的差异表达蛋白有21个,如PR-10蛋白,NDK-1蛋白,谷蛋白A2,磷脂酶D等蛋白在两种黄芪中差异表达。蒙古黄芪高表达蛋白14个,膜荚黄芪高表达蛋白7个。结论:蒙古黄芪和膜荚黄芪的水溶性蛋白表达谱存在显著差异,特异性蛋白、差异表达蛋白和共同表达的蛋白可为今后两种黄芪的鉴别、药理作用机制的研究和寻找作用靶点提供参考。     

内外源性β-葡萄糖醛酸酶与原发性胆总管结石的关系

目的 探讨内外源性β-葡萄糖醛酸酶(β-G)与原发性胆总管结石的关系.方法 应用改良Fishman法检测35例原发性胆总管结石患者(试验组)和11例胆囊息肉患者(对照组)胆总管内胆汁中内外源性β-G活性.结果 试验组和对照组手术当天胆汁中内源性β-G活性分别为(7859.1±738.5)、(2174.9±348.4)U/L(P＜0.01);外源性β-G活性分别为(6786.1±544.3)、(1504.7±655.7)U/L(P＜0.01);试验组中13例急性患者手术当天与术后第7天胆汁中外源性β-G活性分别为(8935.7±845.9)、(2176.1±956.7)U/L(P＜0.05);22例慢性患者分别为(5137.2±540.7)、(1838.8±733.3)U/L(P＜0.05);急性患者手术当天胆汁中外源性β-G活性明显高于慢性患者(P＜0.05).结论 内、外源性β-G参与原发性胆总管结石的形成.

Abstract：

Objective To explore the role of endogenous and exogenous β-glucuronidase( β-G) in the development of primary common duct stones.Method Using modified Fishman method to test the activities of the endogenous and exogenous β -G in 35 patients with primary common duct stones(experimental group) and 11 patients with cystic polypus (control group) respectively.Results The activities of endogenous β -G in the bile of experimental group and control group were (7859.1 ± 738.5 ),(2174.9 ± 348.4 ) U/L(P ＜0.01).While the activities of exogenous β-G in experimental group and control group were (6786.1 ±544.3),(1504.7 ±655.7) U/L (P ＜0.01).In experimental group,there were significant statistical differences in the activities of the exogenous β -G in the sample obtained on the day of operation and 7 days after operation from 13 cases with the acute inflammation [(8935.7 ± 845.9),(2176.1 ± 956.7) U/L]and from 22 cases with the chronic inflammation [(5137.2 ±540.7),(1838.8 ±733.3) U/L],and there were significant higher in the activities of the exogenous β -G in the sample obtained on the day of operation from the acute inflammation compared to those from the chronic inflammation (P ＜ 0.05 ).Conclusions There is obvious correlation between either endogenous or exogenous β -G with primary common duct stones.And the endogenous β -G might be one of the fundamental cause in the development of primary common duct stones. c inflammation (P ＜     

柱前衍生化-HPLC法测定患者体内丙戊酸钠的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠血药浓度。方法血清用环己烷提取,以环已烷羧酸为内标,2-溴苯乙酮为衍生化试剂,用高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度。采用Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(82∶18);检测波长为248 nm;流速为1.0 ml.min-1;柱温:30℃。结果血清中丙戊酸钠线性范围为12.5～150mg.L-1,平均回收率98.74%,日内RSD<5%。结论该法快速、灵敏、准确,适用于临床常规监测需要。     

调节自噬提高人肝癌Bel-7402/FU细胞株对5-氟尿嘧啶的敏感性

目的：探讨细胞自噬对肝癌Bel-7402／FU细胞5-氟尿嘧啶敏感性的影响。方法：选取Bel-7402、Bel-7402／FU细胞株,分为对照组、5-氟尿嘧啶组、自噬抑制剂3-甲基腺苷组以及5-氟尿嘧啶＋3-甲基腺苷组,MTT法了解抑制细胞自噬对肝癌5-氟尿嘧啶IC50值的影响;流式细胞术检测抑制细胞自噬对细胞凋亡的影响;GFP-LC3质粒转染观察细胞浆中GFP-LC3分布情况。结果：Bel-7402细胞株与Bel-7402／FU细胞株5-氟尿嘧啶IC50值分别为4．66、68．14μg／mL,凋亡率分别为13．809／6、1.09％。3-甲基腺苷联合5-氟尿嘧啶作用后Bel-7402细胞株与Bel-7402／FU细胞株的氟尿嘧啶IC50值分别为4．31、29．44μg／mL,凋亡率分别为13．82％、6．86％。在3-甲基腺苷作用下,Bel-7402／5-FU细胞株5-氟尿嘧啶诱导的点状样GFP-LC3的细胞数量减少。结论：抑制细胞自噬可降低Bel-7402／FU对5-氟尿嘧啶IC50值,诱导细胞凋亡,从而有效地逆转Bel-7402／FU对5-氟尿嘧啶耐药。     

“五常法”在门诊药房规范化管理中的应用

目的探讨门诊药房应用＂五常法＂对提高药品管理质量,提升药学服务的作用。方法运用＂五常法＂对工作环境,药品摆放、储存及使用等工作流程进行管理,并定期进行检查、评估与更新。结果药房工作环境及病人取药环境得到明显改善,药品调配差错率明显下降,药品管理质量及患者取药满意度、服药依从性均得到提高,同时也提升了药学人员的工作效率及药学服务能力。结论 ＂五常法＂是药房质量精细化、科学化管理的有效方法,易实施,见效快,值得推广。     

RP-HPLC法测定三七总皂苷注射液中9种皂苷的含量

目的建立同时测定三七总皂苷注射液中多种皂苷成分的RP-HPLC法.方法 Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm);乙腈-水梯度洗脱,乙腈:0～30 min,18%→19%;30～35 min,19%→35%;35～60 min,35%→55%.流速1.5 ml·min-1;检测波长203 nm;柱温为40 ℃.结果三七皂苷R1,人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2 Rb3和Rd的线性范围分别为0.24～4.75 μg(r=0.999 9),0.57～11.40 μg(r=1.000 0),0.50～9.90 μg(r=1.000 0),0.24～4.80 μg(r=1.000 0),0.54～10.65 μg(r=1.000 0),0.26～5.10 μg(r=1.000 0),0.25～4.90μg(r=1.000 0),0.32～6.30 μg(r=1.0000);平均回收率为99.3%～100.2%.结论 RP-HPLC法可同时测定三七总皂苷注射液中9种皂苷含量,有利于其质量控制.     

浅谈超临界流体技术在药物研究中的应用

本文主要综述超临界流体技术在药物研究中的应用,包括超临界流体用于中药和天然产物活性成分的萃取,微粉的制备和手性药物的分离.