转录调控因子在中药次生代谢调控中的研究进展

许多中药的有效成分为植物次生代谢产物,具有重要的药用价值。但次生代谢的产物的量往往很低。转录调控因子可调控多个参与代谢途径基因的表达。采用基因工程的方法调控转录因子,往往可导致植物中该转录因子所控制性状的较大改变,从而提高中药中有效成分的量,具有广阔的应用前景。     

381 利用基因工程生产植物次生代谢产物

植物次生代谢产物对于控制和影响植物性状起着十分重要的作用。也为人类提供了所需的药物。染料，香料等众多的化合物，综述了植物次生代谢途径的研究，相关基因的克隆以及次生代谢的基因工程。     

381 利用基因工程生产植物次生代谢产物

植物次生代谢产物对于控制和影响植物性状起着十分重要的作用，也为人类提供了所需的药物、染料、香料等众多的化合物。综述了植物次生代谢途径的研究、相关基因的克隆以及次生代谢的基因工程。     

药用植物商陆毛状根培养系统的建立

目的:建立药用植物商陆(Phytolacca acinosa Roxb.)的毛状根离体培养系统.方法:分别用发根农杆菌A4、R1600、C58C1 3个菌株感染商陆的子叶外植体,获得毛状根,并筛选了优质株系;考察了影响毛状根生长的因素;测定了毛状根的生长曲线;利用PCR和高压纸电泳法对毛状根进行tDNA转化的检测.结果:利用发根农杆菌A4、R1600、C58C1 3种菌株成功地从商陆中诱导出毛状根;以水解酪蛋白为氮源、以麦芽糖为碳源最有利于商陆毛状根的生长;毛状根的生长曲线呈"S"形,24 d时质量达到最大(增长18倍);PCR及高压纸电泳检测结果表明Ri质粒的tDNA已整合进毛状根中.结论:成功建立了商陆毛状根离体培养系统,为进一步进行药用成分的工业化生产和引入外源基因改良性状奠定了基础.     

中药指纹图谱与灵芝质量标准研究方法

中药指纹图谱是中药现代化关键问题之一。根据国内外中草药指纹图谱研究进展,概述了指纹图谱建立中各项技术及应用,讨论了建立灵芝指纹图谱的一般策略和方法,指出建立指纹图谱过程中应该注意的问题,阐明了各项技术在灵芝指纹图谱的研究中的应用现状,并对前景进行了分析。分析了建立灵芝指纹图谱的基本思路,为其建立质量控制标准奠定了基础。     

重组人胰岛素类似物蛋白在大肠杆菌中克隆、表达与纯化

目的:设计合成编码Des30、B26 H、B28D和B26 H-B28D基因,用大肠杆菌BL21(DE3)表达上述4种速效人胰岛素原蛋白,为探知B26 H-B28D功能和用植物系统表达速效胰岛素原类似物研究做必要的准备。方法:基于人胰岛素氨基酸和小C肽(TYPGDVPK)序列,按植物(油菜)偏爱密码子设计合成了198 bp编码人速效胰岛素原基因Des30。随后以Des30为模板,用PCR突变技术扩增并创造了基因B26 H、B28D和B26 H-B28D,并构建了4个原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导、用Ni-NTA亲和柱纯化、复性、胰岛素体外成熟(酶解)获得重组人胰岛素突变体蛋白。结果:4种人速效胰岛素原类似物在宿主菌中均以包涵体形式存在,IPTG诱导时间以8 h为佳。Western blot结果表明,带his-tag的速效人胰岛素原蛋白已成功在宿主菌中表达,用Ni-NTA亲和柱纯化获得了较纯的速效人胰岛素原蛋白。纯化的包涵体蛋白通过低温透析复性,然后用胰蛋白酶和羧肽酶B酶切,Western blot结果显示,释放出的单体胰岛素与阳性对照一样具有免疫活性,RP-HPLC和MALDI-TOF质谱检测表明,酶切产物分子量峰值分别与预测的人胰岛素类似物分子量一致。结论:该研究为B26 H-B28D功能研究和用植物系统表达人类胰岛素的研究奠定基础。     

转录调控因子在中药次生代谢调控中的研究进展

许多中药的有效成分为植物次生代谢产物,具有重要的药用价值。但次生代谢的产物的量往往很低。转录调控因子可调控多个参与代谢途径基因的表达。采用基因工程的方法调控转录因子,往往可导致植物中该转录因子所控制性状的较大改变,从而提高中药中有效成分的量,具有广阔的应用前景。     

长春花中长春质碱含量与农艺性状的分析

目的:对国内外长春花主栽品种的长春质碱含量和农艺性状进行了分析.方法:记录长春花盛花期的农艺性状,反相高效认相色谱仪测定长春质碱含量.结果:发现不同品种的长春质碱含量和农艺性状均存在很大差异,太平洋系列(Pacifica)品种Polka Dot(PPD)中长春质碱质量分数最高,达到叶片干重的3.79 mg·g~(-1);清凉系列(cooler)品种Pink(CP)中长春质碱质量分数最低,仅为叶片干重的0.9 mg·g~(-1).长春花中长春质碱含量与农艺性状之间存在一定程度的相关性.通径分析表明,长春花主要农艺性状中,节间距对长春质碱含量的正影响达到了显著水平(P<0.05),通径系数为1.473.结论:本研究对高含量长春质碱长春花引种和育种具有参考价值.     

中药指纹图谱与灵芝质量标准研究方法

中药指纹图谱是中药现代化关键问题之一。根据国内外中草药指纹图谱研究进展,概述了指纹图谱建立中各项技术及应用,讨论了建立灵芝指纹图谱的一般策略和方法,指出建立指纹图谱过程中应该注意的问题,阐明了各项技术在灵芝指纹图谱的研究中的应用现状,并对前景进行了分析。分析了建立灵芝指纹图谱的基本思路,为其建立质量控制标准奠定了基础。     

四倍体菘蓝转抗虫基因研究Ⅱ.转半夏凝集素基因菘蓝的分子生物学检测

目的 获得转基因菘蓝的分子生物学证据。方法 对经卡那霉素筛选的抗性再生菘蓝苗进行聚合酶链式反应(PCR)，Southern杂交和RT—PCR检测。结果 PCR和Southern杂交检测结果表明，外源半夏凝集素基因已经整合到转基因菘蓝的基因组中，RT—PCR结果表明其DNA可以正常转录成mRNA。结论 可以利用农杆菌介导的基因转化技术培育抗虫的菘蓝新品系。