大鼠骨髓间充质干细胞培养鉴定及复方扶芳藤合剂含药血清对细胞增殖的影响

目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法,观察不同浓度的复方扶芳藤合剂大鼠含药血清对大鼠BMSCs增殖的影响。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化BMSCs,对其进行细胞形态学观察,将BMSCs进行成骨、成脂定向诱导分化,采用流式细胞仪检测其表面标志物,分析其细胞周期,进行BMSCs鉴定;采用不同浓度(20%、10%和5%)的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续7 d对大鼠BM SCs进行干预,以CCK-8法检测其吸光度值,对比各组细胞生长情况。结果:BMSCs具有典型的成纤维样细胞形态,集落生长呈漩涡状。BMSCs成脂、成骨诱导后,油红O染色和茜素红染色均呈阳性。第3代BMSCs表型CD29、CD44、CD34、CD44表达分别为99.645%、99.677%、0.016%、0.133%;不同浓度的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续干预7 d后,CCK-8法检测显示:20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清组,其1~7 d的吸光度均值均高于20%浓度的空白血清组(P<0.05);10%的含药血清组的吸光度均值在3~7 d,高于10%的空白血清组(P<0.05);5%的含药血清组与5%的空白血清组比较无明显差异(P>0.05)。结论:全骨髓贴壁法分离、培养BM SCs,操作简单,方法稳定,可大量扩增BMSCs。扩增后的BMSCs具有间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。复方扶芳藤合剂含药血清干预后的BMSCs增殖能力增强,其中20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清在本实验中为最佳干预浓度。     

ILC2及Tfh的活性与肺腺癌免疫抑制状态的相关性研究

为探讨ILC2和滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh）是否协同促进并维持肺腺癌免疫抑制状态,选择肺腺癌患者为研究对象,采用FACS检测患者外周血中ILC2和Tfh的比例;qRT-PCR检测外周血ILC2及Tfh相关因子的表达水平,并对ILC2及Tfh进行相关性分析。结果显示,与对照组比较,肺腺癌患者外周血中ILC2的比例及其相关因子IL-33、IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）、IL-13、IL-5及IL-4 mRNA的表达水平均升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXC趋化因子受体5（CXC chemokine receptor 5, CXCR5）⁺T细胞及PD-1⁺CXCR5⁺Tfh的比例升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXCR5^-T细胞的比例下调（P<0.01）,Tfh相关...     

志贺菌福氏5a M90T热休克蛋白70(DnaK)多克隆抗体的制备和鉴定

目的制备小鼠抗志贺菌福氏5a M90T热休克蛋白70(Dna K)的多克隆抗体,并鉴定其特异性和效价。方法 PCR扩增M90T中的基因dna K插入到原核表达载体p ET-24a中,获得p ET24a-dna K重组质粒,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过亲和柱纯化融合蛋白Dna K-His。将纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,采集抗血清。用免疫印迹法、ELISA和免疫荧光技术鉴定抗血清的特异性和效价。结果重组质粒p ET24a-dna K在大肠杆菌BL21(DE3)中可以高效表达。用纯化的融合蛋白Dna K-His免疫小鼠制备得到的多克隆抗体能特异性低检测志贺菌福氏5a M90T Dna K蛋白,能有效地用于免疫印迹法、ELISA和免疫荧光等试验。结论成功制备了抗志贺菌福氏5a M90T Dna K蛋白的小鼠多克隆抗体。     

周围血管科常见疾病证候诊治指南(2015)

通过总结、整理古今医家及临床实践经验进行编写,遵循继承性、科学性、严谨性、实践性原则,编写《周围血管科常见疾病证候诊治指南(2015)》,预期达到对临床上常见的周围血管疾病建立和完善证候诊治的作用。     

干细胞治疗卵巢早衰的实验研究进展

卵巢早衰(Premature ovarian failure,POF)是指女性在40岁之前,除妊娠外,闭经4个月或以上,卵泡期血液检查不少于2次(间隔不少于30 d)显示血清卵泡刺激素(FSH)＞40 U/L、雌二醇(E2)＜73.2 pmol/L.POF在40岁之前的发病率为1/100,30岁之前为1/1 000,20岁之前为1/10 000,且发病率呈逐年上升的趋势.POF在临床上并不少见,其中在原发闭经者中占10％ ～ 28％,继发闭经者中占4％ ～18%[1].     

肝脓肿介入治疗辽宁专家共识（2022）

【摘要】 介入联合抗生素已成为肝脓肿的主要治疗手段，但临床工作中仍存在诸多治疗难点且缺乏治疗规范。本共识对肝脓肿介入治疗的适应证及禁忌证、介入治疗操作细节、并发症防治和特殊情况下介入治疗策略进行归纳和说明，并阐述肝脓肿形成原因、危险因素、抗生素选择和预防措施等，旨在为广大临床工作者提供肝脓肿介入治疗的有益指导。     

三级康复治疗对脑卒中偏瘫患者功能改变的影响

目的探讨三级康复治疗对脑卒中后肢体运动功能的影响。方法将180例患者随机分为康复组和对照组,康复组采用系统的规范的三级康复治疗,对照组除常规治疗外无其他干预。随访6个月,比较各时段运动评分。结果刚人组时,两组患者的运动功能评分比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。1、3、6个月后,脑梗死康复组运动功能得分、脑出血康复组运动功能得分、总康复组的运动功能得分均明显优于相应的对照组（P〈0．05）。各组患者入组后的1、3、6个月,运动功能评分均明显优于入组时的运动功能评分（P〈0．05）。结论三级康复治疗对改善脑卒中患者的运动功能有明显作用。     

福氏志贺菌5a型M90T株GAPDH蛋白多克隆抗体的制备和鉴定

目的制备高效的福氏志贺菌5a M90T3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的多克隆抗体,并对其特异性进行评价。方法提取M90T的全基因组,采用PCR法扩增M90T中的基因gapA克隆到原核表达载体pET-24中,重组质粒转入到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,条件优化后纯化GAPDH-His融合蛋白。以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备该蛋白的多克隆抗体。Western blot法、ELISA鉴定获得的抗血清。结果成功构建了原核表达载体pET24a-gapA,通过一系列诱导条件的优化,确定可溶性条件为30℃、1 mmol/L IPTG诱导2 h。用纯化的融合蛋白GAPDH-His作为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,Western blot法、ELISA证明多克隆抗体制备成功。结论成功制备了福氏志贺菌5a M90T特异性的小鼠多克隆抗体。     

基于表面肌电信号的腕手功能评定与重建研究

目的通过表面肌电信号特征的提取和分析,建立基于表面肌电信号的脑卒中患者腕手运动功能评定新方法;并以此为基础,通过客观评价中枢神经损伤后上肢及腕手的运动功能,开展不同方案低频电刺激方法促进瘫痪腕手运动重建的疗效评价和相关研究。方法选择Fugl-Meyer上肢腕手评分≥7分的脑梗死、脑出血患者36例,随机分为3组。治疗组A(常规康复+低频电刺激伸肌),治疗组B(常规康复+低频电刺激屈伸肌)和对照组(常规康复),采集患者上肢肘和手腕部活动时主动肌、协同肌、拮抗肌的表面肌电信号(sEMG),提取特征值最大振幅(MAX)、所得肌电信号经整流滤波后单位时间内曲线下面积的总和(AE-MG)。结果治疗后两组患者的腕手功能均有恢复;对照组总有效率为52.47%但治疗组手腕部MAX、AE-MG、Fugl-Meyer运动功能分值、ADL值提高较明显(P<0.05),且治疗组B的疗效(总有效率72.54%)大于治疗组A(总有效率60.76%)。结论sEMG信号检测是一种客观、灵敏且精确的运动评定方法,低频电刺激对脑卒中患者恢复肢体运动功能具有一定促进作用。