重组人表皮生长因子凝胶联合CO2点阵激光治疗增生性瘢痕的效果观察

目的观察重组人表皮生长因子凝胶联合CO₂点阵激光治疗烧伤及创伤后增生性瘢痕的临床效果。 方法选择2020年12月至2021年10月安徽医科大学第一附属医院烧伤与创面修复外科收治的20例增生性瘢痕患者，按照随机数字表法将患者分为联合治疗组及单纯激光治疗组，每组10例。术前均对2组患者术区进行拍照存像、消毒、擦干，局部均匀涂抹5%复方利多卡因乳膏后以无菌薄膜封闭保护60 min，擦去乳膏后再次消毒术区。术中使用CO₂点阵激光治疗仪对患者瘢痕部位进行扫描，根据患者增生性瘢痕厚度选定合适的机器参数，维持机器频率300 Hz及密度5%，在20～30 J调整能量参数的大小，时间间隔1 s，保证点阵矩形完全覆盖增生瘢痕，允许2次激光形成的热损伤矩阵之间存在25%面积的重叠。术后即刻冷敷创面60 min，冷敷结束至术后1周，单纯激光治疗组不外用任何药物，联合治疗组术区加用重组人表皮生长因子凝胶外用，3次/d。术后3 d治疗部位不碰水，若出现感染情况，可以加用抗生素软膏，点状损伤创面外痂皮未掉落完全时禁止擦洗创面，禁止直接剥除痂皮，禁止术区涂抹化妆品等，避免接受阳光直射。于第1次激光治疗后2个月进行第2次激光治疗，以2次CO₂点阵激光治疗为1个疗程，1个疗程治疗后间隔2个月待术区稳定后行疗效判断，计算2组患者治疗的总有效率；根据温哥华瘢痕量表(VSS)与患者与观察者瘢痕评估量表(POSAS)对患者治疗前、第1次激光治疗后2个月、第2次激光治疗后2个月瘢痕的各项指标进行评分。数据比较采用重复测量方差分析和χ²检验。 结果(1)治疗1个疗程后2个月，单纯激光治疗组与联合治疗组患者治疗的总有效率分别为80%(8/10)、90%(9/10)，2组间比较差异无统计学意义(χ²＝2.40，P＝0.49)。(2)对2组VSS评分的各项指标进行比较，其中疼痛、瘙痒、柔软度及厚度评分的组内及组间各时相点比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗前、第1次激光治疗后2个月及第2次激光治疗后2个月，单纯激光治疗组VSS评分中色泽评分分别为(1.9±0.7)、(1.9±0.1)、(1.8±1.0)分，联合治疗组分别为(2.9±0.7)、(2.8±0.6)、(1.9±0.7)分，2组在不同时相点组内比较，差异有统计学意义(F＝ 26.143，P<0.05)；2组组间不同时相点比较，差异有统计学意义(F＝6.753，P＝0.018)。治疗前、第1次激光治疗后2个月及第2次激光治疗后2个月，单纯激光治疗组VSS评分中血管分布评分分别为(1.8±1.0)、(1.7±0.7)、(1.5±1.0)分，联合治疗组分别为(2.6±0.5)、(2.5±0.5)、(1.7±0.8)分，2组在不同时相点组内比较，差异有统计学意义(F＝17.603，P<0.05)，2组组间不同时相点比较，差异无统计学意义(F＝ 2.538，P＝0.129)。(3)对2组POSAS评分的各项指标进行比较，其中厚度、粗糙度、柔软度和表面积评分的组内及组间各时相点比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗前、第1次激光治疗后2个月及第2次激光治疗后2个月，单纯激光治疗组POSAS评分中色泽评分分别为(4.9±2.6)、(4.1±0.8)、(3.5±2.0)分，联合治疗组分别为(7.6±1.1)、(6.8±1.4)、(5.4±1.8)分，2组在不同时相点组内比较，差异有统计学意义(F＝ 26.509，P<0.05)，2组组间不同时相点比较，差异有统计学意义(F＝ 8.973，P＝0.008)。治疗前、第1次激光治疗后2个月及第2次激光治疗后2个月，单纯激光治疗组POSAS评分中血管分布评分分别为(4.4±2.1)、(3.9±0.9)、(3.5±1.6)分，联合治疗组分别为(6.3±1.1)、(5.7±2.0)、(4.5±1.6)分，2组在不同时相点组内比较，差异有统计学意义(F＝ 20.118，P<0.05)，2组组间不同时相点比较，差异有统计学意义(F＝ 5.744，P＝0.028)。 结论重组人表皮生长因子凝胶联合CO₂点阵激光及单独使用CO₂点阵激光治疗增生性瘢痕均效果明确，但联合使用重组人表皮生长因子凝胶能有效促进创面愈合、改善瘢痕组织血管分布和减少局部色素沉着。     

百合总皂苷经VEGF/Akt信号通路调节人前列腺癌LNCaP细胞增殖及侵袭的机制研究

摘要：目的:探讨百合总皂苷经血管内皮生长因子（VEGF）/蛋白激酶B（Akt）信号通路调节人前列腺癌LNCaP细胞增殖及侵袭的机制。方法:体外培养人前列腺癌LNCaP细胞,阴性对照组不进行处理,阳性对照组给予浓度为1.6μg·L-1的顺铂,百合总皂苷高、中、低剂量组分别给予浓度为200,100,50 mg·L-1的百合总皂苷后继续培养48 h,检测细胞增殖、凋亡及侵袭情况,同时检测VEGF受体2（VEGFR2）、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（caspase-3）蛋白表达水平。结果:各组LNCaP细胞Akt蛋白变化不显著（P>0.05）;与阴性对照组比较,阳性对照组LNCaP细胞增殖率、侵袭数、VEGFR2、p-Akt和Bcl-2蛋白表达降低（P<0.05）,凋亡率、Bax和caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）;给予百合总皂苷干预后,LNCaP细胞增殖率、侵袭数、VEGFR2、p-Akt和Bcl-2蛋白表达均较阴性对照组降低（P<0.05）,凋亡率、Bax和caspase-3蛋白表达均较阴性对照组升高（P<0.05）,且具有浓度依赖性（P<0.05）,但效果不如阳性对照组（P<0.05）。结论:百合总皂苷通过抑制VEGF/Akt信号通路,抑制人前列腺癌LNCaP细胞增殖和侵袭,可能是前列腺癌治疗的一种新选择。     

葛根素对烫伤大鼠心肌损害的保护作用

目的探讨葛根素对烫伤大鼠心肌损害的保护作用及机制.方法采用制作30% TBSA Ⅲ度烫伤大鼠模型,随机分为复苏组(40只),治疗组(40只),另取8只作为伤前对照.于烫伤后1、3、6、12、24 h各取静脉血,测心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,另取大鼠心脏作形态学检查.结果复苏组及治疗组cTnT及TNF-α的含量高于对照组,治疗组低于复苏组(P<0.05).电镜显示,伤后24 h,治疗组心肌组织损伤程度较复苏组减轻.结论葛根素对大鼠烧伤后心肌损害有一定的保护作用.     

制备脱细胞真皮基质的实验研究

目的 采用高渗盐一胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质(Acellular dermal matrix,ADM)并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机制。方法 SD大鼠4只,分别麻醉后以8％硫化钠溶液脱去躯干部皮毛,常规消毒铺巾,切取大鼠背部全层皮肤制成厚约0.4mm的中厚皮,1mol／LNaCl溶液37℃浸泡48h分离表真皮,以0．25％胰蛋白酶 0.1％乙二酸二乙胺(EDTA)溶液37℃分别热消化60、70、80、90min脱去细胞成分,并进行冷冻干燥处理。ADM作光镜、电镜观察和微生物学检测并比较分析每只大鼠不同时间消化处理的ADM的差别和不同大鼠经相同处理得到的ADM的差别。结果消化时间不同的ADM均具有柔软、一定的柔韧性和伸展性、弹性好、弯曲不断裂的特点,组织学观察见表皮细胞均完全去除,但是消化90min,ADM的基底膜(Basement membrane complex,BMC)和胶原纤维的结构与排列有不同程度的破坏;消化60、70min的ADM虽然基底膜和胶原纤维的结构与排列正常存在,但脱细胞不完全;消化80min制备的ADM组织学检查基底膜完整连续．胶原纤维、弹力纤维结构及排列完整规则,没有细胞成分存在。不同SD大鼠经同样的处理所得的ADM一般形状和组织学没有明显差别。微生物学检测没有细菌生长。结论采用高渗盐一胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质的方法能达到既完全脱去细胞成分又使基底膜完整连续,胶原纤维和弹力纤维结构及排列正常的双重目标,ADM柔韧性好、不断裂,无细菌生长。     

能谱CT多参数成像评估胆结石成分的应用价值

目的 探究能谱CT多参数成像评估胆固醇结石和非胆固醇结石的应用价值。方法 收集125枚胆结石置入猪肝模型中行CT能谱模式扫描,并重建普通螺旋CT图像,测量所有胆结石单能量40 keV、100 keV时的CT值（HU_{40 keV}、HU_{100 keV}）、有效原子序数（Eff-Z）和普通螺旋CT值（HU_{120 kVp like}）,并计算40～100 keV区间能谱衰减斜率（K）,根据红外光谱分析结果分为胆固醇结石组56枚和非胆固醇结石组69枚。采用秩和检验比较两组各参数差异,利用多因素Logistic回归分析判断胆结石成分的独立影响参数,绘制受试者工作特征（ROC）曲线,分析评估影响效能及截断值。招募胆结石患者80例,术前行CT能谱模式扫描并重建普通螺旋CT图像,分别预测术前胆结石成分,术后取出86枚胆结石行红外光谱分析,分析各参数预测结果的准确性。结果 体外非胆固醇结石组HU_{40 keV}、HU_{100 keV}、Eff-Z、K值及HU_{120 kVp like}与胆固醇结石组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,非胆固醇结石组高于胆固醇结石组。多因素Logistic回归分析结果显示仅Eff-Z［R=12.57（95% CI：5.38,29.35）］是胆固醇和非胆固醇结石的影响因素,其ROC曲线下面积为0.962（95% CI：0.928,0.997）,对应截断值为7.27。体内验证结果显示,以术后红外光谱分析为参照,能谱CT预测胆结石成分的总准确率为91.86%（95% CI：0.831,0.967）,而普通螺旋CT预测的总准确率仅为77.9%（95% CI：0.690,0.872）,能谱CT与红外光谱分析结果具有较高的一致性（κ =0.832,P <0.05）。而普通螺旋CT值预测胆结石成分结果与红外光谱分析结果一致性一般（κ =0.561,P <0.05）。结论 能谱CT多参数成像可较准确地评估胆结石成分,尤其以Eff-Z参考价值为佳,优于普通螺旋CT扫描。     

丹参注射液辅助孟鲁司特钠治疗小儿过敏性紫癜疗效观察及对免疫功能的影响

目的:观察丹参注射液辅助孟鲁司特钠治疗小儿过敏性紫癜(HSP)的疗效及对免疫功能的影响。方法:将HSP患儿70例按随机数字表法分为观察组与对照组(各35例),2组患儿入院后均给予常规对症治疗,在此基础上,对照组给予孟鲁司特钠治疗,观察组在对照组基础上给予丹参注射液治疗,连续治疗14 d后记录2组临床疗效、症状改善情况及免疫功能指标变化。结果:观察组临床总有效率为91.43%,对照组临床总有效率为71.43%(P0.05)。观察组皮肤紫癜消失时间、腹痛消失时间、关节疼痛消失时间、呕吐消失时间及肾损害消失时间均早于对照组(P0.05)。治疗前,2组T淋巴细胞CD3+、CD3+/CD4+、CD19+表达率比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,2组CD3+、CD3+/CD4+表达率较治疗前上升,观察组CD3+、CD3+/CD4+表达率上升幅度大于对照组(P0.05);治疗后2组CD19+表达率较治疗前下降,观察组CD19+表达率低于对照组(P0.05)。结论:丹参注射液辅助孟鲁司特钠治疗小儿HSP疗效确切,可明显缓解患儿临床症状,提高患儿机体免疫力。     

应用补片治疗食管裂孔疝术后复发的临床分析

目的探讨临床应用补片治疗食管裂孔疝（HH）术后复发的因素。 方法回顾性分析2010年11月至2021年5月于上海长征医院甲乳疝外科行补片加固食管裂孔疝修补术15例患者的术后复发情况。HH复发的主观指标主要依据改良Visick评分系统,客观指标包括术后半年随访时的胃镜、上消化道钡餐、上腹部CT和高分辨食管测压和24 h pH监测。症状性复发者首先经影像学检查评估有无客观证据,存在症状反复但无明确解剖复发证据者,需经食管测压和24 h pH监测有无抗反流屏障功能的损害和病理性反流,必要时结合阻抗检查评价反流与症状的相关性。 结果15例患者复发时间距初次手术时间6~121个月,中位时间28个月。其中小HH（Ⅰ~Ⅱ型）4例,巨大HH（Ⅲ~Ⅳ型）11例。使用的3种类型补片的数量为4层SIS 5例,6层SIS 8例,复合补片2例。再发胃灼热、胃内容物反流等症状者10例,均为生物补片病例;以吞咽困难为主要表现3例（2例为复合补片）。症状与检查结果不对应者4例（26.66%）。术后上腹部CT提示HH复发2例,但无明显GERD症状反复;自述GERD症状再现,但无明确影像学HH复发证据,食管测压和pH-阻抗监测未见病理性反流2例,均有轻度焦虑。再次手术探查4例,其中合成补片1例,生物补片3例,术前评估均提示有不同程度的HH复发。切取补片所在部位活检1例（合成补片）,见显著胶原蛋白沉积和包裹的合成纤维组织。 结论应用补片治疗HH术后复发,重点分析其与解剖结构改变的相关性是决定再手术与否的关键。     

新生儿溶血病中FcγRa表现型与IgG抗体亚型的相关性

目的探索新生儿溶血病中FcγRa(CD32)与IgG抗体亚型的免疫相关性。方法采用PCR法检测样本中FcγRa的表达,常规ELISA法定量分析血清中IgG各亚型。结果患儿母亲及患儿体内H/H131的频率均显著低于对照组(P<0.05),H/R131的频率显著高于对照组(P<0.05)。患儿母亲表现为H/R131的血清中IgG1和IgG3的含量均显著高于H/H131(P<0.05)。结论新生儿溶血病中母亲H/R131的表现型与血清中IgG1和IgG3的含量有一定相关性。     

胆囊癌组织中线粒体DNA含量变化的研究

目的探讨线粒体DNA(mt DNA)含量的改变与胆囊癌的关系。方法通过实时荧光定量PCR检测30例胆囊癌组织、30例胆囊癌旁组织和30例胆囊良性病变组织标本中mt DNA的含量。结果胆囊癌组织中mt DNA的平均含量为(766±143)×10~6拷贝/L,胆囊癌旁组织中mt DNA的平均含量为(343±94)×10~6拷贝/L,胆囊良性病变组织中mt DNA的平均含量为(386±104)×10~6拷贝/L,胆囊癌组织中mt DNA平均含量分别高于胆囊癌旁组织(t=11.583,P<0.001)和胆囊良性病变组织(t=13.320,P<0.001)。胆囊癌组织中mt DNA含量的改变与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无关(P>0.05)。胆囊良性病变组织与胆囊癌旁组织中mt DNA的平均含量比较,差异无统计学意义(t=1.673,P=0.107)。结论胆囊癌发生与mtDNA含量增加可能相关,mtDNA含量的检测是胆囊癌诊断的一种方法。     

新的HLA-A等位基因A~*0290的认定

目的确认1个中国人群中的HLA新等位基因。方法使用PCR-SSP和测序为基础的分型技术,分析确认HLA-A的新等位基因与A*02010101的差异。结果先证者HLA-A位点有1个等位基因的核苷酸序列与已知的HLA等位基因均不同,该基因和A*02010101的差异在第2外显子区域的292位碱基C>G,导致74编码子CAC>GAC,编码的氨基酸由组氨酸(His)变成天冬氨酸(Asp)。结论该基因为HLA新的等位基因,2005年10月被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-A*0290。