补阳还五汤加味通过抑制炎症和纤维化改善糖尿病肾病小鼠肾脏损伤

目的 探讨补阳还五汤加味对糖尿病肾病（DKD）小鼠肾组织保护作用及核转录因子-κB（NF-κB）通路及纤维化因子的影响。方法 24只11~12周龄db/db小鼠适应性喂养1周并监测尿蛋白均阳性后随机分为模型组、补阳还五汤加味组（16.0 g·kg^-1）、厄贝沙坦组（13.5 mg·kg^-1），每组8只。11~12周龄db/m组小鼠8只作为正常组。给予相应药物治疗，其中补阳还五汤加味组及厄贝沙坦组灌胃相应药液，正常组及模型组灌胃等体积蒸馏水，每天1次，连续治疗8周后收集标本，检测小鼠血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、尿微量白蛋白（mALB）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠肾组织核转录因子-κB（NF-κB），NF-κB抑制因子α（IκBα）、磷酸化IκBα（p-IκBα）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）的蛋白表达；免疫荧光检测肾组织NF-κB表达；同时光镜观察肾脏病理形态学变化。结果 与正常组比较，模型组小鼠肾小球肥大，系膜外基质增加，基底膜增厚，囊腔变窄，间质炎性细胞浸润，部分间质明显纤维化（P<0.01）；FBG、mALB、TC、TG、BUN、SCr含量显著升高（P<0.01）；炎症因子TNF-α、IL-1β、MCP-1及纤维化相关蛋白TGF-β₁、α-SMA、FN表达显著升高（P<0.01）；同时肾组织NF-κB通路活化程度显著增强（P<0.01）。与模型组比较，补阳还五汤加味干预后，DKD小鼠肾脏病理损伤程度显著改善（P<0.01）；mALB、TC、TG含量显著下降，BUN、SCr含量显著降低（P<0.01）；TNF-α、IL-1β、MCP-1含量明显降低（P<0.05，P<0.01）；同时抑制了肾组织NF-κB通路活化及纤维化因子表达（P<0.05，P<0.01），但是对血糖水平无明显影响。结论 补阳还五汤加味可通过抑制NF-κB通路活化及纤维化因子表达，对DKD小鼠发挥抗炎和抗纤维化作用，减轻肾脏病理损伤，从而发挥肾脏保护作用。     

Notch通路在糖尿病肾病大鼠的表达及化瘀通络中药的干预作用

目的探讨Notch通路在糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的表达以及化瘀通络中药对其的干预作用。方法 60只SD雄性大鼠,随机取10只为对照组,其余大鼠给予高糖高脂饲料喂养联合ip小剂量链脲佐菌素(STZ)制备DN模型。成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组、化瘀通络中药组,厄贝沙坦组、化瘀通络中药组均ig给药,于16周末检测大鼠24 h尿蛋白定量,Real-time PCR法检测Notch1、Jagged1和Hey1 m RNA的表达,免疫组化及Western blotting法检测Notch1、Jagged1和Hey1蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量及Notch1、Jagged1、Hey1 m RNA和蛋白的表达量明显升高(P0.01)。与模型组比较,化瘀通络中药组及厄贝沙坦组大鼠24 h尿蛋白定量及Notch1、Jagged1、Hey1m RNA和蛋白的表达量降低(P0.01)。结论化瘀通络中药可以减少DN大鼠24 h尿蛋白定量,且能够抑制DN大鼠肾脏Notch通路中Notch1、Jagged1和Hey1的高表达,该作用可能是其减少蛋白尿排泄的主要途径之一。     

补阳还五汤合参芪地黄汤化裁对Ⅲ-Ⅳ期糖尿病肾病的临床疗效及肾小管损伤的保护作用

目的 观察补阳还五汤合参芪地黄汤化裁治疗气阴两虚、络脉瘀阻证糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）Ⅲ-Ⅳ期患者临床疗效及对肾小管损伤的保护作用。方法 将132例符合纳入标准的DKD患者分为对照组和中药组,各66例。对照组给予西医基础治疗并联合恩格列净片,中药组在对照组基础上联合补阳还五汤合参芪地黄汤化裁方,两组患者连续用药12周。观察两组患者临床疗效,比较两组患者治疗前后中医证候积分、糖尿病生存质量特异性量表（diabetes specific quality of life scale,DSQL）评分、糖脂代谢指标、肾功能指标、肾小管损伤指标、炎症因子的表达及不良反应的发生率。结果 中药组的总有效率（87.93%）明显高于对照组（75.00%）（P<0.05）。治疗后,两组患者的中医证候积分、DSQL评分、糖脂代谢指标、肾小管损伤指标、炎症因子的表达显著降低,血白蛋白（albumin,ALB）明显升高（P<0.05）,以中药组的中医证候积分、DSQL评分、肾小管损伤指标、炎症因子的表达降低更明显（P<0.05）。此外,与治疗前相比,治疗后对照组血尿素氮（urea nitrogen,BUN）、血肌酐（creatinine,Scr）无明显差异（P>0.05）,而中药组BUN、Scr明显降低（P<0.05）;治疗后两组比较,BUN、Scr差异有统计学意义（P<0.05）。两组不良反应发生率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 补阳还五汤合参芪地黄汤化裁治疗DKD的疗效确切,可有效地降低患者尿蛋白排泄,调节糖脂代谢紊乱,抑制炎症因子表达,改善肾脏损伤,延缓DKD进展,且安全性良好。     

加减补阳还五汤通过SIRT1途径激活自噬改善糖尿病肾病小鼠肾组织损伤

[目的] 探讨加减补阳还五汤是否通过沉默信息调节因子1（SIRT1）途径激活自噬改善糖尿病肾病（DKD）小鼠肾组织损伤。[方法] 将DKD小鼠随机分为模型组、中药组,db/m组小鼠作为正常组。给药8周后,检测小鼠血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HBA1c）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、尿微量白蛋白（mALB）水平;实时定量反转录聚合酶连锁反应（qRT-PCR）和免疫组化检测小鼠肾组织Wilms肿瘤基因1（WT1）、nephrin及podocin的表达;蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测小鼠肾组织SIRT1、人微管相关蛋白轻链3B（LC3B）、自噬相关蛋白7（Agt7）、自噬受体蛋白p62（P62）、Bcl-2同源结构域蛋白抗体（Beclin1）、B细胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）、BCL-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达;同时光镜观察肾脏病理形态学变化。[结果] 中药干预后,小鼠肾脏病理改变轻于模型组;尿微量白蛋白（mAlb）、血脂（TC、TG）下降,肾功能（BUN、Scr）改善;同时抑制了肾组织P62、Bax、Caspase-3表达,上调了SIRT1、Beclin-1、Agt7、Bcl-2、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ的表达,并改善了肾组织足细胞标志蛋白WT1、nephrin及podocin的表达（P＜0.05或P＜0.01）,但对血糖水平无明显影响（P＞0.05）。[结论] 加减补阳还五汤可通过增强DKD小鼠肾脏细胞自噬,并抑制其凋亡,保护足细胞,进而发挥肾脏保护作用。其中SIRT1途径可能是其促进自噬的潜在途径。