生地黄、山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响

目的:观察生地黄,山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响.方法:200 mmol·L-1的葡萄糖与牛血清白蛋白组成反应系统,37℃温孵,分别加入生地黄,山茱萸及其配伍水提液,含药血清,测早期糖化蛋白(果糖胺)及晚期糖基化产物(AGEs),计算抑制率(inhibitory rate,IR),及半数抑制率(IC50).结果:山茱萸,生地黄,山茱萸,生地黄配伍分煎及合煎的早期糖化产物(果糖胺)IC50分别为0.104,0.159,0.146,0.077 g·L-1;晚期糖基化产物(AGEs) IC50分别为0.175,0.221,0.143,0.076 g·L-1.提示生地黄,山茱萸水提液对早期和晚期糖化产物均有一定抑制作用.此外生地黄,山茱萸含药血清对早期糖化蛋白IC50分别为:37.9％,49.1％,52.8％,31.6％;对晚期糖基化产物IC50分别为:78.5％,92.3％,82.9％,73.2％.表明生地黄-山茱萸含药血清对果糖胺与AGEs也都具有一定的抑制作用,且生地黄-山茱萸合煎组抑制果糖胺和AGEs的IC50优于其他组.结论:生地黄山茱萸配伍对抑制果糖胺和AGEs具有协同作用.     

养元饮对酒精性肝损伤大鼠解酒和保肝作用

目的:观察养元饮对酒精性肝损伤大鼠解酒和保肝作用。方法:通过连续6周ig食用酒建立酒精性肝损伤大鼠模型,给酒的同时ig给予养元饮。气相色谱法检测血清中乙醇和乙醛含量,肝脏中乙醇脱氢酶(ADH)活力和血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性使用比色法测定,取适量肝脏HE染色,在光学显微镜下进行病理学检查。结果:养元饮中、高剂量能明显降低血清中乙醇和乙醛含量,其中高剂量可显著提高肝脏中ADH水平,作用优于海王金樽。养元饮同时有降低血中ALT和AST活性作用。结论:养元饮主要通过提高ADH活性降低乙醇浓度,同时防止肝脏转氨酶入血从而达到保护肝细胞作用。     

山茱萸最佳配伍组分对高糖致ECV304细胞培养液中NO和ET含量的影响

目的：探讨山茱萸最佳配伍组分对内皮细胞NO和ET的影响,分析其对糖尿病血管病变的保护作用及作用机理。方法：本实验前期研究结果表明,山茱萸防治糖尿病血管病变的最佳有效部位组合为：环烯醚萜苷十三萜酸＋1W～6W分子多糖（比例2：1：2）用A281C2I表示。体外培养细胞,在细胞板内加入含30mm高糖的10％FBSRPMI-1640培养液,加入空白、A281C2工小剂量、大剂量含药血清。同时设10％FBSRPMI-1640培养液作正常对照,川芎嗪、黄芪注射液作阳性对照。在37℃、5％CO2饱和湿度培养48h后,取细胞上清液测定ET和NO。结果：高糖组细胞上清液中NO水平降低,ET明显升高（P〈0．01）,提示血管内皮细胞受损。而山茱萸最佳配伍组分能提高NO含量,降低ET含量,与高糖组比较有显著性差异（P〈0．05,0．01）。结论：山茱萸最佳配伍组分A2B1C2I可部分恢复NO和ET的动态平衡,对糖尿病血管病变有一定的保护作用。     

RP-HPLC法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量

目的建立反相高效液相色谱法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量的方法,为完善山茱萸环烯醚萜总苷的质量评价提供依据。方法色谱柱:Lichrosphere C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱(0~12min,乙腈比例由10%增加到55%);流速1.0mL/min;柱温30℃;检测波长240nm。结果马钱苷和莫诺苷分别在0.088~0.528μg(r=0.999 8)和0.088~0.352μg(r=0.999 5)之间范围内线性关系良好;平均回收率(n=6)分别为98.7%(RSD=1.3%)、98.6%(RSD=0.8%)。结论所建立的方法简便、准确、分离效果好、重复性好,可以用于控制山茱萸环烯醚萜总苷的质量。     

生地-山茱萸对糖尿病大鼠血管的保护作用

目的探讨生地-山茱萸药对干预糖尿病大鼠血管病变的机制。方法高脂饲料喂养,一次性腹腔注射STZ,筛选合格的糖尿病大鼠模型,灌胃给药12 w。12 w末,戊巴比妥钠麻醉后取血,制备血浆和血清。测定血清中一氧化氮(NO)、总-氧化氮合酶(T-NOS)和总超氧化物歧化酶(SOD)活力,放射免疫测定血清中血栓素(TXB2)和前列腺素(6-keto-PGF1α)及血浆中内皮素(ET)含量。结果糖尿病大鼠NO下降,灌胃生地-山茱萸药对组有上升趋势,ET和SOD与之相反。模型组大鼠血清中TXB2升高,用药后,药对组明显下降(P<0.01),6-keto-PGF1α与之相反。结论生地-山茱萸药对可恢复NO/ET和TXA2/PGI2平衡,SOD活力增加,表明清除自由基能力增强,从而保护血管内皮,抑制因糖尿病引起的包括心脏病变、主动脉病变和肾病变在内的多种血管并发症的发生与发展。     

山茱萸最佳配伍组分对高糖致ECV304细胞氧化损伤的保护作用

目的研究山茱萸最佳配伍组分(环烯醚萜苷、三萜酸和多糖以2∶1∶2配伍)对高糖培养的内皮细胞(human um-bilical vein endothelium cells,ECV304)氧化应激的影响。方法体外培养细胞,在细胞板内加入含30 mmol.L-1高糖的10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)RPMI 1640培养液,加入空白、山茱萸最佳配伍组分大剂量、小剂量含药血清。同时设10%FBS RPMI 1640培养液作正常对照,川芎嗪作阳性对照。在37℃、5%CO2饱和湿度培养48 h后,取细胞上清液测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。应用激光共聚焦显微镜检测进入细胞内2',7'-二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH-DA)荧光强度来反映细胞内ROS含量。结果高糖组细胞上清液中SOD、GSH-Px活性降低,MDA、ROS含量增加(P<0.01),提示血管内皮细胞受损,抗氧化能力降低。而山茱萸最佳配伍组分能提高SOD、GSH-Px活力,降低ROS、MDA含量,与高糖组比较差异有显著性(P<0.05,0.01)。结论山茱萸最佳配伍组分能够保护血管内皮细胞,具有防治糖尿病血管病变的作用,其作用机制与抑制氧化应激有关。     

环孢素A自微乳软胶囊的制备及质量控制

目的：制备环孢素A自微乳软胶囊,确定纳米粒径测定方法,控制产品质量。方法：通过测定环孢素A溶解度,以及以自微乳化后的粒径、自乳化时间和色泽为指标,对油相、潜溶剂、乳化剂、助乳化剂进行筛选,制备环孢素A自微乳软胶囊;通过稳定性、精密度等方法学试验,确定自微乳化后乳滴直径测定方法,控制产品质量。结果与结论：油相、潜溶剂、乳化剂、助乳化剂比例为1∶2∶2∶2时可获得优良的自乳化效果,软胶囊平均自微乳粒径为25 nm,因此提高了环孢素生物利用度,减少了服用量。