肝脏特异性DEK基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

目的　利用Cre/loxp基因敲除技术构建肝脏特异性DEK基因敲除小鼠,为研究DEK基因在肝脏中的生物学功能提供重要动物模型。 方法　将DEKflox/flox小鼠与肝脏特异性表达Alb-Cre重组酶的小鼠进行交配和鉴定,筛选出子代中DEKflox/+/Alb-Cre小鼠与DEKflox/flox小鼠进行交配与鉴定,获得DEKflox/flox/Alb-Cre小鼠,将DEKflox/flox/Alb-Cre小鼠与DEKflox/flox小鼠进行交配,其子代基因型为DEKflox/flox/Alb-Cre的小鼠即为本实验所构建的肝脏特异性DEK基因敲除小鼠,DEKflox/flox小鼠即为对照小鼠。提取小鼠尾基因组DNA,通过PCR鉴定子代小鼠的基因型;提取小鼠肝脏RNA和总蛋白,利用Real-Time PCR和Western Blotting技术检验DEK基因在小鼠肝脏中的mRNA水平和蛋白质水平的表达情况,使用激光共聚焦检测DEK蛋白在小鼠肝脏的表达情况;对小鼠肝脏行苏木精-伊红染色观察小鼠肝组织的形态学变化。 结果　PCR结果表明子代小鼠基因型符合DEKflox/flox/Alb-Cre;肝脏特异性DEK基因敲除小鼠肝组织中DEK基因的mRNA水平及蛋白质水平显著低于DEKflox/flox型小鼠;肝脏特异性DEK基因敲除小鼠肝组织的形态学特征与对照组小鼠相比无明显差异。 结论　本研究利用Cre/Loxp技术成功构建了肝脏特异性DEK基因敲除小鼠,为在动物水平进一步研究DEK基因的作用提供了重要动物模型。     

他汀类药物对脑梗死患者血清C反应蛋白及预后的影响

目的探讨血清C反应蛋白(Creactiveprotein,CRP)及血脂水平与脑梗死病情严重性及预后的关系,进而了解他汀类药物对脑梗死患者血清CRP水平及预后的影响。方法采用随机、双盲、安慰剂对照的方法进行研究,将46例脑梗死患者分为对照组及辛伐他汀组(辛伐他汀40mg/d或阿托伐他汀20mg/d,连续用药7d)。治疗前后检测血清CRP、血脂、血清谷草转氨酶(AST)及血清肌酸激酶(CK)水平,应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)及Barthel指数(BI)记分法对入选患者在入院时及3个月时的神经功能缺损程度进行评分。结果治疗前CRP水平与当时及3个月时病情显著相关(P<0.01,P<0.05),血脂水平则无此相关性。治疗后他汀组CRP水平下降,治疗前后的差值与对照组相比,差异有显著性(P<0.01)。各组入院时神经功能缺失程度评分与3个月后相比,差异有显著性(P<0.01),但不同组之间相比无明显差别。治疗后各组AST及CK水平无明显变化。结论脑梗死患者血清CRP水平与病情的严重性及预后相关。短期应用他汀类药物可以降低脑梗死患者血清CRP水平,安全性好,但对梗死后3个月的预后无明显改善作用。他汀类药物对脑梗死的疗效需要进一步研究。     

持续负压封闭引流治疗四肢骨折术后感染的效果

目的探讨持续负压封闭引流（VSD）治疗四肢骨折术后感染的临床疗效。方法收集41例四肢骨折术后感染患者,使用 VSD 治疗技术,使用 VSD 过程中,需根据培养结果使用敏感抗生素,创面彻底清创后使用 VSD,VSD 调整压力为300～500 mm Hg 负压,维护 VSD 管腔通畅,确保创面进行有效负压吸引,5～12 d 后拆除 VSD,观察创面愈合情况,确定是否需要再次行清创、VSD 置入,VSD 使用次数2～13次。结果14例（34％）患者经过 VSD 治疗后创面一期愈合,21例（51％）患者经过 VSD 治疗后再联合植皮、转移皮瓣创面愈合,6例（15％）患者经过 VSD 治疗后,创面缩小明显,肉芽组织新鲜,辅助联合换药后愈合。结论四肢骨折术后感染彻底清创后使用 VSD,可以改善创面血液循环,抑制创面细菌增殖,刺激肉芽组织生长,可直接闭合创面,或为植皮、转移皮瓣提供良好条件,预防感染复发,治疗结果满意。     

国产乳腺彩色三维多普勒超声市场问卷调查分析

目的对比分析国产与进口乳腺彩色三维多普勒超声(简称乳腺三维彩超)在市场供给服务方面的优劣,发现国产设备在市场供给服务上问题,总结原因并提出改进建议,推动国产化高品质乳腺三维彩超的发展,振兴民族品牌,提升国产医疗器械品牌的市场竞争力和市场影响力。方法选取辽宁省内八个市县区区域内所辖的所有三级医疗机构、二级医疗机构、社区卫生服务中心、乡镇卫生院、部分民营医疗机构及妇幼保健机构的全部可用于乳腺疾病筛查的彩超的市场供给服务信息进行调查,采用对设备使用人员发放问卷,现场填写的方式进行数据采集,确保对每台乳腺三维彩超在配置、使用、故障、售后、维修、培训等市场供给服务方面做出准确、客观、真实的评价,并对采集的数据建立数据库及进行数据分析。结果国产乳腺三维彩超配置比例明显低于进口乳腺三维彩超,市场占有率不足进口设备的一半。进口设备主要配置在三级、二级医疗机构,国产设备主要配置在乡镇卫生院,社区服务中心等基层医疗机构。国产与进口乳腺三维彩超在市场供给服务情况方面相比较,在设备满足临床需求度、设备发生故障频率与使用可及性、设备售后服务及维修满意度、设备技术培训满意度方面上总体无明显差异。在设备改进提升需求方面中的设备技术功能的改进与创新、售后服务提升、质量提升、设备安全防护方面总体无明显差异。对进口设备在改善设备操作便利程度的需求高于国产设备。结论国产乳腺三维彩超在满足市场需求和临床诊疗需求上总体与进口乳腺三维彩超无明显差异,但在品牌定位及地域分布上均不平衡,国产设备仍以中低端产品为主,主要配置在基层医疗机构,故应加大对优秀国产设备的扶持,引导民族品牌的创建和宣传,提高国产品牌的市场占有率,扭转高端医疗器械长期以来依赖进口的局面,对我国医疗设备产业及医疗卫生事业的发展都有着十分重要的意义。     

喀利普兰对大鼠肺纤维化模型的作用

特发性肺纤维化的病理研究结果提示,继发于肺部损害后的过度修复所引起的肺结构重建及炎症反应是致病的关键,早期给予抗炎治疗可缓解病程的进展[1]。现发现磷酸二酯酶Ⅳ(PDEⅣ)抑制剂具有抗炎作用[2]。我们经大鼠气管内滴入博莱霉素,诱发大鼠肺纤维化模型;然后用PDEⅣ抑制剂喀利普兰进行干预,观察其对肺泡炎和肺纤维化的影响,以期寻找新的治疗肺纤维化的药物。材料与方法　动物分组和模型制备:48只健康Wistar大鼠(郑州大学医学院实验动物中心),体重150～200g,雌雄各半,随机分为3组。模型组(A组)、对照组(B组)、喀利普兰组(C组),每组16只…     

急性脑梗死患者不同部位脑白质病变对认知功能的影响

目的 探讨急性脑梗死患者不同部位脑白质病变对认知功能的影响,分析胆碱能通路损伤部位与认知功能损害的关系.方法 选择急性脑梗死患者97例,以头颅MRIT2加权像评估是否有脑白质病变,其中有脑白质病变59例（脑白质病变组）,无脑白质病变38例（非脑白质病变组）.分别采用胆碱能通路高信号量表（CHIPS）及改良Scheltens量表对脑白质病变组进行评分.采用蒙特利尔评估量表（MoCA）对所有患者进行认知功能评分,观察两组认知功能差异,及CHIPS评分和改良Scheltens量表评分与MoCA评分的关系.结果 脑白质病变组与非脑白质病变组MoCA总分及视空间与执行、记忆、注意评分比较差异均有统计学意义[（20.86±4.52）分比（23.47±4.49）分、（3.80±1.68）分比（3.11±1.47）分、（2.78±1.57）分比（1.95±1.80）分、（4.00±2.08）分比（3.87±2.04）分]（P＜0.01或＜0.05）.有认知功能损害组（35例）与无认知功能损害组（24例）CHIPS评分和改良Scheltens量表评分比较差异均有统计学意义[（47.77±12.36）分比（39.83±7.98）分、（5.14±1.73）分比（2.58±2.10）分]（P＜0.01）.MoCA总分与额部脑室旁、枕部脑室旁、顶叶的脑白质病变评分及脑室旁总分、深部白质总分及改良Scheltens量表总分呈显著负相关（P＜0.01）.视空间与执行、注意、定向评分及MoCA总分与CHIPS评分呈负相关（P＜0.01）,注意、定向评分及MoCA总分与改良Scheltens量表评分呈负相关（P＜0.01）.结论 急性脑梗死患者脑白质病变与认知功能损害有关,且脑白质病变严重程度与认知功能损害程度有关;不同部位的脑白质病变对认知功能的影响不同;脑白质病变所致的认知功能损害与胆碱能通路受损有关,主要影响视空间及执行功能,其严重程度与胆碱能通路损害严重程度也有相关性.     

三磷酸腺苷二钠氯化镁对脑损伤大鼠神经病理性疼痛的作用

目的探讨三磷酸腺苷二钠氯化镁(T/M)对脑损伤大鼠神经病理性疼痛的作用及相关机制。方法将大鼠分为对照组,大脑中动脉阻断(MCAO)+溶剂组,MCAO+T/M低剂量组,MCAO+T/M中剂量组,MCAO+T/M高剂量组,除对照组大鼠进行假手术外,其余分组均为脑梗死损伤模型大鼠,根据分组分别尾静脉注射3 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg T/M或生理盐水,连续7 d。术后1～7 d机械刺激纤毛(von Frey)检测大鼠的机械痛阈值;术后第7天,TTC染色检测大鼠的脑梗死体积,试剂盒检测丙二醛含量,酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测白细胞介素4(IL-4)和转化生长因子-β(TGF-β)的表达量。结果与对照组相比,所有MCAO手术大鼠的痛阈值和脑梗死体积均显著下降;而除中剂量T/M组外,其余分组丙二醛含量和脑组织含水量显著上升、抗炎因子显著下降(P 0. 05);在不同给药剂量干预下,中剂量T/M干预能较溶剂组显著提高大鼠的机械疼痛阈值(P 0. 05);相比溶剂组,T/M中剂量可显著减小大鼠的脑梗死体积、降低脑组织中丙二醛的表达和脑组织含水量(P 0. 05),并显著提高抗炎因子IL-4和TGF-β的表达水平(P 0. 05);而T/M低剂量组和高剂量组分别与溶剂组各指标相比,差异均无统计学意义(P 0. 05)。结论三磷酸腺苷二钠氯化镁可以通过降低氧化产物丙二醛的产生,促进抗炎因子IL-4和TGF-β的表达,降低脑组织含水量,对MCAO后大鼠的脑梗死及神经病理性疼痛起到保护和缓解的作用,且中剂量三磷酸腺苷二钠氯化镁作用效果最佳。     

30%小体积肝移植大鼠模型的手术技巧及改良

背景:活体肝移植显著缓解了供肝短缺矛盾,如何使供者献出的肝量最小,同时受者得到最大的临床受益成为了目前的研究热点.目的:探索一种简便、稳定的小体积肝移植大鼠模型的建立方法.方法:以Kamada"二袖套法"非动脉化原位肝移植SD 大鼠模型为基础并参考国内外文献,制作30%小体积肝移植模型.实验分为Ⅰ组为体内肝叶减除;Ⅱ组为体外肝叶减除组;Ⅲ组为改良后小体积肝移植模型.主要观察供体手术各阶段时间;移植后并发症和生存情况.结果与结论:改良后模型较改良前的供肝获取时间和肝叶减除时间均显著缩短(P ＜ 0.05).Ⅱ组的供肝冷缺血时间显著长于Ⅰ组和Ⅲ组(P ＜ 0.05).改良后的小体积肝移植模型手术成功率较改良前显著提高(P ＜ 0.05),改良后7 及14 d 存活率均高于改良前模型(P ＜ 0.05).改良模型较改良前生存时间延长了9 d.改良模型的手术总并发症例次较改良前组显著较少(P ＜0.01).提示采用此改良方法能建立稳定的30%小体积肝移植大鼠模型,而且在操作简便、减少并发症、提高手术成功率和术后存活率等方面有显著优势.     

房颤f波大小与病因的关系(附167例分析)

为观察心电图心房颤动波振幅大小与心脏病病因的关系。本文对167例心房颤动住院患者进行病因分析。资料和方法本组167例中,男性98例,女性69例。年龄最     

辛伐他汀或阿托伐他汀对脑梗死患者血清CRP的影响

目的探讨血清C反应蛋白（CRP）与脑梗死病情严重性及预后的关系。方法将46例脑梗死患者分为对照组及辛伐他汀组（辛伐他汀40mg／d或阿托伐他汀20mg／d。连续用药7d）。治疗前后检测血清ClIP、血清谷草转氨酶（AST）及轿清肌酸激酶（CK）水平。结果治疗前CRP水平与当时及3个月时病情显著相关（P〈0．01，P/〈0．05）。治疗后他汀组CRP水平下降，治疗前后差值与对照组相比有显著差异（P〈0．01）。治疗后各组AST及CK水平无明显变化。结论脑梗死患者血清CRP水平与病情的严重性及预后相关。短期应用辛伐汀或阿托伐他汀可以降低脑梗死患者血清CRP水平，安全性好。