茵栀黄注射液基于FXR调控胆汁酸代谢的相关机制研究

目的通过研究茵栀黄注射液(Yinzhihuang injection,YZH)对肝内胆汁淤积湿热证大鼠和人正常肝细胞系(HL-7702)的法尼酯X受体(Farnesoid X receptor,FXR)基因表达的影响,探讨YZH的作用靶点及机制。方法 28只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(7只)、模型组(7只)、YZH组(7只)、GW4064组(7只),造模干预后观察大鼠肝脏组织病理和检测肝组织FXR的表达;不同浓度YZH干预HL-7702,观察细胞形态,确定YZH理想干预HL-7702的浓度。RT-qPCR法、免疫荧光法检测FXR基因的表达。结果 HE染色显示YZH组大鼠肝功能及肝脏病理损害明显低于模型组,YZH对HL-7702的理想干预浓度1.20%。YZH促进FXR基因的表达(P0.01)。结论 YZH能显著改善肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝脏病理损害,YZH对HL-7702活性影响呈剂量依赖性,促进FXR基因的表达。     

岭南地区重症肌无力中医辨证与西医分型关系及用药规律探讨

【目的】探讨岭南地区重症肌无力(MG)中医辨证与西医分型关系并总结其用药规律,为临床治疗提供参考和借鉴。【方法】回顾性分析在广州中医药大学第一附属医院2011年6月至2017年1月住院治疗的315例MG病例,建立数据库,分析岭南地区MG患者的中医辨证与西医分型关系并总结其用药规律。【结果】(1)315例MG患者的平均年龄为(44.23±14.04)岁,不同Osserman分型的MG患者年龄差异无统计学意义(P=0.835);MG患者中男女比例为1:1.84,不同Osserman分型的MG患者男女构成比例差异无统计学意义(P=0.863)。(2)不同Osseman分型MG患者中医证型分布差异有统计学意义(P=0.000)。脾胃虚损型OssermanⅠ型及Ⅱa型的MG患者比OssermansⅡb型、Ⅲ型及Ⅳ型多(P0.05);脾肾亏虚型OseermanⅡb型、Ⅲ型及Ⅳ型的MG患者比OssermanⅠ型及Ⅱa型多(P0.05);脾虚湿热型在各Osserman分型中的分布差异无统计学意义(P0.05)。(3)不同证型的MG患者均以补中益气汤为基础方随证加减。【结论】岭南地区MG患者的中医辨证与西医分型具有一定相关性,其中Ⅰ型及Ⅱa型MG患者以脾胃虚损型为主,Ⅱb型、Ⅲ型及Ⅳ型MG患者以脾肾亏虚型为主,各Osserman分型MG患者均可出现脾虚湿热。不同中医证型均以健脾益气补虚为主要治法,用药上均以补中益气汤为基础随证加减。     

茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠利胆退黄作用机制的研究

目的通过研究茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织中胆盐输出泵(BSEP)基因表达的影响,从分子水平探讨茵陈利胆退黄的作用机制。方法 45只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、模型对照组和茵陈组。检测治疗后大鼠血清生化指标、肝脏组织病理的变化和肝脏BSEP的表达。结果治疗后茵陈组大鼠体质量增加明显高于模型对照组(P<0.05)。茵陈组大鼠血清TB、DB、ALT、AST、ALP、TBA浓度低于模型对照组(P<0.05);HE染色显示茵陈组大鼠肝脏的病理损害轻于模型对照组。免疫组织化学染色显示茵陈组大鼠比模型对照组有更多的BSEP阳性细胞。荧光定量RT-PCR法显示模型对照组大鼠肝组织中BSEP mRNA表达明显低于茵陈组(P<0.05)。结论茵陈能有效改善肝内胆汁淤积湿热证大鼠的肝功能、减轻病理损害,并能上调肝脏BSEP的表达。     

中医五联疗法治疗肝性脑病临床研究

目的观察中医五联疗法治疗肝性脑病的,临床疗效。方法将肝性脑病患者65例随机分为治疗组34例与对照组31例,均予常规西药和中药汤剂口服治疗,治疗组加中药静脉滴注、中药灌肠、中药肝区热敷、中药穴位敷贴五联疗法。比较两组患者精神意识、智力及扑翼样震颤的改善情况,治疗前后总胆红素、血氨及凝血酶原时间变化情况。结果治疗组和对照组总有效率分别为76．47％、51．61％,治疗组疗效显著优于对照组（P〈0．05）;两组患者治疗后总胆红素、血氨及凝血酶原时间均显著下降（P〈0．05）,且治疗组在降低凝血酶原时间、血氨方面显著优于对照组（P〈0．05）。结论中医五联疗法发挥了中药综合治疗的优势,疗效显著,值得推广。     

利胆化瘀汤联合熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性肝硬化临床疗效观察

目的:观察利胆化瘀汤联合熊去氧胆酸治疗原发性胆汁性肝硬化患者的临床疗效。方法:将60例原发性胆汁性肝硬化患者随机分为2组,每组30例。对照组口服熊去氧胆酸(UDCA),治疗组在对照组的基础上加服利胆化瘀方,比较两组患者治疗前后淤胆、免疫指标的变化。结果:两组患者治疗后4周TBI、GGT、ALP较治疗前下降(P0.05),但两组间比较无明显差异(P0.05);两组患者治疗后12周TBI、GGT、ALP较治疗前明显下降(P0.05),且治疗组疗效优于对照组(P0.05)。两组患者治疗后4周IgG、IgM较治疗前未见明显下降(P0.05),但治疗后12周IgG、IgM较治疗前下降(P0.05),且治疗组比对照组更明显(P0.05)。结论:利胆化瘀汤联合UDCA可明显改善原发性胆汁性肝硬化患者淤胆指标,疗效优于单用UDCA,可能与其调节免疫有关。     

基于FXR探讨茵栀黄注射液利胆退黄的机制研究

目的:通过研究茵栀黄注射液对肝内胆汁淤积湿热证大鼠FXR、BSEP、NTCP蛋白和基因表达的影响,探讨茵栀黄注射液的作用靶点及机制。方法:51只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(7只)、模型组(7只)、茵栀黄注射液组(7只)、GW4064组(7只)、Guggulsterone组(7只)、茵栀黄+GW4064组(8只)、茵栀黄+Guggulsterone组(8只)共7组。造模干预后观察各组大鼠肝组织FXR、BSEP、NTCP蛋白和基因的表达。结果:茵栀黄注射液可以上调FXR蛋白和基因的表达,P0.05。FXR和BSEP在蛋白和基因表达量上存在显著相关,P0.05。结论:茵栀黄注射液通过干预FXR上调BSEP利胆退黄治疗肝内胆汁淤积。     

电针对不同时间段局灶性脑缺血大鼠缺血区皮层突触素P38和GAP-43表达的影响

目的 :探讨针刺对缺血性脑损伤保护作用的生化机制。方法 :采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型 ,研究缺血 2周和 5周后缺血区皮层突触素P3 8和GAP 43的变化规律和针刺对其影响。结果 :脑缺血 2周及 5周组大鼠脑缺血区P3 8表达比假手术组显著下降 (P <0 .0 5) ;缺血 +电针 2周组与缺血 2周组相比突触素P3 8表达并无显著性差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 5周组与缺血 +电针 2周组和脑缺血 5周组相比 ,突触素P3 8表达明显增加 (P <0 .0 5) ;但仍明显低于假手术 5周组 (P <0 .0 5)。缺血 2周组大鼠在缺血区周围GAP 43表达与假手术组相比增加明显 (P <0 .0 5) ,而缺血 5周组与假手术组相比无显著性差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 2周组大鼠脑片GAP 43表达与假手术组相比显著增加 (P <0 .0 5) ,而与缺血 2周组相比无差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 5周组大鼠脑片GAP 43表达与假手术 5周组相比有显著性差异 (P <0 .0 5)。结论 :针刺可以通过提高突触素和GAP 43在缺血中心区周围皮层的表达 ,保护缺血性脑损伤 ,并可能与大脑可塑性的形成有一定的关系     

青藤碱通过免疫调节防护刀豆蛋白A诱导的大鼠急性免疫性肝损伤

【目的】探讨青藤碱对刀豆蛋白A(Con A)诱导的大鼠急性免疫性肝损伤的防护效果及可能机制。【方法】将49只雌性Wistar大鼠随机分为7组,即正常组,模型组,青藤碱60、90、120、150 mg/kg组,地塞米松磷酸钠(Dex)组,每组7只。除正常组外,其余各组均尾静脉注射16 mg/kg Con A建立肝损伤模型。Dex组、青藤碱不同剂量组分别于Con A注射前1 h给药1次,青藤碱各组在Con A注射3 h后另再给药1次。Con A注射8 h后,腹主动脉取血,摘取肝脏组织。采用全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)水平;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)水平;采用苏木素—伊红(HE)染色观察肝组织病理改变。【结果】与正常组比较,模型组大鼠肝脾指数及ALT、AST、IL-2、IL-10水平均明显升高,ALB水平降低,差异均有统计学意义(P0.05),表明造模成功;与模型组比较,Dex组、青藤碱不同剂量组肝指数,ALT、AST、IL-2水平均明显降低,ALB、IL-10水平升高,差异有统计学意义(P0.05),且组织病理结果显示肝细胞坏死及炎细胞浸润程度明显减轻;与Dex组比较,青藤碱120 mg/kg组肝指数,ALT、AST、IL-2水平均明显降低,ALB、IL-10水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。【结论】青藤碱对Con A诱导大鼠急性免疫性肝损伤具有防治作用,抑制部分T淋巴细胞活化,调节IL-2、IL-10的分泌可能是其作用机制之一。     

劳绍贤分型辨治慢性萎缩性胃炎经验

采用频次分析的方法,对劳绍贤教授2015年10月至2017年11月期间门诊治疗慢性萎缩性胃炎患者的证候及方药进行分析,以探讨其辨治慢性萎缩性胃炎思路。劳教授门诊治疗的慢性萎缩性胃炎患者以脾胃虚弱、胃阴不足为常见证型;其治疗以益气养阴为基本大法,重视疏肝理气,辅以清热解毒、活血散结,同时善用岭南道地药材。     

茵栀黄注射液基于FXR调控MDR3治疗肝内胆汁淤积的作用机制

目的:通过研究茵栀黄注射液(Yinzhihuang injection,YZH)对人正常肝细胞系HL-7702细胞的法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR),多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance associated protein 3,MDR3)基因表达的影响,探讨茵栀黄注射液调控肝脏胆汁酸代谢的作用靶点及机制,为茵栀黄注射液治疗肝内胆汁淤积的临床应用提供实验依据。方法:不同浓度茵栀黄注射液干预HL-7702,采用细胞活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)探索茵栀黄注射液对HL-7702的活性影响,结合实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法确定茵栀黄注射液的理想干预浓度和时间;用GW4064(FXR激动剂)促进FXR基因的表达,分为茵栀黄注射液组,GW4064组,GW4064+茵栀黄注射液组,正常组,DMSO组;小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默FXR基因,分为siRNA组,siRNA+茵栀黄注射液组,正常组,阴性组。Real-time PCR法、蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测FXR,MDR3 mRNA及蛋白质的相对表达量,免疫荧光(IF)检测FXR蛋白的表达。结果:研究结果表明茵栀黄注射液对HL-7702的理想干预浓度1.08%,理想干预时间为15.47 h;茵栀黄注射液对HL-7702活性影响呈剂量依赖性;与正常组比较,GW4064组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01);与正常组比较,siRNA组抑制FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01);与GW4064组比较,GW4064组+茵栀黄注射液组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01);与siRNA组比较,siRNA+茵栀黄注射液组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01)。结论:茵栀黄注射液促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达,茵栀黄注射液通过FXR促进MDR3 mRNA和蛋白的表达来调控肝脏胆汁酸的代谢,本实验为其临床应用于治疗肝内胆汁淤积提供实验依据。