川黄连多指标成分定量及特征图谱建立研究＊

目的 测定川黄连（味连、雅连、凤尾连）中7个生物碱（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、格陵兰黄连碱）的含量并建立3种川黄连的特征图谱，构建川黄连科学的质量控制方法，以提升川黄连药材、饮片及其中成药制剂的质量控制水平，保障临床用药安全有效。方法 建立了同时测定7个黄连生物碱成分的HPLC含量测定方法，经方法学验证该方法准确性、重现性、精密度、稳定性、线性均符合要求。测定6批味连、6批雅连、3批凤尾连的7个生物碱的含量以及总生物碱的含量；建立了黄连药材HPLC特征图谱测定方法，经方法学验证，该方法精密度、重现性、稳定性均符合要求。结果 味连的总生物碱含量最高，7个生物碱在味连、雅连、凤尾连中含量各不相同，差异较大；通过对15批黄连的特征图谱相似度的分析，找出共有特征峰15个，与黄连生物碱对照品比对后，指认了8个峰，均为黄连生物碱成分。结论 川黄连多指标成分定量结合特征图谱，可以有效控制川黄连药材的质量，为2020年版《中华人民共和国药典》黄连药材质量标准的完善与提高提供参考。     

链球菌致热外毒素SpeB致病性研究进展

链球菌致热外毒素B(Streptococcal exotoxin B,SpeB)是A群链球菌(group A Streptococcus,GAS)以酶原形式分泌到胞外后形成的活性巯基蛋白酶。其能降解宿主胞外基质、免疫球蛋白和补体成分以及GAS自身表面黏附素M蛋白、F1蛋白、C5a肽酶和其他一些分泌蛋白,破坏宿主防御系统,     

峨眉山区唇形科药用植物ITS2和mat K条形码序列鉴定

目的 评价以ITS2和matK序列作为DNA条形码对峨眉山区唇形科药用植物的鉴定效果。方法 从峨眉山区采集23种唇形科药用植物样本,提取DNA,PCR扩增ITS2序列,并从Genbank上分别下载54与51条唇形科植物的ITS2及matK序列;使用MEGA 5.0软件计算全部序列的种间、种内遗传距离及序列变异位点,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,最后开展barcoding gap分析。结果 峨眉山唇形科药用植物的ITS2序列长度为190～237 bp,GC含量为53%～73%,具有较为明显的barcoding gap,对唇形科植物的识别率为94%,而matK序列的barcoding gap不显著,有明显重叠现象,对唇形科植物的识别率为96%。结论 ITS2从种水平上对唇形科植物有更好的鉴定能力,但matK序列对唇形科植物的识别率更高,因此,以ITS2为主,matK序列为辅的鉴定方法能够对唇形科药用植物进行快速、准确的鉴定和识别,准确阐明物种之间的亲缘关系,对峨眉山区唇形科药用植物资源的有效保护和合理开发提供了理论依据。     

藏药铁棒锤及其习用品中3种生物碱含量测定

目的建立同时测定铁棒锤及其习用品中苯甲酰乌头碱、乌头碱、3-脱氧乌头碱的HPLC含量测定方法,为铁棒锤药材质量标准毒性成分控制及其与习用品区别提供依据。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%三乙胺(每1000 mL水加4 mL三乙胺、1.68 mL磷酸),梯度洗脱,检测波长235 nm,流速1 mL/min,进样量10μL,柱温25℃。结果苯甲酰乌头碱、乌头碱、3-脱氧乌头碱分离度良好,3种成分在检测范围内均呈良好线性(r0.999),平均加样回收率为97.66%~98.47%,RSD为0.84%~1.60%。结论铁棒锤及其习用品中3种生物碱的含量差异较大,多裂乌头A.polyschistum、缩梗乌头A.sessiliflorum应另立药名加以区别。     

川黄连不同炮制品改善四氧嘧啶小鼠糖及脂代谢紊乱比较研究＊

目的 比较川黄连不同炮制品（味连、酒味连、姜味连、萸味连、雅连、酒雅连、姜雅连、萸雅连）对四氧嘧啶小鼠糖、脂代谢的药效差异。方法 采用四氧嘧啶小鼠糖尿病模型，测定小鼠的血糖指标和脂代谢相关指标。结果 在降糖方面，川黄连不同炮制品组与模型组比较，均有不同程度升高四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血清胰岛素（Ins）、降低空腹血糖（FBG）的作用，尤以萸雅连的疗效最佳；较之模型组，味连组、雅连组、姜味连组、萸雅连组糖化血清蛋白（GSP）降低显著，表明对小鼠糖代谢调节效果较好。在降脂方面，川黄连不同炮制品均可降低糖尿病小鼠血清中血清胆固醇（TG）、甘油三酯（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量，并增加高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量。就总体趋势而言，雅连及其炮制品降脂作用优于味连及其炮制品。结论 在降血糖方面，不同品种黄连、不同炮制品效果差异不大，以萸雅连降糖效果最为明显，在调节糖脂代谢紊乱和抗氧化方面，则雅连效果最佳。     

基于ITS2条形码及其二级结构的菊科药用植物的系统发育分析＊

目的 采用ITS2（Internal transcribed spacer2，内转录间隔区2）序列作为条形码技术对菊科药用植物进行鉴别。方法 选取来自西藏及四川康定、乐山和峨眉地区的菊科样品44种，提取DNA并对其进行PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）扩增，后测序，测序结果提交至GenBank；同时从GenBank上下载17条样本序列。对提交和下载的61条序列用MEGA7.0软件计算种内与种间的遗传距离，采用邻接法（neighbor-joinging，NJ）构建系统聚类树直观反应鉴定结果。从ITS2数据库中预测并比较样本ITS2序列的二级结构差异。结果 菊科植物种间最小遗传距离0.031大于种内最大遗传距离0.009，有较明显的barcoding gap；NJ树显示种各属样本分别聚为一大枝，种内之间各自聚成小支，表现出良好的单系性；各属及各种样品ITS2二级结构存在明显差异。结论 以ITS2序列作为DNA条形码，能够对菊科药用植物进行准确、迅速的识别与鉴定，是物种间进化关系准确的分子鉴定依据，可为该科植物的分布、种群及种群数量的研究提供指导，为控制药品质量、合理开发利用及保护提供了新手段。     

藏药臭蒿及其近缘种药材的ITS2 DNA条形码鉴别

臭蒿Artemisia hedinii有清热凉血,退黄,消炎的功能,在藏药中占有重要地位。蒿属植物种类繁多,在青藏高原分布广泛,且其外形较为相似,传统鉴定方法难以准确快速鉴定。文章以ITS2序列为DNA条形码,建立了一种快速准确鉴定臭蒿及其易混蒿属藏药植物的方法。从青藏高原采集蒿属藏药21个样品,分别提取样品DNA,对ITS2目标序列进行PCR扩增、测序,获得其ITS2序列信息;并从Gen Bank上下载同属序列11条;运用MEGA 6.0对所有32条ITS2序列进行对比,计算种间种内遗传距离,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,并比较样本ITS2序列间的二级结构差异。结果显示:臭蒿、牛尾蒿、黄花蒿、艾蒿的遗传距离较近,但四者种间最小距离均远大于种内最大距离,NJ树显示4种蒿属植物种内之间各单独形成一个分支,ITS2序列二级结构也显示出差异。以ITS2序列作为DNA条形码,可达到对臭蒿及其近缘蒿属藏药植物进行准确、快速的识别和鉴定的目的,准确地弄清物种之间的系统进化关系的目的,为该属药用植物的质量控制、安全用药及合理开发利用提供理论依据。     

应用ITS2序列鉴定四川车前、平车前、大车前

目的:评价DNA条形码技术对车前属植物的鉴定作用,并将之应用于四川车前属植物样本分析。方法:于四川不同地方和不同海拔高度采集车前属13个植物样本,提取DNA,进行ITS2序列PCR扩增、测序,从Genbank上下载10条同属ITS2序列;运用MEGA 5.0对所有序列种间种内遗传距离进行计算分析,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,并比较样本ITS2序列的二级结构差异。结果:车前、平车前、大车前的遗传距离较近,但是三者种间最小距离均远大于种内最大距离,NJ树显示三者聚为一大支,种内之间各单据一支;三者二级结构差异明显。分析不同地区和不同海拔样本时发现,不同采集地的样本无明显差异。结论:以ITS2序列作为DNA条形码,对车前属植物进行准确、快速的识别和鉴定,准确地弄清物种之间的系统进化关系,为该属药用植物的分布研究提供指导,对其质量控制、安全用药及资源合理开发利用提供了理论依据。     

桥小脑角肿瘤96例围手术期的护理

目的探讨桥小脑角肿瘤（又称CPA肿瘤）的围手术期护理特点和方法。方法总结96例CPA肿瘤手术治疗的护理体会。结果绝大多数患者临床症状明显缓解,预后良好,无由于护理不当造成的并发症。结论合理优化的CPA肿瘤围手术期护理对CPA肿瘤患者的康复有重要意义。     

黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其同属近缘物种的ITS2条形码鉴定与分析

运用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其近缘物种,以保证药材质量,确保用药安全.文中对采自西藏拉萨的黄花紫堇、多刺绿绒蒿等13个药材样品进行了DNA提取、PCR扩增和测序;对实验序列和GenBank下载的71条切除两端的5.8S,28S区域,使用MEGA 5.0进行多重序列比对,并进行种内、种间遗传距离计算和进化树构建;同时预测了黄花紫堇、多刺绿绒蒿与其近缘种ITS2序列的二级结构.结果表明,作为DNA条形码,ITS2序列能够有效地对黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其同属近缘物种进行分子鉴定.该研究不仅可为黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其近缘物种、相关混伪品建立基于.ITS2序列的DNA条形码的规范和安全的检测技术及鉴别方法,也为其质量控制、安全用药及合理开发利用提供理论依据及数据支撑.