蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊的制备

目的制备蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。方法反相乳化法制备纳米胶囊。以CaCl2溶液浓度、蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例、壳聚糖溶液浓度为影响因素,粒径、Zeta电位为评价指标,正交试验优化制备工艺。然后,考察纳米胶囊微观形态、载药量、包封率、药物释药性能。结果最佳条件为CaCl2溶液浓度20 mmol/L,蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例1∶1,壳聚糖溶液浓度1%,所得纳米胶囊大小均匀,分散性好,表面光滑饱满,平均粒径(210±5.12)nm,PDI 0.16±0.03,Zeta电位(-25.46±0.56)mV,载药量(16.35±1.35)%,包封率(83.69±4.31)%,人工胃液中24 h内累积释放率(81.86±3.15)%。结论该方法稳定可靠,可用于制备具有良好的体外缓释性能的蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。     

白及须根醇提物抗胃溃疡作用研究

目的研究白及须根醇提物抗大鼠乙醇急性胃溃疡的活性及其作用机理。方法实验设正常组、模型组、阳性对照组、白及须根醇提物低、中、高剂量组,用无水乙醇诱导大鼠胃溃疡模型。初次采用扫描仪扫描大鼠胃溃疡情况。ELISA检测血清中IL-1β、TNF-α、IL-10等因子的水平,初步分析其作用机理。结果白及须根醇提物可以减小溃疡面积;ELISA数据显示,血清中IL-1β、TNF-α、IL-10等因子与模型组相比均有显著性变化。结论白及须根醇提物具有显著抗胃溃疡作用,须根醇提物组分可通过降低IL-1β等因子和提高IL-10、VEGF等因子的水平发挥抗胃溃疡作用。     

香草扶正合剂对Lewis肺癌模型小鼠癌细胞自噬的影响

[目的]探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)的抑瘤作用及其机制。[方法]建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,随机分为模型组,XCFZ低、中、高剂量组,顺铂组(阳性对照组),并设置空白组。模型组以双蒸水0.2mL·d-1灌胃,XCFZ低、中、高剂量组分别以XCFZ低、中、高剂量0.2mL·d-1灌胃,XCFZ低、中、高剂量浓度分别为0.93g·mL-1、1.86g·mL-1、3.72g·mL-1;顺铂组以0.64mg·mL-1的顺铂溶液0.1mL·(2d)-1腹腔注射,同时以双蒸水0.2mL·d-1灌胃。每天固定时间给药,给药14d。称取小鼠体质量、瘤质量和去瘤后体质量,并计算抑瘤率,常规石蜡切片观察肿瘤组织病理改变,透射电镜观察瘤组织自噬小体,Western blot检测瘤组织自噬相关基因Beclin1、自噬相关蛋白5(autophagy related 5,Atg5)、微管相关蛋白1轻链3-β(microtubule associated protein 1 light chain 3-β,LC3b)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测瘤组织Beclin1、Atg5、LC3b、Unc-51样自噬激活激酶1(Unc-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)mRNA表达水平。[结果]与模型组比较,各给药组瘤质量降低(P＜0.01)。顺铂组抑瘤率最高,其次为XCFZ中剂量组。与模型组比较,XCFZ中剂量可升高小鼠去瘤后体质量(P＜0.05),增加肿瘤组织Atg5、Beclin1、LC3b蛋白及Atg5、Beclin1、LC3b、ULK1 mRNA表达水平,并升高Bax/Bcl-2 mRNA比值(P＜0.05,P＜0.01)。与顺铂组比较,XCFZ中剂量可升高小鼠去瘤后体质量(P＜0.01),增加肿瘤组织Atg5、LC3b蛋白及Beclin1 mRNA表达水平(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05)。[结论]XCFZ对肺癌小鼠模型肿瘤生长具有抑制作用,其抑瘤作用可能与自噬诱导相关;或与增加自噬相关蛋白Beclin1、Atg5表达,引发凋亡相关。     

蛇六谷石油醚萃取物柱层析部位抗肿瘤活性组分再筛选

[目的]对中药蛇六谷石油醚萃取物采用硅胶柱层析后的所得组分进行体外抗肿瘤活性筛选。[方法]采用硅胶吸附层析分离技术,对蛇六谷石油醚萃取物的化学成分进行分离,应用MTT法检测各组分对HepG-2、SGC-7901及C6细胞增殖的影响。[结果]蛇六谷石油醚萃取物经硅胶柱层析分离后,得到7个组分;MTT法实验结果显示石A和石B组分对HepG-2、SGC-7901及C6细胞均有较明显的抑瘤作用,其中以石B组分抑瘤作用最强。[结论]蛇六谷石油醚萃取物经硅胶柱层析分离得7个组分中石B组分抑瘤作用最强。     

福建沙生药用植物综合价值初步研究

目的:筛选沙生药用植物资源综合价值量化评价因子并对其赋值,形成可操作的量化评价体系。方法:采用层次分析法、百分制评价法、心理物理学法。结果:形成3个一级评价因子,20个二级评价因子的综合价值量化评价体系模型;36种福建本土沙生药用植物资源综合价值以百分制评分,得分最高为单叶蔓荆(81分),得分最低为拟漆姑(33分),平均得分56分。结论:本量化评价体系模型合理可行,可用于沙生药用植物资源的综合价值量化评价。     

蛇六谷乙酸乙酯部位抗癌化学成分研究

目的:研究蛇六谷乙酸乙酯部位中的化学成分。方法:综合应用多种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从蛇六谷95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物A1组分中分离得到2个化合物(化合物Ⅰ、Ⅱ),化合物Ⅰ经图谱解析鉴定为邻苯二甲酸二异丁基酯。结论:化合物Ⅰ为首次从该植物中分离得到。     

怀牛膝总皂苷对大鼠血管平滑肌细胞内bFGF和ICAM-1表达的影响

目的：探讨怀牛膝总皂苷（ABS）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）内细胞因子的影响,阐明其抗动脉粥样硬化的机制。方法：采用氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）诱导平滑肌细胞增殖的方法,以GAPDH作内标,RT-PCR检测相关细胞因子的表达量,评价ABS对细胞内碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和细胞间黏附分子（ICAM-1）mRNA表达量的影响。结果：OX-LDL浓度为30mg／L促进VSMC增殖最强;ABS（50、100、150mg／L）显著抑制OX-LDL诱导VsMc内bFGF、ICAM-1基因表达,作用呈浓度依赖性。结论：ABS能抑制在OX-LDL作用下VSMC内细胞因子的表达,说明其具有抗动脉粥样硬化的作用。     

桑黄液体发酵生产多糖工艺研究

目的 考察不同培养条件对桑黄菌液体发酵生产多糖的影响.方法 通过正交试验设计,对不同培养基种类、起始pH值、发酵温度和摇床转速进行优化,在此工艺基础上,采用5L发酵罐进行发酵放大试验.结果 采用添加0.3 9/L维生素B1和0.3 g/L维生素B2的PD培养基,起始pH值5,发酵温度28℃,摇床转速180 r/min条件下,桑黄菌摇瓶发酵液中胞内多糖和胞外多糖分别为5.80、2.37 g/L;5 L发酵罐发酵液中桑黄胞内多糖和胞外多糖分别为5.85、2.30 g/L.结论 桑黄液体发酵可获得桑黄多糖,本实验结果为桑黄液体发酵工业化生产提供参考.     

白及诱导HL-60细胞凋亡活性部位的筛选

目的:采用CCK-8法筛选出白及中诱导HL-60细胞凋亡的有效部位。方法:95%乙醇以及蒸馏水回流提取白及块茎,然后采用系统溶剂萃取法将提取物分为石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层,CCK-8法筛选出诱导HL-60细胞凋亡的有效部位。结果:白及块茎醇提物能有效诱导HL-60细胞凋亡,IC50为150.01μg/mL,水提物则无效。石油醚层、氯仿层和乙酸乙酯层IC50分别为103.91μg/mL、57.91μg/mL、101.80μg/mL,正丁醇层和水层诱导凋亡效果不佳。结论:白及块茎醇提物能诱导HL-60细胞凋亡,氯仿层诱导效果最佳,具有开发利用前景。     

八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因的克隆及分析

目的:通过末端快速扩增(RACE)技术获得临安地区八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶基因的全序列,探讨八角莲内异松树脂醇二酯脱氢酶基因的序列特点.方法:以浙江省临安地区八角莲为材料,根据同源序列法分别进行3′末端 RACE和5′末端RACE,获得闭联异松树脂醇二酯脱氢酶基因的全序列.结果:以八角莲属的八角莲为材料获得闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因序列为国际首次报道.此cDNA全长序列991bp,5′端非翻译区42 bp,3′端非翻译区112 bp.开放阅读框编码278个氨基酸,分子量为29253.3道尔顿,等电点为6.328.提交GeneBank序列号为EU573789.RT-PCR初步分析发现该酶的mRNA产物在茎内含量丰富.氨基酸序列比对表明闭联异松树脂醇二酯脱氢酶的物种差异性较大.结论:获得八角莲内闭联异松树脂醇二酯脱氢酶全基因.