注射用青藤碱脂质体温敏凝胶的制备及其药动学研究

目的通过脂质体与温敏凝胶相结合,制备新型注射用关节腔给药系统,并研究其药物代谢动力学(简称药动学)。方法采用逆向蒸发法制备青藤碱脂质体,通过单因素考察、星点设计-效应面法优化处方。选取壳聚糖/β-甘油磷酸(CS/β-GP)为温敏凝胶制备体系,并采用透析袋法对青藤碱脂质体温敏凝胶的体外释放度进行测定。建立家兔关节腔给药模型,应用DAS 3.1.0软件进行数据处理进而研究其药动学。结果制备青藤碱脂质体最优处方为药脂比1∶6,大豆磷脂与胆固醇比6∶1,油水比1∶6。体外释放结果显示,青藤碱脂质体温敏凝胶缓释效果明显,至114 h还未释放完全。家兔体内药动学研究表明,青藤碱脂质体温敏凝胶的生物利用度约为青藤碱注射液的2.0倍(P0.01),达峰时间显著延长,约为青藤碱注射液的3.0倍(P0.01),血药峰浓度降低(P0.05),缓释效果优于青藤碱注射剂。结论青藤碱脂质体温敏凝胶性状稳定,缓释效果明显,注射于家兔关节腔后,经体液侵蚀后自行消解,可用于关节腔注射给药。     

<i>Sinomenium</i> Inhibits the Viability of Hepatoma Carcinoma Cells through Activating IFNA2

Hepatocellular carcinoma (HCC) ranks the sixth place of most common cancers. Meanwhile, it is the tertiary mortality cause of cancer. There is no effective therapeutic method to prevent and treat the liver cancer. Sinomenine is a kind of Chinese traditional medicine herbal, it is reported that it can inhibit the viability of several cancer cells. The study is to explore whether sinomenine is also able to inhibit the cell viability of HCC and its potential mechanism. The IC50 of sinomenine in BEL-7402 cells was 5.351 mmol/L, and the IC50 of sinomenine in SMMC-7721 cells was 6.204 mmol/L. The gene expression results showed the relative expression of FGF2, CCND2, DCN, F3, MMP7, NRG1, HMGB1, TRIM29, HAS2, EHF, CTGF, PLK2 were down-regulated, and the relative expression of VEGF A, CITED2, NUPR1, DDX58, IRF9, NAMPT, MMP1, NDRG1, HMGA2, PPARGC1A, IFIT2, PARP9, HEY1, LOX, ETV1, ISG15, BACH, CYLD were up-regulated. Moreover, the IPA analysis results suggested that IFIT3, IFIT1, OAS1, MX1, IRF9, IFI6, IFITM1, ISG15 were up-regulated in BEL-7402 cells treated with sinomenine by activating IFNA2. The findings presented in this study may provide a promising method for the prevention and treatment of liver cancer.     

盐酸青藤碱对家兔脊柱压缩性骨折愈合的影响

目的研究盐酸青藤碱夹脊穴注射治疗去势家兔L1-L5 节段脊柱压缩性骨折（Compression fractureof spine,VCF）的机制。方法家兔48 只,采用随机数字表编号后随机分为空白对照组、模型组和青藤碱组（SIN组）,除空白对照组外,其它2 组均建立去势后L1-L5 节段VCF模型。成模后SIN 组于L1-L5 节段脊柱两侧“夹脊穴”注射盐酸青藤碱,模型组和空白对照组注射等体积生理盐对照,3 组均治疗4 周。家兔骨折椎体骨生长分化因子2（Growth differentiation factor2,GDF2）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）及VEGF-mRNA 表达采用免疫组化染色法测定;一氧化氮（Nitric oxide,NO）、超氧化物歧化酶（Superoxidedism utase,SOD）活性和骨保护素（OPG）采用ELISA 法检测;免疫荧光法测定脊柱椎间盘二聚糖、图像分析法测L1-L5 节段脊柱骨密度;ELISA法检测脊柱椎间盘炎性因子白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6β、IL-17β。结果与模型组比,SIN组L1-L5 节段脊柱GDF2、VEGF和VEGFmRNA均高表达、且脊柱骨密度增强（P＜0.05）;椎间盘二聚糖增多,IL-1β、IL-6β、IL-17β降低（P＜0.05）;静脉血NO降低、OPG、SOD升高（P＜0.05）,差异均有统计学意义。结论盐酸青藤碱“夹脊穴”注射可促进家兔L1-L5节段VCF愈合     

盐酸青藤碱传递体的制备及其对大鼠类风湿性关节炎的药效评价

目的制备盐酸青藤碱传递体并对其处方工艺进行优化,验证其对大鼠类风湿性关节炎(RA)的治疗作用。方法采用乙醇注入法制备盐酸青藤碱传递体,以传递体的弹性为指标,通过正交试验优化其处方工艺;以恒定压力挤出法测定其弹性,HPLC法结合离心超滤法测定其包封率;于大鼠尾根部sc牛II型胶原建立Wistar大鼠RA模型,以大鼠踝关节评分、关节肿胀度、血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平以及炎细胞浸润、血管翳形成、软骨破坏和骨侵蚀等组织病理形态学的变化来评价传递体对RA的治疗作用。结果盐酸青藤碱传递体最佳处方为蛋黄磷脂300 mg、胆固醇30 mg、盐酸青藤碱100 mg、脱氧胆酸钠60 mg、维生素E 5 mg、磷酸盐缓冲溶液(pH 8.0)23 mL、无水乙醇2 mL。以最佳处方制得的传递体的平均粒径为(83.31±0.08)nm,Zeta电位为(-32.57±3.27)mV,弹性指数为38.69±1.66,药物质量浓度为(2.96±0.27)mg/mL,包封率为(39.82±0.97)%。药效实验结果显示,盐酸青藤碱传递体可显著减轻由RA引起的关节肿胀(P0.01),显著减少血清中TNF-α和IL-1β的水平(P0.01),明显减轻炎症反应并有效改善踝关节部位的病理组织形态。结论所得的盐酸青藤碱传递体制备工艺可行,质量可控,疗效确切。     

光谱法结合分子模拟与网络药理学分析青藤碱的蛋白输运与靶蛋白结合的连续药效机制

目的 为进一步全面研究青藤碱(sinomenine,SIN)对血清白蛋白(human serum albumin,HSA)和封闭蛋白3(claudin 3,CLDN3)两者的分子间作用机理,提供借鉴和有益参考。方法 利用光谱分析法结合物理建模和网络药理学,来研究SIN与HSA和CLDN3的分子间相互作用机理。结果 网络药理学结论表明,SIN与HSA和CLDN3两个蛋白的结合参数与已验证靶点相似,可发生相互作用。光谱实验表明,SIN与HSA和CLDN3发生分子间相互作用,微环境的疏水性增强,与HSA/CLDN3分子间作用的位域以色氨酸残基为主,产生了稳定的非共价复合物。由理论分析可知SIN与HSA/CLDN3的反应机制是静态猝灭,构象型态变迁过程是1个“二态”模型,仅存在1个结合位点,相互作用主要为疏水作用力、氢键和范德华力,两个体系均符合非辐射能量转移理论。物理建模结果表明,在SIN与HSA和CLDN3的分子间作用中,疏水作用力和氢键起着关键作用,且结合物稳定,与光谱实验结果一致。结论 HSA作为输运蛋白,CLDN3作为与子宫内膜癌密切相关的靶点蛋白,本研究将网络药理学、光谱分析和物理建模结合起来,在不进行细胞实验的情况下,就可验证该反应通路的预测。     

离心沉淀-离心超滤法测定盐酸青藤碱脂质体的包封率

目的 建立盐酸青藤碱（sinomenine hydrochloride,SM-HCl）脂质体包封率的测定方法,并阐明药物在脂质体中的滞留特性。方法 采用薄膜分散法制备SM-HCl脂质体。以HPLC法测定脂质体药物的量,色谱柱为Kromasil ODS C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-水-乙二胺（55∶45∶0.225）,体积流量1.0 mL/min,检测波长265 nm。以离心沉淀-离心超滤法测定SM-HCl脂质体的包封率,并与以枸橼酸缓冲液（pH 7.0）水化的脂质体样品稀释前后的包封率进行对比。结果 辅料与溶剂对青藤碱的定量测定无干扰,青藤碱在9.82～78.56 μg/mL线性关系良好（r＝0.999 7）,平均回收率在99.29%～100.8%,日内与日间精密度良好（RSD≤2.1%）。50 μL药液可使超滤膜对药物的吸附达到饱和。以枸橼酸缓冲液（pH 7.0）水化的脂质体样品的包封率为33.16%,稀释1倍后该样品的包封率降至14.75%。结论 HPLC法与离心沉淀-离心超滤法结合可用于测定SM-HCl脂质体的包封率,该方法快速、准确;离心超滤中应弃去50 μL初滤液以确保滤液与脂质体外水相药物浓度一致;青藤碱与脂质双分子层有一定的亲和力,但在脂质体中的滞留性较差。     

止痹痛巴布剂体内外透皮给药的相关性评价

目的 考察止痹痛巴布剂体内外透皮给药的相关性。方法 体外试验采用单室扩散池,HPLC法检测接受池中青藤碱的质量浓度;体内试验检测大鼠的血药水平,采用W-N法计算累积吸收质量浓度。对体外累积透过质量浓度与体内累积吸收质量浓度进行线性回归。结果 回归方程为Y＝0.097 24 X＋0.323 91,r＝0.955 1,体内外相关性非常显著（α＝0.001）。结论 此方法可用于评价透皮给药系统体内外的相关性。     

青藤碱抗肿瘤作用与分子机制研究进展

肿瘤为机体在多重致瘤因子的影响下,导致局部组织细胞增生产生的病因未明的新生物,严重威胁人类生命和健康。肿瘤根据其病理性质分为良性肿瘤、交界性肿瘤、恶性肿瘤;其中恶性肿瘤统称为癌症,目前尚无特效药及可靠的治愈手段,为当前医学界研究的一大热点和难点。文献古籍中多有中草药治疗肿瘤屡建良效的记载,且现代药理研究表明,越来越多的中药活性成分已逐步凸显其对多种不同类型肿瘤的抑制作用。青风藤作为我国传统中草药治疗风湿类疾病具有悠久的历史,青藤碱为中药青风藤中含量较高的主要活性成分,具有抗炎、免疫抑制、镇痛、镇静等广泛药理作用,因微溶于水的特性故临床多应用其盐酸盐,商品名为正清风痛宁。近年研究表明,青藤碱单用或联合放化疗对多种肿瘤有显著或协同的抑制作用,被称为肿瘤抑制剂、放化疗增敏剂,其作用机制主要通过抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,阻滞肿瘤细胞周期,抑制肿瘤侵袭、转移,诱导肿瘤细胞自噬,逆转肿瘤细胞多药耐药,结合纳米材料增效减毒等。该文通过总结近年来青藤碱抗肿瘤抗癌相关实验研究成果,并根据其体内外药理作用及作用机制进行分类叙述,以期为青藤碱作为抗肿瘤治疗潜在药物提供理论依据,亦为其抗肿瘤的进一步机制研究提供参考。     

青藤碱及其新剂型治疗类风湿性关节炎的研究进展

类风湿性关节炎是一种长期性、顽固性、致残性的自身免疫性疾病。目前,临床上治疗类风湿性关节炎的药物主要包括非甾体类抗炎药、糖皮质激素、免疫调节剂等,但长期使用易产生恶心、胃肠道不适、肝损伤等不良反应。青藤碱是源于青风藤中的一种有效成分,具有镇痛、抗炎、抗菌、降血压等药理作用,临床可用来治疗类风湿性关节炎等疾病。目前,青藤碱尚存在半衰期短、生物利用度低、给药剂量大等不足之处,青藤碱新剂型的开发有望为类风湿性关节炎的治疗提供新的思路。基于近年来青藤碱的研究进展,对青藤碱治疗类风湿性关节炎的基本性质、临床应用、药理作用和新剂型研究进行了综述,为青藤碱新剂型开发及临床应用提供参考。     

盐酸青藤碱多囊脂质体的制备及其释放特性研究

目的制备包封率较高且具有较好缓释性能的盐酸青藤碱多囊脂质体。方法用复乳法制备盐酸青藤碱多囊脂质体,以包封率和囊形为考察指标,采用均匀设计优选最佳处方和工艺,并考察其形状、粒径及体外释放性能。结果制得的盐酸青藤碱多囊脂质体包封率在80%以上,形状圆整,粒径较均匀,多数分布在20～30μm,体外释放符合Higuchi方程,释药t1/2为52.7 h。结论盐酸青藤碱多囊脂质体处方工艺稳定可行,包封率高且具有良好的缓释特性。