红景天苷通过TLR4调控DC提高T细胞对肺癌3LL细胞的杀伤力

目的：探讨红景天苷（salidroside，SAL）对树突状细胞（dendritic cell，DC）表型及细胞毒性T细胞（cytotoxic T lympho‐cyte，CTL）抗肿瘤能力的影响。方法：选用Lewis肺癌细胞株3LL、野生型C57BL/6和TLR4-/-C57BL/6小鼠，获取小鼠骨髓来源的DC前体细胞，经过培养分化成未成熟DC，收获第6天的DC，经磁珠分选后获得纯度较高的CD11c+DC。将细胞分成PBS组、SAL组和脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）组，培养48 h后用流式细胞术检测SAL体外对DC表面分子、吞噬功能、TLR4通路和对T细胞杀伤能力的影响。结果：与 PBS 组比较，SAL组DC的表面分子CD80、CD86、MHC Ⅱ表达水平显著升高（均 P<0.05）、吞噬功能显著下降（P<0.05）、TLR4 表达水平显著升高（P<0.01）；与野生型组比较，TLR4-/-组DC经SAL或LPS处理后，其表面分子CD80、CD86、MHC Ⅱ的表达水平显著降低（均P<0.05）；与PBS组比较，SAL组刺激活化的CTL对肺癌3LL细胞的杀伤效应显著升高（P<0.05）。结论：SAL可以通过调控TLR4诱导DC成熟，从而提高T细胞的杀伤能力     

红景天苷下调KRT17增加紫杉醇对卵巢癌细胞的化疗敏感性

[目的] 红景天苷是从景天科植物大株红景天的干燥根及根茎或干燥全草中提取的一种化合物，具有多种药理作用。研究旨在探讨红景天苷下调角蛋白家族成员17（KRT17）影响紫杉醇对卵巢癌细胞的化疗敏感性。[方法] 红景天苷、紫杉醇单独或联用处理SKOV-3细胞，将细胞随机分为4组：对照组、红景天苷单独处理组、紫杉醇单独处理组和联合处理组，Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测细胞毒性，5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（EDU）检测细胞增殖，Hoechst 33258检测细胞凋亡。免疫荧光法检测自噬体形成情况，蛋白免疫印迹法检测KRT17和细胞自噬相关蛋白表达水平。[结果] 与对照组比较，红景天苷、紫杉醇单独处理组随浓度的升高，对SKOV-3细胞的毒性增强，细胞增殖数、P62蛋白表达降低，细胞凋亡率、LC3荧光斑点数、LC3-Ⅱ/LC3-I比值、Beclin1蛋白表达升高。且红景天苷与紫杉醇协同处理效果优于红景天苷、紫杉醇单独处理组，可能是红景天苷通过下调KRT17蛋白表达实现的。[结论] 红景天苷下调KRT17增加紫杉醇对卵巢癌细胞的化疗敏感性。     

UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分

目的:建立UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分(秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯)的方法,比较不同厂家及批次秦皮配方颗粒中7种成分含量的差异,为秦皮配方颗粒的科学质量控制提供依据。方法:采用Waters超高效液相色谱仪,Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~1 min,5%~10%A;1~10 min,10%~12%A),流速0.4 m L·min~(-1),进样量2μL,柱温38℃,检测波长220 nm。结果:色谱峰纯度结果表明方法专属性良好。秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯分别在各自范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.0%(RSD 2.0%),99.5%(RSD2.1%),99.9%(RSD 1.5%),99.7%(RSD 2.2%),99.4%(RSD 1.4%),100.8%(RSD 1.8%),99.4%(RSD 2.6%)。结论:该方法简便、准确,适用于秦皮配方颗粒中7种成分的同时定量测定,分析时间明显缩短,并对秦皮配方颗粒中除秦皮甲素和秦皮乙素之外的多种成分首次进行了定量测定,不同厂家及批次的秦皮配方颗粒主要成分含量存在一定的差异。     

Effects of salidroside on proliferation,migration, invasion and apoptosis of 97H cells北大核心CSCD

目的探究红景天苷对人高转移性肝癌细胞(97H细胞)增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法采用多功能细胞分析仪检测红景天苷对97H细胞增殖的影响,划痕实验检测红景天苷对97H细胞迁移能力的影响,Transwell小室实验检测红景天苷对97H细胞侵袭能力的影响,倒置显微镜观察红景天苷对97H细胞形态的影响,透射电镜观察红景天苷对97H细胞中线粒体的影响,流式细胞术检测红景天苷对97H细胞凋亡及周期分布的影响,q-PCR技术检测红景天苷对97H细胞中相关凋亡基因的影响,蛋白免疫印迹技术检测红景天苷对97H细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。结果与空白组相比,红景天苷处理组对97H细胞的增殖、迁移及侵袭均具有一定的抑制作用,且诱导97H细胞凋亡。红景天苷可以上调Caspase-3基因的相对表达(P<0.05),且可以上调E-cad、Bax、Caspase-3及Caspase-9蛋白的相对表达(P<0.05),下调N-cad、Girdin及Bcl-2蛋白的相对表达(P<0.05)。结论红景天苷对97H细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用,且通过线粒体途径诱导97H细胞凋亡。     

Pharmacokinetics and blood-brain barrier penetration of a novel salidroside derivative pOBz in rats北大核心CSCD

Aim To develop a ultra-high performance liquid chromatography electrospray-ionization tandem mass spectrometry ( UPLC-MS/MS ) method for the simultaneous determination of salidroside derivative pOBz in rat plasma and brain tissue, and to study the pharmacokinetic profile and penetration of the blood-brain barrier in rats after a single dose intravenous administration of pOBz. Methods SD rats were administered pOBz at a dose of 50 mg • kg -1via tail vein, and plasma and brain tissue samples were collected at different time points. UPLC-MS/MS method was used to determine the concentration of pOBz in plasma and brain tissue. The plasma concentration-time curve was fitted by DAS 2. 1. 1 software to calculate the pharmacokinetic parameters of pOBz. Results The linear regression equation of pOBz in plasma was: Y = 0.062 3X + 0.024 8 , r2=0.999, and the linear range was 0. 2 ~ 200 mg • L-1; the linearity regression equation in brain homogenate was : Y = 0.065 1X + 0.0317 , r2= 0.997, and the linear range was 0.2 ~ 200 mg • L -1. The half-life T1/2 of pOBz in plasma was 1.03 h,the area under the drug-time curve AUC0_twas 198.4 h • mg • L -1the mean residence time MRT0_twas 0.87 h, and the clearance rate CL was 0. 246 L • h-1• kg-1. 5 min after administration, pOBz could be detected in brain tissue at a concentration of 1.21 mg • L-1; it was not completely eliminated 3 h after administration. Conclusions The UPLC-MS/MS method is accurate and applicable for the pharmacokinetic study of pOBz in plasma and brain homogenate. pOBz can penetrate the blood-brain barrier and exert pharmacological effects in central nervous system. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

红景天甙联合碳酸钙对老年雌性大鼠骨量、骨代谢和氧化应激水平影响

目的探索红景天甙联合碳酸钙对老年雌性大鼠骨量、骨代谢和氧化应激水平影响。方法将40只24月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为模型组(OP组),红景天甙组(H组),碳酸钙组(Ca组)和红景天甙联合碳酸钙组(H+Ca组),而将10只3个月大鼠作为对照组(NC组)。观察各组大鼠腰椎和双侧股骨骨密度和骨矿物质水平的变化。测定各组大鼠骨代谢指标、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平变化。结果与OP组比较,H、Ca和H+Ca组大鼠腰椎骨密度,双侧股骨骨密度和骨矿物质水平显著升高;治疗12周,H、Ca和H+Ca组血清I型胶原C端肽(CTX-1)、骨钙素、碱性磷酸酶(ALP)、I型前胶原N端肽(PINP)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)水平均显著降低,比较差异有统计学意义(P 0.05);治疗12周,H、Ca和H+Ca组血清SOD和GSH-Px活性明显升高,MDA含量显著降低,差异有统计学意义(P 0.05或P0.01);其中H+Ca组上述指标变化最为显著;差异有统计学意义(P 0.05)。结论红景天甙联合碳酸钙可显著提高老年大鼠的抗氧化能力,增加骨密度,降低骨代谢水平,减少骨矿物质流失,从而预防和治疗骨质疏松症。     

HPLC法同时测定不同产地大花红景天中6种活性成分

目的对青藏高原不同产地大花红景天Rhodiola crenulata中没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸进行分析研究,建立定量分析方法,为其进一步利用提供依据。方法采用30%乙醇提取样品;Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长275 nm,柱温25℃。结果没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸分别在38.2~382.0 ng/m L(r=0.999 8)、301.0~3 010.0μg/m L(r=0.999 9)、19.8~198.0 ng/m L(r=0.999 6)、17.1~171.0 ng/m L(r=0.999 6)、4.5~45.0 ng/m L(r=0.999 8)、6.38~63.80 ng/m L(r=0.999 4)呈良好的线性关系,加样回收率均符合定量测定要求。结论该方法简便,快速,准确,可用于同时对青藏高原大花红景天中6种活性成分的测定。     

同时制备克级高纯度酪醇、大花红天素及红景天苷的工艺研究

酪醇、大花红天素及红景天苷3种化合物均是红景天的主要活性成分,具有广泛的药理活性.该实验首次从大花红景天中同时分离出克级高纯度的酪醇、大花红天素及红景天苷,红景天经70％乙醇提取后,以3种化合物的收率为指标,对树脂工艺进行优化筛选,再利用硅胶柱分离纯化,最终同时得到克级高纯度的酪醇、大花红天素及红景天苷,经HPLC测定,3种化合物的纯度均超过98％.该方法工艺简洁、操作简单、有机溶剂用量少、收率及重复率都很高,适合3种化合物的同时制备.     

红景天苷对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的 红景天苷是从红景天的根茎部中提取得到的，是红景天中含量最高的天然活性化合物。该实验旨在研究红景天苷对人源性肝癌细胞（HepG2细胞）增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 选取未作任何处理的HepG2细胞作为空白组，以终浓度为20、40、80 μmol·L^-1红景天苷处理的HepG2细胞作为红景天苷组。采用多功能细胞分析仪测定红景天苷对HepG2细胞增殖的影响，划痕实验测定红景天苷对HepG2细胞迁移能力的影响，Transwell小室实验测定红景天苷对HepG2细胞侵袭能力的影响，倒置显微镜观察红景天苷对HepG2细胞形态的影响，透射电镜观察红景天苷对HepG2细胞中线粒体的影响，流式细胞术分析红景天苷对HepG2细胞凋亡及周期分布的影响，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定红景天苷对HepG2细胞相关凋亡基因的影响，蛋白免疫印迹法测定红景天苷对HepG2细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。结果 与空白组比较，红景天苷组（20、40、80 μmol·L^-1）细胞指数均明显下降（P<0.05），愈合面积均明显增加（P<0.05），且呈时间和浓度依赖性；红景天苷组（20、80 μmol·L^-1）中能够穿过Matrigel基质胶的HepG2细胞数量呈浓度依赖性减少；红景天苷组（20、40、80 μmol·L^-1）总凋亡率呈浓度依赖性升高，且阻滞细胞于G₂/M期（P<0.05）；红景天苷组（20、80 μmol·L^-1）上皮性钙黏附蛋白（E-cadherin）表达呈浓度依赖性升高（P<0.05），神经钙黏附蛋白（N-cadherin）表达呈浓度依赖性降低（P<0.05）。红景天苷组（20、40、80 μmol·L^-1）胱天蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA表达、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、Caspase-3蛋白及胱天蛋白酶-9（Caspase-9）蛋白表达均呈浓度依赖性升高（P<0.05），肌动蛋白结合蛋白（Girdin）及Bcl-2表达均呈浓度依赖性降低（P<0.05）。结论 红景天苷对HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用，且通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。表明红景天苷可作为一种潜在的肝癌化疗候选药物。     

Salidroside protects PC12 cells from MPP-induced apoptosis via activation of the PI3K/Akt pathway

Oxidative stress plays an important role in the pathogenesis of Parkinson’s disease (PD). Salidroside (SAL), a phenylpropanoid glycoside isolated from Rhodiola rosea L., can exert potent antioxidant properties. In this study, we investigated the protective effects, and the possible mechanism of action, of SAL against 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP⁺)-induced cell damage in rat adrenal pheochromocytoma PC12 cells. Pretreatment of PC12 cells with SAL significantly reduced the ability of MPP⁺ to induce apoptosis in a dose and time-dependent manner. SAL significantly and dose-dependently inhibited MPP⁺-induced chromatin condensation and MPP⁺-induced release of lactate dehydrogenase by PC12 cells. SAL enhanced Akt phosphorylation in PC12 cells, and the protective effects of SAL against MPP⁺-induced apoptosis were abolished by LY294002, a specific inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) phosphorylation. These findings suggest that SAL prevents MPP⁺-induced apoptosis in PC12 cells, at least in part through activation of the PI3K/Akt pathway.