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1.
目的 探讨牛膝多肽(ABPP)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)介导的光感受器细胞损伤的保护作用,并初步探讨ABPP保护作用的可能机制。方法 在培养的光感受器细胞RGC-5中加入不同浓度的ABPP (0.05 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、5.00 mg·L-1)作用10 h后,通过NMDA(0.1 mmol·L-1)介导细胞损伤,同时设立NMDA组、正常组和地卓西平(MK-801)组。倒显微镜下观察各组细胞形态变化; MTT法检测细胞生存率;利用Hoechst 33258/PI双染和流式细胞仪测定细胞凋亡;钙离子成像观察细胞内钙离子变化;实时荧光定量PCR检测Bcl-2和Bax mRNA的变化。结果 NMDA组RGC-5细胞生存率较正常组明显下降(P<0.01);与NMDA组比较,0.10 mg·L-1ABPP组、0.50 mg·L-1 ABPP组和1.00 mg·L-1 ABPP组RGC-5细胞生存率升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);MK-801组细胞生存率也明显高于NMDA组(P<0.05),与0.50 mg·L-1ABPP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。因此,在后续的实验中选择0.50 mg·L-1为ABPP组的有效药物浓度。正常组、ABPP组、MK-801组细胞凋亡率与NMDA组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ABPP组、MK-801组细胞内钙离子荧光强度与NMDA组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示,与NMDA组比较,正常组、ABPP组、MK-801组细胞内Bcl-2 mRNA表达均增加,Bax mRNA表达均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 ABPP可抑制NMDA介导的视网膜光感受器细胞损伤,作用呈一定的浓度依赖性,其机制可能与抑制钙内流以及上调Bcl-2 mRNA表达、下调Bax mRNA的表达有关。  相似文献   
2.
3.
We previously found that circulating β2‐glycoprotein I inhibits human endothelial cell migration, proliferation, and angiogenesis by diverse mechanisms. In the present study, we investigated the antitumor activities of β2‐glycoprotein I using structure‐function analysis and mapped the critical region within the β2‐glycoprotein I peptide sequence that mediates anticancer effects. We constructed recombinant cDNA and purified different β2‐glycoprotein I polypeptide domains using a baculovirus expression system. We found that purified β2‐glycoprotein I, as well as recombinant β2‐glycoprotein I full‐length (D12345), polypeptide domains I‐IV (D1234), and polypeptide domain I (D1) significantly inhibited melanoma cell migration, proliferation and invasion. Western blot analyses were used to determine the dysregulated expression of proteins essential for intracellular signaling pathways in B16‐F10 treated with β2‐glycoprotein I and variant recombinant polypeptides. Using a melanoma mouse model, we found that D1 polypeptide showed stronger potency in suppressing tumor growth. Structural analysis showed that fragments A and B within domain I would be the critical regions responsible for antitumor activity. Annexin A2 was identified as the counterpart molecule for β2‐glycoprotein I by immunofluorescence and coimmunoprecipitation assays. Interaction between specific amino acids of β2‐glycoprotein I D1 and annexin A2 was later evaluated by the molecular docking approach. Moreover, five amino acid residues were selected from fragments A and B for functional evaluation using site‐directed mutagenesis, and P11A, M42A, and I55P mutations were shown to disrupt the anti‐melanoma cell migration ability of β2‐glycoprotein I. This is the first study to show the therapeutic potential of β2‐glycoprotein I D1 in the treatment of melanoma progression.  相似文献   
4.
5.
通过探索性研究对鹿瓜多肽注射剂质量现状及存在问题进行评价,并对现行质量标准进行优化。首先,对影响终产品新鲜度的因素进行考察。建立丹磺酰氯柱前衍生-HPLC 法测定鹿瓜多肽注射剂中 8 种生物胺的含量,结果显示个别企业的样品中检出较高浓度的尸胺;采用免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-HPLC -FLD 法测定鹿瓜多肽注射剂及中间提取液中黄曲霉毒素 B1、B2、G1 和 G2 的含量,并采用自动电位滴定法测定甜瓜子原料的酸价和过氧化值,结果表明部分企业生产原料甜瓜子存在霉变、酸败等问题,应在新鲜度方面给予重视。其次,优化了鹿瓜多肽注射剂质量标准中高分子量物质和多肽含量测定的方法。采用 Tricine-SDS-PAGE 电泳法代替凝胶色谱法测定高分子量物质,提高了测定的准确性;采用试剂盒法代替福林酚法测定多肽含量,该法操作简便、专属性更强,适用于大批量样品的快速测定。最后,对鹿瓜多肽注射剂质量标准中缺失的溶血与凝聚、生物学活性测定项目进行研究。建立直接观察法结合酶标仪测定法考察溶血与凝聚反应,结果各企业样品均无溶血与凝聚现象;采用 CCK-8 法考察鹿瓜多肽注射剂对 THP-1 细胞增殖的抑制作用,以此评价其抗炎活性,结果显示鹿瓜多肽注射剂对 THP-1 细胞具有增殖抑制作用,各企业样品的体外抗炎效果具有一定差异。探索性研究结果显示,鹿瓜多肽注射剂原材料、中间产品及终产品的安全性均存在一定隐患,表明本品的整体质量水平一般,且现行质量标准存在缺陷,亟待提高。  相似文献   
6.
7.
Background: Cytotoxic T lymphocyte (CTL) vaccine carriers are known to enhance the efficacy of vaccines, but a search for more effective carriers is warranted. Elastin-like polypeptides (ELPs) have been examined for many medical applications but not as CTL vaccine carriers.

Purpose: We aimed to create immune tolerant ELPs using a new polypeptide engineering practice and create CTL vaccine carriers using the ELPs.

Results: Four sets of novel ELPs, termed immune-tolerant elastin-like polypeptide (iTEP) were generated according to the principles dictating humoral immunogenicity of polypeptides and phase transition property of ELPs. The iTEPs were non-immunogenic in mice. Their phase transition feature was confirmed through a turbidity assay. An iTEP nanoparticle (NP) was assembled from an amphiphilic iTEP copolymer plus a CTL peptide vaccine, SIINFEKL. The NP facilitated the presentation of the vaccine by dendritic cells (DCs) and enhanced vaccine-induced CTL responses.

Discussion: A new ELP design and development practice was established. The non-canonical motif and the immune tolerant nature of the iTEPs broaden our insights about ELPs. ELPs, for the first time, were successfully used as carriers for CTL vaccines.

Conclusion: It is feasible to concurrently engineer both immune-tolerant and functional peptide materials. ELPs are a promising type of CTL vaccine carriers.  相似文献   
8.
目的分析血清组织多肽特异性抗原(TPS)水平与乳腺癌生物学行为的相关性,探讨血清TPS表达在乳腺癌中的临床应用价值。方法回顾性选取2019年1月至2020年1月在首都医科大学附属北京天坛医院住院治疗的乳腺癌患者85例为乳腺癌组;选取同时期诊断为乳腺良性肿瘤的患者83例为良性疾病组;选取同时期健康体检者86例为健康对照组。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测所有入选对象的血清TPS表达水平,分析比较血清TPS的表达情况与是否发生淋巴结转移、TNM分期、病理学分化程度、雌、孕激素受体及Cer Bb-2基因等的关系,同时检测TPS与肿瘤标志物CEA、CA15-3、CA125联合检测在乳腺癌诊断中的灵敏度及特异度情况。结果乳腺癌组患者TPS表达水平及阳性率显著高于良性疾病组和健康对照组(P <0.05),乳腺癌患者经治疗后血清TPS表达水平明显降低,与治疗前比较差异有统计学意义(P <0.05);乳腺癌患者血清TPS表达与年龄、肿瘤直径无关(P> 0.05),与临床TNM分期、腋窝淋巴结转移、肿瘤分化程度密切相关(P <0.05)。TPS联合CEA、CA15-3和CA125检测可大幅度提高乳腺癌诊断的灵敏度和特异度,与单独使用TPS指标相比差异具有统计学意义(P <0.05)。结论血清TPS的表达水平与乳腺癌患者生物学行为存在相关性,其可作为乳腺癌早期诊断、治疗效果评价、复发转移及预后判断的临床指标,为乳腺癌患者的临床治疗及预后判断提供有力的依据和新思路。  相似文献   
9.
贾珍  罗梦琳 《武警医学》2019,30(3):221-223
 目的 探讨参麦注射液对结直肠癌化疗患者免疫功能的影响。方法 选取2017-03至2018-02青海省人民医院收治的结直肠癌化疗患者88例,随机分为研究组和对照组,每组44例。全部患者采用XELOX化疗方案治疗,对照组采用脾多肽治疗,研究组在对照组基础上,采用参麦注射液治疗,根据RECIST实体瘤疗效标准评估两组的疗效。检测两组治疗前后的血清CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞。采用卡氏评分(KPS)评估两组的生存质量,记录两组的不良反应发生情况。结果 两组的缓解率对比,研究组为43.18%,对照组为36.36%,差异无统计学意义(P>0.05)。两组的有效率对比,研究组(84.09%)高于对照组(65.09%),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞明显升高,且高于对照组治疗后的水平,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组的生存质量改善程度(36.36%)优于对照组(27.27%),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组的恶心呕吐、白细胞减少、肝损伤、神经毒性发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 参麦注射液能进一步提高结直肠癌化疗的疗效,改善免疫功能及生存质量。  相似文献   
10.
《Vaccine》2019,37(35):4963-4974
Vaccination is the most efficient strategy to protect from infectious diseases and the induction of a protective immune response not only depends on the nature of the antigen, but is also influenced by the vaccination strategy and the co-administration of adjuvants. Therefore, the precise monitoring of adjuvant candidates and their immune modulatory properties is a crucial step in vaccine development. Here, one central aspect is the induction of appropriate humoral and cellular effector mechanisms.In our study we performed a direct comparison of two promising candidates in adjuvant development, the STING activator bis-(3,5)-cyclic dimeric adenosine monophosphate (c-di-AMP) and the Toll-like receptor ligand formulation poly(I:C)/CpG. These were evaluated in C57BL/6 mice using the model antigen ovalbumin (OVA) in subcutaneous vaccination with soluble protein as well as in a dendritic cell (DC) targeting approach (αDEC-OVA). Strikingly, c-di-AMP as compared to poly(I:C)/CpG resulted in significantly higher antigen-specific IgG antibody levels when used in immunization with soluble OVA as well as in antigen targeting to DC. In vaccination with soluble OVA, c-di-AMP induced a significantly stronger CTL, Th1 and IFNγ-producing CD8+ memory T cell response than poly(I:C)/CpG. The response was CTL and Th1 cell dominated, a profile shared by both adjuvants. In the context of targeting OVA to DC, c-di-AMP induced significantly increased Th1 and Th2 cell responses as compared to poly(I:C)/CpG. Interestingly, the Th1 response dominated the overall T cell response only when c-di-AMP was used, indicating a distinct modulatory property of c-di-AMP when the DC targeting immunization approach was exploited.Taken together, we describe superior properties of c-di-AMP as compared to poly(I:C)/CpG in subcutaneous vaccination with soluble antigen as well as antigen targeting to DC. This indicates exceptionally effective adjuvant properties for c-di-AMP and provides compelling evidence of its potential for further adjuvant development, especially also when using DC targeting approaches.  相似文献   
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