UPLC-MS/MS同时测定谷红注射液中7种有效成分

目的:建立同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。Phenomenex Kinetex C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 m L·min~(-1);质谱采用正负离子同时监测,多反应监测模式(MRM),进样量5μL。结果:谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素质量浓度线性范围分别在10.36~663.0,0.500 0~32.00,0.047 8~3.059,0.200 0~12.80,0.032 4~2.074,0.675 0~43.20,0.142 5~9.120μg·L~(-1)线性关系良好;平均加样回收率分别为97.0%~99.2%,RSD3.4%(n=6);7种成分在3批样品中的质量浓度依次为乙酰谷酰胺28.5~32.4 g·L~(-1),羟基红花黄色素A 1.02~1.23 g·L~(-1),芦丁14.3~17.6 mg·L~(-1),紫丁香苷101~123 mg·L~(-1),山柰素12.1~14.9μg·L~(-1),山柰酚0.138~0.155 mg·L~(-1),槲皮素73.4~95.6μg·L~(-1)。结论:该方法简、快速、高效、准确、可靠,适用于同时测定乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素7种有效成分,为该制剂建立更全面的质量控制方法提供依据。     

林下仿生态种植金线莲的质量标准研究

目的对林下仿生态种植金线莲的质量标准进行研究。方法建立林下仿生态种植金线莲的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法,并按《中国药典》2015年版有关规定对水分、灰分和酸不溶性灰分等项目进行了测定。结果林下仿生态种植金线莲在性状、显微特征和薄层色谱方面均具有专属性特征,经测定5个基地的金线莲水分平均为8.69%,总灰分平均为11.93%,酸不溶性成分平均为3.27%;含量测定结果槲皮素平均质量分数为0.021 0%,异鼠李素平均质量分数为0.024 7%,山柰素平均质量分数为0.027 3%。结论上述方法简便、专属性好,重现性好,可为林下仿生态种植金线莲质量标准的制定提供依据。     

HPLC法测定北合欢中槲皮素和山奈素的含量

目的建立HPLC法测定北合欢中槲皮素和山奈素的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱;甲醇-0.4%磷酸溶液（50∶50）为流动相;检测波长为360nm;柱温35℃。结果槲皮素在0.0088~0.5262μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9997;平均回收率（n=6）为98.8%,RSD=3.0%。山奈素在0.0242~1.4496μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率（n=6）为100.5%,RSD=2.0%。结论本法简便,准确,重现性好,可作评价北合欢的质控方法。     

HPLC同时测定维吾尔族药复方小艾飞中5种有效成分的含量

目的:建立HPLC同时测定复方小艾飞中槲皮素、山柰素、乔松素、高良姜素4种黄酮类成分及胡椒碱含量的方法。方法:采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙睛(A)-1%磷酸溶液(B)-甲醇(C)为流动相,梯度洗脱(0~12 min,28%A∶52%B∶20%C;12~13 min,28%~30%A,52%~50%B,20%C;13~45 min,30%A∶50%B∶20%C),流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,进样量20μL,检测波长280 nm。结果:槲皮素、山柰素、乔松素、高良姜素、胡椒碱的标准曲线分别为Y=357 314X-88 066(r=0.999 9),Y=442 853X-74 204(r=0.999 9),Y=647 926X-327 436(r=0.999 9),Y=471 672 X-256 408(r=0.999 9),Y=290 000X-391 906(r=0.999 9),线性关系良好。平均加样回收率(n=9)分别为98.4%(RSD 1.6%),98.9%(RSD 1.7%),101.3%(RSD 2.2%),98.6%(RSD 2.1%),98.6%(RSD 1.8%)。结论:该方法准确、简便,具有良好的重复性,可用于维吾尔族药复方小艾飞的质量控制。     

不同款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量分析及 HPLC 指纹图谱研究

目的 建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,测定不同来源的药材中槲皮素和山柰素的量,评价产地、生长方式及炮制对款冬花中槲皮素和山柰素量的影响;并建立款冬花中黄酮醇苷类成分指纹图谱,为款冬花质量控制的制定提供依据。方法 采用 HPLC 建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,色谱条件：Diamonsil C18 (200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-水 (77∶23),检测波长：365 nm。采用 HPLC 法建立款冬花药材中黄酮醇苷类成分指纹图谱,色谱条件：ODS-BP C18 (200 mm×4.6 mm, 5 μm);流动相：乙腈-0.1% H3PO4 水溶液梯度洗脱;检测波长为 365 nm。结果 不同产地,炮制品与生品之间,其槲皮素和山柰素的量差异较大,不同生长方式的药材之间无明显差异;不同产地及批次的款冬花药材的指纹图谱相似度较高。结论 本研究建立的槲皮素和山柰素的定量测定方法简便、准确、重现性好,可用于款冬花药材中黄酮醇苷类成分的质量控制;不同来源的款冬花药材中的槲皮素和山柰素的量有明显差异;所建立的黄酮醇苷类成分的指纹图谱方法操作性强、重现性好,可作为款冬花黄酮醇苷类成分指纹图谱研究的基础。     

UPLC法测定银杏叶茶中总黄酮醇苷的含量

目的建立银杏叶茶中槲皮素、山柰素和异鼠李素的超高效液相色谱分析法。方法色谱柱:Thermo Scientific AcclaimTM RSLC 120C18 ODS(100mm×2.1mm,2.2μm);流动相:甲醇-4mL·L~(-1)磷酸溶液(50∶50);流速:0.3mL·min~(-1);检测波长:360nm。结果槲皮素在4.503~90.06ng、山柰素在3.586~71.72ng、异鼠李素在2.111~42.22ng范围内线性关系良好;平均回收率分别为98.95%(RSD=0.87%),98.80%(RSD=0.90%)和98.78%(RSD=1.39%)。结论该方法简单,分析速度快,准确度高,可用于快速检测银杏叶茶中总黄酮醇苷的含量。     

蒙药蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列分子鉴定研究

目的 建立蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列DNA条形码（barcoding）分子鉴定方法。方法 色谱柱为Welchrom Column C₁₈（300 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相、梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温35℃，检测波长365 nm，进样量10 μL；采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012版A版）"进行相似度评价；同时以rbcL为引物，对11份蜀葵花进行PCR扩增并测定序列，运用DNDMAN和MEGA7.0及CodonCode Aligner17.0软件进行分析。结果 建立了11份蜀葵花的HPLC指纹图谱，得到21个共有峰，相似度均大于0.88，并标定了金丝桃苷（7号峰）、槲皮素（15号峰）、芹菜素（19号峰）、山柰素（20号峰）4个成分；rbcL序列扩增和测序成功率100%，测序到的长度500 bp，GC含量为44.10%~44.40%，种内遗传距离0~0.004 0，平均遗传距离0.001 4，变异位点数10个，相似度为99.00%。结论 建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠、rbcL序列DNA barcoding分子鉴定方法重复性好，可用于蜀葵花的质量控制。     

HPLC法测定乳癖康胶囊中山奈素的含量

目的:建立乳癖康胶囊的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Agilent Poroshell 120(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%的磷酸(53∶47),检测波长367 nm,流速0.8 mL/min,进样量20μL。结果:山奈素在0.76~3.8μg内线性关系良好,回归系数r为0.9986,平均回收率为99.16%,RSD为1.03%。结论:采用HPLC方法操作简便,专属性强,可作为乳癖康胶囊的质量控制方法。     

柽柳素和山奈甲黄素的组织分布研究

目的建立高效液相色谱法研究大鼠口服西河柳总黄酮后柽柳素和山奈甲黄素的组织分布。方法采用Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(pH 2.7)为流动相,流速1.0 mL.min 1,检测波长254 nm,柱温35℃,组织样品用固相萃取法处理。结果在多种组织样品中同时检测到柽柳素和山奈甲黄素,柽柳素在肺、心中分布最高,山奈甲黄素最高分布在心,次之为肺。结论利用高效液相色谱法可以同时进行柽柳素和山奈甲黄素组织分布研究。     

脱水淫羊藿素与山柰素对体外培养成骨细胞成熟矿化影响的比较研究

比较研究脱水淫羊藿素与山柰素对体外培养大鼠成骨细胞(rat osteoblasts,ROB)增殖与成熟矿化的影响。取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3天后首次换液,铺满皿底90%以上后传代培养。分别用1×10 4、1×10 5、1×10 6和1×10 7mol.L 1的脱水淫羊藿素和山柰素进行药物干预,增殖分析采用MTT法,诱导培养9天后检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,筛选出最佳浓度。采用最佳浓度的脱水淫羊藿素和山柰素进行药物干预,比较脱水淫羊藿素、山柰素和对照组之间的ALP、钙盐沉积量、骨钙素分泌量、CFU-FALP和矿化结节数量等成骨性指标。提取总RNA,实时荧光定量PCR(real time PCR)检测BMP-2、Osterix(OSX)及Runx-2的mRNA表达情况,同时提取总蛋白,Western blotting法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果表明,1×10 4mol.L 1脱水淫羊藿素和山柰素对细胞增殖有抑制作用;1×10 5mol.L 1脱水淫羊藿素虽对ROB增殖无明显影响,但能显著提高成骨细胞中ALP活性、钙盐沉积量和骨钙素分泌量,增加CFU-FALP和矿化结节数量,与成骨细胞成熟矿化相关的因子BMP-2、OSX和Runx-2的基因表达量也显著升高,同时I型胶原蛋白的分泌量也明显增多;而山柰素并没有表现出促进体外培养ROB成熟矿化的特性。脱水淫羊藿素促进成骨细胞成熟矿化的作用明显高于山柰素,很可能是由脱水淫羊藿素8位C原子上存在的异戊烯基引起的。