酶法浸提枸杞的研究

通过对外源酶酶解枸杞效果的研究，结果表明：外源酶能显著提高枸杞浸提液中可溶性固形物和营养成分的含量，其单一纤维素酶和木瓜蛋白酶浸提枸杞的适宜pH值分别是5．0～5．5和pH值6．0，适宜的酶质量浓度分别为0．20g／dL和0．40～0．60g／dL，温度分别为55．C和65℃，适宜时间都为50-60min；两种酶组合浸提枸杞的较适pH值、温度、时间和酶组合分别为pH值5．5～6．0，55-60℃．50min和0．20g／dL纤维素酶＋0．40g／dL木瓜蛋白酶。     

纤维素酶对玉米秸青贮营养成分及其奶牛瘤胃降解率的影响

本研究探讨了添加纤维素酶制剂对玉米秸青贮营养成分含量变化及其瘤胃内降解率的影响。以去穗玉米秸为试验材料,分别以0.00 g/1kg(C)、0.05g/1kg(Ⅰ)、0.2g/1kg(Ⅱ)、1g/1kg(Ⅲ)进行添加纤维素酶,贮藏4周后进行常规营养成分含量变化分析和饲养试验。用4头装有永久性瘘管荷斯坦乳牛,按4×4拉丁方设计进行瘤胃内降解率的试验。结果为:Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组玉米秸青贮DM含量差异不显著,但均显著低于C组;不同处理组的玉米秸青贮CP含量随纤维素添加量增加而显著提高,以1g/1kg纤维素酶添加处理的提高幅度最大;NDF和ADF含量均随着纤维素添加量增加而显著下降,其中1g/1kg纤维素酶添加处理的下降幅度最大。Ⅲ组、Ⅱ组和Ⅰ组玉米秸青贮的DM和CP奶牛瘤胃有效降解率均显著高于C组,并且Ⅲ组显著高于Ⅱ组和Ⅰ组;不同处理组的玉米秸青贮NDF有效降解率之间差异显著,Ⅲ组>Ⅱ组>Ⅰ组>C组;玉米秸青贮ADF有效降解率Ⅲ组、Ⅱ组和Ⅰ组之间无显著差异,但均显著高于C组。表明纤维素酶处理能提高青贮营养价值,且纤维素酶以1g/1kg添加量为宜。     

穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元提取工艺优化

目的 优化穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的提取工艺,开发一种在酸水解前的酶解预处理工艺。方法 利用酶的生物降解作用,断开薯蓣皂苷与纤维素的葡萄糖苷键,从而改变植物细胞壁的通透性。通过单因素试验考察酶添加量、酶解温度、酶解时间、酶解pH、料液比对薯蓣皂苷得率的影响,并在此基础上通过Box-Behnken响应面分析法优化薯蓣皂苷的提取工艺条件。结果 纤维素酶提取薯蓣皂苷的最佳工艺条件为纤维素酶用量400 U、酶解温度55 ℃、酶解时间8 h、酶解pH 5.5、料液比1∶30,在此条件下薯蓣皂苷得率为9.78%。酸解得到薯蓣皂苷元得率为32.07%,薯蓣皂苷元纯度为70.89%。结论 通过一步纤维素酶预处理可以使薯蓣皂苷元得率提高140.59%,薯蓣皂苷元纯度提高41.21%。该方法方便、高效,可为薯蓣皂苷元的进一步研究和工业化生产提供参考。     

Cellulase-Catalyzed Transglucosylation of Acetaminophen and Acyclovir: Preparative Enzymatic Synthesis of β-glucose Conjugate

Pharmaceutical Research -     

纤维素酶在金银花提取工艺中的应用

目的:用金银花提取绿原酸,对其加酶组和未加酶组进行对比实验。方法:酶提取工艺即每克生药加入10U(0.25g)纤维素酶,充分搅拌,其它同原工艺。结果:加酶组提高了绿原酸的收率,与未加酶组相比有显著性差异。P<0.05结论:纤维素酶的加入,提高了绿原酸的收率。     

纤维素酶法提取黄芪多糖

目的研究纤维素酶处理对黄芪多糖提取效果的影响。方法以提取液的总糖和还原糖为考察指标,确定纤维素酶处理工艺。通过不同提取方法提取多糖及扫描电镜分析,探讨纤维素酶处理的效果。结果纤维素酶处理条件的优化为纤维素酶加入量为60U/g生药,酶处理时间90min,温度50℃。与对照工艺相比得率由24.4%提高至30.3%,增加率为24.2%,而多糖的质量分数基本不变。扫描电镜观察表明,纤维素酶明显地分解了黄芪原料中的部分结构多糖,药渣中的网状结构变得十分清晰。结论纤维素酶处理有助于黄芪多糖的提取,能显著提高黄芪多糖的得率。     

酶法提取杜仲中降压活性成分

目的采用酶法提取杜仲中降压活性成分。方法选用纤维素酶,通过L9(34)正交试验确定京尼平苷酸和京尼平苷最佳提取工艺条件。结果提取京尼平苷酸的最佳工艺参数:温度45℃,介质pH=5,酶解时间1h,每100g杜仲需纤维素酶0.3g,提取率达到1.58%;提取京尼平苷的最佳工艺参数为:温度45℃,介质pH=7,酶解时间0.5h,每100g杜仲需纤维素酶0.2g,提取率达到0.26%。结论与传统水浸提取工艺相比,提取率提高9.09%~14.45%。     

槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用

目的：研究槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用。方法：将槲寄生8个不同部位的组织进行外植体培养，分离纯化其内生真菌,利用CMC平板培养和DNS法筛选出具有较高纤维素酶活性的菌株；将槲寄生寄生的膨大部位进行组织切片，染色观察其内生真菌的组织分布。结果：槲寄生体内分布着丰富的真菌菌丝；从槲寄生各组织部位共分离出83株内生真菌；初步筛选得到38株可降解纤维素的菌株，19株降解纤维素能力较强，其中10株分离自槲寄生寄生的膨大部位。结论：内生真菌分泌纤维素酶可降解枫杨树的细胞壁及细胞间隙组织，协助槲寄生的吸器穿透枫杨树组织，帮助槲寄生在枫杨树上寄生。     

苦荞茎叶粉中总黄酮酶法提取工艺研究

目的研究苦荞茎叶粉中总黄酮酶法提取工艺。方法苦荞茎叶粉经纤维素酶处理后用水提取总黄酮,研究酶加酶量、解温度、酶解时间和pH值对总黄酮得率的影响。结果酶法提取的最佳工艺条件为酶解温度55℃,加酶量3.0μL,pH值6.5,酶解90min,再在90℃下提取3次,每次30min,总黄酮得率可达1.47%。结论纤维素酶适用于苦荞茎叶粉中总黄酮的辅助提取。     

Cellulose utilization by Clostridium thermocellum: bioenergetics and hydrolysis product assimilation

The bioenergetics of cellulose utilization by Clostridium thermocellum was investigated. Cell yield and maintenance parameters, Y(X/ATP)True = 16.44 g cell/mol ATP and m = 3.27 mmol ATP/g cell per hour, were obtained from cellobiose-grown chemostats, and it was shown that one ATP is required per glucan transported. Experimentally determined values for G(ATP)P-T (ATP from phosphorolytic beta-glucan cleavage minus ATP for substrate transport, mol ATP/mol hexose) from chemostats fed beta-glucans with degree of polymerization (DP) 2-6 agreed well with the predicted value of (n-2)/n [corrected] (n = mean cellodextrin DP assimilated). A mean G(ATP)(P-T) value of 0.52 +/- 0.06 was calculated for cellulose-grown chemostat cultures, corresponding to n = 4.20 +/- 0.46. Determination of intracellular beta-glucan radioactivity resulting from 14C-labeled substrates showed that uptake is different for cellulose and cellobiose (G2). For 14C-cellobiose, radioactivity was greatest for G2; substantially smaller but measurable for G1, G3, and G4; undetectable for G5 and G6; and n was approximately 2. For 14C-cellulose, radioactivity was greatest for G5; lower but substantial for G6, G2, and G1; very low for G3 and G4; and n was approximately 4. These results indicate that: (i) C. thermocellum hydrolyzes cellulose by a different mode of action from the classical mechanism involving solubilization by cellobiohydrolase; (ii) bioenergetic benefits specific to growth on cellulose are realized, resulting from the efficiency of oligosaccharide uptake combined with intracellular phosphorolytic cleavage of beta-glucosidic bonds; and (iii) these benefits exceed the bioenergetic cost of cellulase synthesis, supporting the feasibility of anaerobic biotechnological processing of cellulosic biomass without added saccharolytic enzymes.