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1.
目的:建立同时测定水蛭药材中4 种主要成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,以次黄嘌呤为内标,计算其对尿嘧啶、黄嘌呤和尿苷的相对校正因子(RCF),通过RCF计算上述3种成分的含量;以外标法测定的含量作实测值,比较计算值与实测值的差异。结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤和尿苷检测质量浓度线性范围分别为1.60~32.00 mg/ml、4.05~81.00 mg/ml、1.50~30.00 mg/ml、1.25~25.00 mg/ml(r>0.999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率试验的RSD 分别为95.05%~99.45%(RSD=1.73%,n=6)、95.89%~99.38%(RSD=1.52%,n=6)、94.00%~97.88%(RSD=1.74%,n=6)、96.07%~99.35%(RSD=1.18%,n=6)。计算值与实测值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性良好,可用于水蛭药材中4种有效成分含量的同时测定。 相似文献
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3.
目的:研究水蛭醇提物与水提物对肺缺血再灌注模型大鼠的保护作用,并比较两者的作用效果。方法:夹闭阻断大鼠左肺门30min,开放后再灌注120min以复制肺缺血再灌注损伤模型。32只SD大鼠随机分为假手术(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、水蛭醇提物(400mg/kg)组、水蛭水提物(400mg/kg)组。于术前3d腹腔注射给药,每天1次,连续3d。放射免疫法测定大鼠血浆血栓素B2(TXB2)和6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)含量[可反映血栓素A2(TXA2)、前列环素(PGI2)水平];酶联免疫吸附法测定大鼠血清一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血浆中TXB2含量显著增加,TXB2/6.keto-PGF1a比值显著降低,血清中NO含量显著增加,NOs活性显著增强(P〈0.01或P〈0.05);与模型组比较,水蛭醇提物组、水蛭水提物组大鼠血浆TXB2、6-keto-PGF1a含量显著减少,TXB2/6.keto—PGF1a比值显著升高,血清N0含量显著减少,NOS活性显著减弱(P〈0.01或P〈0.05),且以上指标水蛭醇提物组均好于水蛭水提物组,但差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:水蛭醇提物与水蛭水提物均可降低肺缺血再灌注模型大鼠TXA2、PGI2、NO含量和NOS活性,且前者效果好于后者。 相似文献
4.
采用静水呼吸室法测定不同质量蚂蟥和螺蛳的耗氧量、耗氧率和窒息点,生物量测定法研究不同投喂方式对蚂蟥生长的影响。结果表明:25℃条件下,蚂蟥和螺蛳耗氧量与质量呈正相关(P0.05),窒息点随质量增大而增大(P0.05)。蚂蟥耗氧率与质量呈负相关,螺蛳耗氧率随质量增大呈先增大后减小趋势。投喂方式对蚂蟥终末质量、SGR,WGR和死亡率影响不显著,对进食比例影响显著(P0.05)。蚂蟥最适投喂频率为3 d投喂1次,应根据蚂蟥和螺蛳各阶段耗氧量及窒息点,结合养殖密度、水体面积以及换水频率,科学合理计算出螺蛳的投喂量。 相似文献
5.
Fulong Chu Xiaochen Wang Qianqian Sun Hao Liang Sijian Wang Dengkun An 《Clinical and experimental hypertension (New York, N.Y. : 1993)》2016,38(7):594-601
A fibrinolytic enzyme was purified from the dry body of Whitmania pigra Whitman. The fibrinolytic enzyme was purified to homogeneity with a yield of 0.003% and a purification of 630.7 fold. The molecular weight of the enzyme was estimated to be 26.7 kDa by reduced sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The enzyme was tested by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) and it showed that the enzyme was a novel fibrinolytic enzyme. The optimal pH and temperature of the enzyme were 8.5 and 55°C, respectively. Enzyme activity was enhanced by Na+, Mg2+, and K+. On the contrary, the proteolytic activity was significantly inhibited by Mn2+, Fe2+, Fe3+, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), and ethylenebis(oxyethylenenitrilo)tetraacetic acid (EGTA). Fibrinolytic and fibrinogenolytic assays showed that the enzyme preferentially hydrolyzed fibrinogen Aα-chains, followed by Bβ- and γ-chains. The α-, β-, and γ-γ-chains of fibrin were also degraded by the enzyme. 相似文献
6.
对测定宽体金线蛭抗凝血活性的凝血酶滴定方法的影响因素进行分析。方法:用白瓷点滴板代替试管进行滴定反应(简称白瓷板法),考察白瓷板法和常规的试管法、不同凝血酶滴定间隔时间和凝血酶浓度对抗凝血活性测定的影响。结果:在同样条件下,白瓷板法测定抗凝血活性的精确度和稳定性较试管法高。用白瓷板法测定,宽体金线蛭样品浓度在一定范围内(0.125~0.333g·ml^-1)、凝血酶浓度为20u·ml^-1或10U·ml^-1时,每隔1min滴加1次,每次5μ1,样品浓度与消耗的凝血酶体积呈线性相关,r值分别为0.961和0.992;所测得样品的抗凝血活性分别为(33.08±2.64)和(31.24±1.32)U·g^-1.RSD分别为8.0%和4.2%;对于0.333g·ml^-1的样品,其测量产生的理论误差不大于10%和5%。结论:白瓷板法可用于测定宽体金线蛭样品的抗凝血活性,用10U·ml^-1的凝血酶溶液,每分钟滴加一次,每次5山进行测定,其线性和精确度均较好。 相似文献
7.
该研究旨在探究Cu^2+富集与释放对蚂蟥生长和内在品质影响,以及蚂蟥不同组织对Cu^2+富集与释放规律。在安全浓度范围内,在蚂蟥日常养殖中添加适宜浓度Cu^2+,养殖50 d后停止添加Cu^2+继续养殖50 d,测定不同时期蚂蟥生长指标、不同组织Cu^2+含量、以及内在品质变化。结果表明,0.014 mg·L^-1 Cu^2+能显著促进蚂蟥生长(P<0.05),降低死亡率;在Cu^2+富集初期40 d内蚂蟥特定生长率、消化酶活性、生长与消化酶相关基因表达量显著高于对照组(P<0.05),释放期无明显差异;Cu^2+组蚂蟥免疫酶活性、免疫酶基因表达量与对照组比呈现先升高后降低的趋势(P<0.05);蚂蟥不同组织对Cu^2+富集能力为消化道>肌肉>皮肤,释放能力为肌肉>消化道>皮肤;Cu^2+组蚂蟥内在品质、水蛭素基因表达量与对照组无显著差异。综上,Cu^2+能提高蚂蟥消化酶、抗逆酶活性及相关基因的表达,促进蚂蟥生长、提高免疫能力,但并不影响药材水蛭内在品质,蚂蟥至少需要30 d才能完全释放体内富集的Cu^2+。 相似文献
8.
采用3,5-二硝基水杨酸比色法、对-棕榈酸硝基苯酯(ρ-NPP)比色法、福林-酚法探究0~6月龄蚂蟥消化道淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶的活力变化规律。结果表明,蛋白酶比活力1.5月龄前维持在较低水平, 2月龄活性最高,碱性蛋白酶 4月龄呈现一小峰值后快速下降;淀粉酶出生时活力较低,之后逐渐升高,2.5月龄活性最大;脂肪酶刚出生时便有较强活力,1月龄最低,2月龄达到峰值,4月龄又出现一小峰值。综上所述,蚂蟥出生时仅脂肪酶呈现较强活力,脂肪酶在消化道发育过程中比活力最强,蛋白酶、脂肪酶以及淀粉酶在2~3月龄时活力均最强,4月龄后均呈下降趋势。 相似文献
9.
目的:采用分子模拟技术从宽体金线蛭来源多肽库中筛选抗凝活性多肽,结合分子对接初筛及分子动力学模拟复筛,最终通过抗凝实验验证得到宽体金线蛭抗凝活性多肽。方法:利用虚拟酶切技术对宽体金线蛭蛋白库进行酶切,得到宽体金线蛭多肽候选库;选择凝血酶为凝血活性靶点,采用HPEPDOCK及Discovery Studio CDOCKER两种方法进行分子对接,并利用分子动力学模拟技术对分子对接初筛结果中对接结合能高的复合物进行动力学模拟复筛,通过MM-PBSA模块分析计算凝血酶-多肽复合物结合自由能;最后采用固相合成法化学合成复筛中稳定结合的宽体金线蛭多肽并进行体外抗凝活性测定。结果:经过虚拟酶切共得到3317条无毒多肽,通过分子对接进行初筛,结合分子动力学模拟复筛,得到1条结合凝血酶效果最好的目标抗凝肽,该多肽序列为QNTVGLDDFFSSYER,结合自由能为–427.506 kJ·mol–1。凝血酶Arg233残基是该凝血酶-多肽复合物中介导结合相互作用的关键氨基酸。该宽体金线蛭抗凝肽在体外活性测定中确能延长凝血酶时间。结论:利用分子模拟技术有效筛选出1条宽体金线蛭抗凝活性肽,... 相似文献
10.
目的 将生物检定技术应用于水蛭抗凝血活性的测定,探讨反映水蛭生物活性的质量控制方法。方法 采用肝素钠作为对照品,选择活化部分凝血酶时间值作为抗凝活性评价依据,对宽体金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭、棒纹牛蛭的抗凝活性进行测定,测定结果分别用标准曲线法和生物检定统计法计算。结果 4种水蛭活性部分凝血酶时间法的量效关系曲线与肝素的量效关系曲线类似,突跃范围呈平行关系,上述特点符合生物检定的要求,以肝素钠作为标准品,采用生物检定技术活性部分凝血酶时间法测定水蛭等的抗凝活性是可行的。结论 活化部分凝血酶时间值可以全面反映水蛭的抗凝血作用,测定结果对临床使用更具指导意义。生物检定技术应用于中药质量评价,是对现有中药质量标准控制方法良好的补充。 相似文献