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目的 探讨纳布啡对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 本研究时间为2019年1—7月.肝癌细胞株Huh7购自美国ATCC,将Huh7细胞分为对照组、不同浓度纳布啡(50μmol、100μmol、200μmol)组、微小RNA-4301(miR-4301)组、miR-4301模拟物阴性对照(miR-NC)组、纳布啡+miR-4301抑制表达载体(anti-miR-4301)组、纳布啡+miR-4301抑制表达载体阴性对照(anti-miR-NC)组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测Huh7细胞的增殖抑制率;Transwell检测Huh7细胞的迁移和侵袭数;蛋白质印迹检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和溴结构域蛋白4(BRD4)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-4301和BRD4 mRNA表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-4301和BRD4的靶向关系.结果 与对照组相比,不同浓度纳布啡组Huh7细胞抑制率升高[(11.25±1.12)%、(22.63±2.25)%、(37.65±3.74)%比(0.00±0.01)%],迁移数减少[(79.32±7.38)个、(61.36±5.48)个、(45.69±5.37)个比(98.63±9.54)个],侵袭数减少[(67.53±6.65)个、(53.41±5.22)个、(37.64±3.87)个比(81.36±8.13)个],p21表达水平升高,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达水平降低,miR-4301表达水平升高,BRD4mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),且呈浓度依赖性.与miR-NC组相比,miR-4301组Huh7细胞抑制率升高[(31.25±3.15)%比(6.32±0.63)%],迁移数减少[(52.33±5.26)个比(96.32±9.54)个],侵袭数减少[(41.69±4.32)个比(83.15±8.33)个],p21表达水平升高,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达水平降低(均P<0.05).miR-4301靶向调控BRD4的表达,抑制miR-4301表达逆转了纳布啡对Huh7细胞的作用.结论 纳布啡可抑制肝癌Huh7细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与miR-4301和BRD4有关. 相似文献
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目的:分析果蝇Zeste基因增强子同源物2(EZH2)和生存素(Survivin)在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化S-P法检测HCC50例、肝硬化30例、正常肝组织9例中EZH2、Survivin蛋白的表达。结果:HCC、肝硬化和正常肝组织的EZH2蛋白阳性表达率分别是88.00%、46.67%、33.33%,三者之间的差异有统计学意义;HCC、肝硬化和正常肝组织的Survivin蛋白阳性表达率分别是78.00%、30.00%、11.11%,三者之间的差异有统计学意义。结论:EZH2和Survivin异常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中起非常重要的作用;EZH2、Survivin在HCC中的表达关系密切,呈正相关。 相似文献
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血小板源性生长因子和rasP21在实验性肝癌发生中的作用 总被引:6,自引:0,他引:6
为探讨血小板源性生长因子(PDGF)是否参与肝癌发生,应用免疫组化技术,观察了在二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌变过程中,PDGF-β多肽和rasP21在肝细胞内的表达。结果显示,诱癌早期即检测到肝细胞内有高表达的PDGF-β多肽和P21。随诱癌过程的进行,这些阳性细胞增多,形成灶和结节,并常见结节周边细胞反应较强。此外,PDGF-β肽和P21常呈联合表达现象。同时对甲胎蛋白(AFP)的检测也发现,其阳性分布与前者重合,提示异常表达的PDGF是早期肝癌变过程中特定的事件,并可能以自泌方式并通过rasP21信号传导途径刺激大鼠肝细胞增生和癌变。 相似文献
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水分子扩散加权磁共振成像在肝脏的临床应用 总被引:22,自引:2,他引:20
目的 评价磁共振水分子扩散加权成像(DWI) 在肝脏病变鉴别诊断中的价值。方法对13 例正常志愿者、28 例病人的腹部正常脏器以及39 例59 个病灶( 肝癌7 例11 个病灶,转移瘤11例19 个病灶,海绵状血管瘤13 例18 个病灶,肝囊肿8 例11 个病灶) 行DWI并测量表观扩散系数(ADC值) 。结果 正常肝、脾、肾、胆囊、胰腺及肌肉平均ADC 值分别为0-69 ×10-3 mm2/s、0-71 ×10-3 mm2/s、1-64×10- 3 mm2/s、2-92×10-3 mm2/s、0-83×10-3 mm2/s、0-73×10-3 mm2/s。肝囊肿、海绵状血管瘤、肝癌及转移瘤的平均ADC值分别为3-03×10-3 mm2/s、1-91×10-3 mm2/s、0-95 ×10-3 mm2/s、1-18×10-3 mm2/s,囊肿、血管瘤及恶性肿瘤三者间有显著性差异(P<0-001)。结论 DWI分析及ADC值测量对肝脏局灶性病变鉴别诊断有一定价值,可作为肝脏MRI的补充检查序列。 相似文献
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Real time RT-PCR检测肝癌患者外周血AFP mRNA的表达水平 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:了解肝细胞癌患者外周血AFP mRNA的表达水平。方法;采用real time RT-PCR技术,定量检测肝细胞癌56例、慢性活动性肝炎17例、肝硬化21例和健康志愿者20例外周血AFP mRNA的表达水平。结果:肝癌56例外周血AFP mRNA的平均表达水平为34644.6±94905.4copies/μgRNA,其中29例为阳性;慢性活动性肝炎17例、肝硬化21例和健康志愿者20例外周血均未检测到AFP mRNA的表达。结论:AFP mRNA可作为血循环中存在肝癌细胞的标志物,定量检测外周血AFP mRNA是预测肝癌发生远处转移的一个可靠手段。 相似文献
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肝癌和癌旁组织中乙型肝炎表面抗原及丙型肝炎抗原表达与肝纤维化标志物的相关性 总被引:3,自引:0,他引:3
目的研究肝癌组织、癌旁组织中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗原表达与血清肝纤维化标志物的相关性。方法采用免疫组织化学法对肝癌组织及癌旁组织中的HBsAg、丙型肝炎抗原表达进行了标记和分析,同时检测其血清肝纤维化标志物水平,并研究它们的相关性。结果肝癌血清肝纤维化标志物水平在乙型、丙型肝炎病毒混合感染组中最高,单独乙型、丙型肝炎病毒感染组次之,无病毒感染组最低,肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、丙型肝炎抗原表达与透明质酸、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白呈正相关,相关系数分别为0.60、0.45、0.46,P值均<0.01。结论肝癌遵循慢性病毒性肝炎、肝硬化、肝癌的发展趋势,有病毒感染的肝癌组织,其血清肝纤维化水平明显高于无病毒感染者。一方面病毒的感染是肝癌发生的原因,另一方面长期的病毒血症会加重肝脏组织病变,所以病毒性肝炎的抗病毒干预治疗对肝癌的预后有着积极的意义。 相似文献
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