CD4+CD25+调节性T细胞对日本血吸虫病疫苗保护性效果的影响及机制研究

目的 目的 探讨CD4+ CD25+ 调节性T细胞 （Tregs） 对日本血吸虫病疫苗保护性效果的影响及其机制。 方法 方法 雌性 BALB/c小鼠随机分成5组， 即正常对照组、 感染对照组、 抗CD25单克隆抗体 （anti?CD25 mAb） 组、 谷胱甘肽?S?转移酶 （Gluthatione?S?transferase，GST） 免疫组和GST/anti?CD25 mAb联合组。分别在感染后2、 3、 4、 5周剖杀小鼠， 收集脾细胞 及培养上清， 采用流式细胞术检测脾细胞中CD4+ CD25+ Tregs比例， 双抗夹心ELISA法测定脾细胞培养上清中的IFN?γ、 IL?2、 IL?4、 IL?5和TGF?β水平。感染后5周杀鼠， 门静脉冲虫， 统计每只小鼠虫荷及每克肝脏虫卵数； 肝组织石蜡切片HE 染色观察虫卵肉芽肿病理变化。 结果 结果 感染后5周， GST免疫组小鼠减虫率为24.98%， 而GST/anti?CD25 mAb联合组减 虫率达43.13%； GST免疫组小鼠脾细胞中CD4+ CD25+ Foxp3+ 比例显著高于感染对照组 （P < 0.05）， 而anti?CD25 mAb组小 鼠脾细胞中CD4+ CD25+ Foxp3+ 比例显著低于感染对照组 （P < 0.01）。使用anti?CD25 mAb后2周， GST/anti?CD25 mAb联合 组小鼠脾细胞培养上清中IL?4、 IL?5、 IFN?γ和IL?2含量均较其他组高； 各组小鼠肝脏病理变化和脾细胞培养上清中TGF? β水平间差异均无统计学意义 （P 均 > 0.05）。结论 结论 GST疫苗可引起日本血吸虫感染宿主CD4+ CD25+ Tregs 明显上升， 从 而导致其保护性效果欠佳； anti?CD25 mAb部分封闭CD4+ CD25+ Tregs后有利于增强日本血吸虫病疫苗的免疫保护性效 果， 其机制可能与Th1、 Th2型免疫反应增强有关。     

羊在日本血吸虫病传播中的作用Ⅱ温度和湿度对羊粪中虫卵存活的影响及虫卵在自然环境中的存活状况

目的调查羊粪中日本血吸虫虫卵在江滩自然环境中的存活情况及其影响因素,为研究羊在日本血吸虫病传播中的作用提供实验依据。方法建立日本血吸虫感染山羊动物模型,收集感染性山羊粪便,观察环境温度和羊粪含水量对羊粪中日本血吸虫虫卵孵化率的影响。选择江堤外一块草滩作为实验现场,观察春、冬季羊粪在江滩的暴露时间对虫卵孵化率以及阳光直晒对虫卵生存的影响。结果在25℃实验室环境中,羊粪中日本血吸虫虫卵孵化率与羊粪含水量呈高度正相关(r=0.87)。当羊粪含水量降至7.6%时,虫卵失去孵化能力。保持羊粪含水量不变,将羊粪暴露在-5℃环境中,随暴露时间延长,粪便中虫卵孵化率逐渐降低;暴露5 h后,孵化率降至0。将羊粪样本暴露于5、15℃和25℃环境中,随暴露时间延长,粪便中虫卵孵化率逐渐降低,暴露52 d后仍有2.3%、5.0%和0.9%虫卵存活并可孵化出毛蚴。将羊粪暴露于35℃环境中,随暴露时间延长,粪便中虫卵孵化率逐渐降低,暴露13 d后孵化率降为0。冬季(气温-2~10℃)随暴露时间延长,暴露于江滩滩面的羊粪中虫卵孵化率逐渐下降,暴露21 d后孵化率降至0。春季(气温16~19℃)随暴露时间延长,暴露在江滩滩面的羊粪中虫卵孵化率逐渐下降,暴露5 d后虫卵孵化率降至0.9%。同一滩块暴露相同时间后,暴露在有阳光直晒滩面羊粪中的虫卵孵化率低于无阳光直晒滩面。结论羊粪中的日本血吸虫虫卵生存与环境温度和羊粪含水量(即湿度)有关,温度和湿度是影响虫卵孵化的主要自然因素。     

热毒宁注射液金银花提取过程轨迹研究

摘 要：目的：建立热毒宁注射液金银花提取过程轨迹,实现对提取过程的全程在线监控,为中药生产批次间质量控制提供参考。方法：收集多批次金银花提取过程的近红外光谱（NIRs）数据,并使用多元统计过程控制技术（MSPC）建立提取过程轨迹,实现对提取过程的全程监控。结果：建立的热毒宁注射液金银花提取过程的主成分得分,Hotelling T2和DModX轨迹图能够检测到过程的异常情况。结论：基于近红外光谱数据和MSPC技术建立的过程轨迹图可以反应中药生产的过程变化,可以用于对中药生产的全程监控。     

紫外-可见分光光度法测定龙爪槐叶中总黄酮含量

目的建立龙爪槐叶中总黄酮质量控制的方法。方法龙爪槐叶粉碎后,置索氏提取器中,甲醇连续提取,低温放置24 h以上,过滤去除叶绿素及杂质,滤液即为提取液。以芦丁为标准,亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色,采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,测定波长为500 nm。结果芦丁的线性范围为8～48μg·ml-1,回归方程：A=10.7318 C-0.0514,r=0.9991,平均回收率为94.85%,RSD=1.84%。结论龙爪槐叶甲醇提取后直接测定总黄酮含量,方法简便,结果准确,可用于龙爪槐叶总黄酮的质量控制。     

日本血吸虫可溶性尾蚴抗原早期诊断价值的研究

目的　确定日本血吸虫可溶性尾蚴抗原作为血吸虫病早期诊断检测用抗原的应用价值。方法　从感染日本血吸虫的钉螺收集尾蚴 ,制备可溶性尾蚴抗原 (SCA) ,建立应用 SCA为抗原检测家兔血清抗体的 ELISA法 ,并以此法检测 2 8只低度感染日本血吸虫家兔的感染前和感染后不同时期的血清 ,并与常规 SEA-ELISA法比较。结果　用 SCA检测时 ,感染后 15 d有 2 /2 8只家兔血清开始出现抗 SCA抗体阳性 ,2 0 d已有 2 0只阳性 ,阳性率为 71.4% ,3 0 d 2 8只全部阳性 ,阳性率为10 0 % ,而抗 SEA抗体在感染后 2 0 d开始出现 ,3 4d有 2 1只阳性 ,阳性率为 75 .0 % ,3 7d阳性率为10 0 %。平均出现抗体的时间 SCA-ELISA和 SEA-ELISA分别为 (2 1.2 5± 4.0 7) d和 (3 1.5 0±5 .12 ) d,前者比后者早 10 d。结论　用日本血吸虫可溶性尾蚴抗原检测血吸虫病具有早期诊断的价值     

代谢组学法考察金银花醇提物对模型小鼠肝损伤的预防作用

目的:基于代谢组学法研究金银花醇提物对模型小鼠肝损伤的预防作用。方法:30只小鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组与金银花醇提物(2 g/kg)组,ig给药,每天1次,连续14 d;给药第8天开始复制模型[ip给予0.2%二甲基亚硝胺(DMN,10 ml/kg),每天1次,连续7 d]。通过气相色谱与质谱联用(GC-MS)分析开始给药与开始给予DMN第1、3、5、7天小鼠24 h尿样总离子流图,考察尿样中内源性小分子代谢物的变化,主成分分析法探寻尿样代谢物谱的变化及潜在的生物标记物。结果:金银花醇提物组小鼠给予DMN 1~5 d后,色谱图轮廓发生变化并达到最大,但第7天呈明显回归趋势;DMN可导致小鼠尿样内源性小分子代谢物中8-苯基-8-氮杂环[4,3,0]壬-3-烯-7,9-二酮、2-(6-苯基庚炔)-1,3-二氧戊烷、双-(邻-甲基肟)-4-酮葡糖酸含量增加,丙二酸、(4-氯苯基硫代甲氧基)乙酸、四氢-2-呋喃乙醛、D-半乳糖、赤式戊糖酸、半乳糖醛酸含量减少;金银花醇提物能改善这一情况。结论:预先ig给予金银花醇提物对DMN诱导的小鼠肝损伤有一定预防作用。     

金银花化学成分研究

目的:研究金银花的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相ODS柱色谱等多种手段进行分离纯化,通过理化性质和MS、1H-NMR和13C-NMR等谱学技术进行结构鉴定。结果:从金银花中分离得到8个化合物,分别鉴定为:原儿茶酸(1)、5-羟基-7,3',4'-三甲氧基黄酮(2)、金丝桃苷(3)、4-羟基桂皮酸(4)、咖啡酸乙酯(5)、洋芹素(6)、5-羟基-6,7,8,4'-四甲氧基黄酮(7)、月桂酸乙酯(8)。结论:其中,化合物5、7、8为首次从该属植物中分离得到。     

A multi-group model of Schistosoma japonicum transmission dynamics and control: model calibration and control prediction

Previously we formulated a quantitative model to characterize site-specific schistosomiasis transmission. In this paper, we present a procedure to calibrate the model to data collected in endemic villages of south-western Sichuan, China, with the objective of reducing parametric uncertainty to allow the model to describe local transmission with relative confidence. A Bayesian approach using local epidemiological data and expert opinion is employed to calibrate the model. Results indicate that, after calibration, the output uncertainty is reduced substantially. The calibrated model is then used for prediction of the effects of different intervention options. Simulations reflect a bimodal transmission in both human (early summer and early fall) and snail (late summer and late fall) infections in this area, for which there is some field evidence. Also shown in the simulations are relatively high reinfection rates following chemotherapy in these endemic villages. These results suggest that a sustainable control strategy is essential in reducing transmission, and that transmission can be reduced by chemotherapy, focal snail (e.g. snail clusters) control, and egg control. Our work demonstrates the feasibility of characterizing site-specific schistosomiasis transmission using a mathematical model and a calibration approach that integrates diverse field data, and the use of the calibrated model to design control strategies.     

正交试验法优选金银花总有机酸的提取工艺条件

目的：优选并确立金银花中总有机酸的最佳提取工艺。方法以总有机酸提取率为指标,采用正交设计实验法对提取过程中的影响因素进行优选研究。结果金银花中总有机酸最佳提取工艺为：提取时间1.5 h,提取次数为3次,加水量16倍量。在此条件下,总有机酸提取率达66 mg/g。结论采用此提取方法不仅能够充分提取金银花中总有机酸,而且方法简便,适用于工业化生产。     

我国血吸虫病消除阶段健康教育与健康促进面临的挑战及对策

健康教育与健康促进是我国血吸虫病综合防控的重要措施之一，可提高流行区居民参与血防工作的依从性，有效避免或减少人群血吸虫感染。近年来，我国血吸虫病综合防控成效显著，已实现了传播控制目标，正向传播阻断乃至消除目标迈进。本文就健康教育与健康促进在我国血吸虫病防控中的作用及当前面临的挑战进行了分析，并就如何在消除阶段推进血吸虫病健康教育与健康促进工作提出针对性建议。