IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡能力的影响北大核心CSCD

目的:探究过表达IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡的影响与机制。方法:免疫组织化学染色(IHC)检测乳腺癌与癌旁正常乳腺组织CXCR4与其配体CXCL12表达,并分析其相关性;Western blot检测CXCR4在人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453和MDA-MB-231中的表达;采用慢病毒稳转技术在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中过表达IL-24,免疫荧光显微镜、RT-PCR和ELISA检测感染效率;将细胞分为5组:LV-IL-24组(感染过表达IL-24慢病毒)、LV-NC组(感染阴性对照慢病毒)、AMD3100组(采用CXCR4/CXCL12轴阻滞剂AMD3100进行培养)、LV-IL-24+AMD3100组(采用AMD3100进行培养的感染过表达IL-24慢病毒的细胞)、阴性对照组(正常培养的MDAMB-231细胞);Transwell、划痕实验和Annexin V-FITC细胞凋亡实验检测上述各组细胞侵袭、迁移及凋亡;Western blot检测各组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平及凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达。结果:CXCR4与CXCL12在乳腺癌组织中的表达均显著高于正常乳腺组织,且二者表达呈正相关;与MCF-10A细胞相比,CXCR4在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453及MDA-MB-231中表达明显增加(P<0.05),以MDA-MB-231最为显著(P<0.01)。转染过表达IL-24的慢病毒后,MDA-MB-231细胞IL-24 mRNA与蛋白表达均显著增加(P<0.05);与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞侵袭、迁移能力均显著降低(P<0.05),而凋亡率明显提高(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),而凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达明显增加(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01)。结论:乳腺癌细胞中过表达IL-24可抑制CXCR4表达,通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路降低肿瘤细胞侵袭、迁移能力,促进其凋亡,联合使用CXCR4/CXCL12阻滞剂AMD3100可显著提高IL-24的上述抑癌效应。     

胎膜组织人β防御素2、核因子KB p65、Toll样受体-4表达与未足月胎膜早破孕妇绒毛膜羊膜炎发生的关系

目的 探讨胎膜组织人β防御素2(HBD-2)、核因子κB p65(NF-κB p65)、Toll样受体-4(TLR-4)表达与未足月胎膜早破(PPROM)孕妇绒毛膜羊膜炎发生的关系。方法 选取铜仁市人民医院2019年5月-2020年12月106例PPROM孕妇，根据分娩时胎膜组织病理结果分为绒毛膜羊膜炎组(n=51)、非绒毛膜羊膜炎组(n=55),并将绒毛膜羊膜炎组按照炎症程度分为轻度炎症组(n=16)、中度炎症组(n=18)、重度炎症组(n=17)三个亚组，观察不同组别胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平，通过绘制受试者工作曲线(ROC)评价三项指标对疾病的诊断评估价值，分析PPROM孕妇发生绒毛膜羊膜炎的危险因素。结果 绒毛膜羊膜炎组胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平高于非绒毛膜羊膜炎组(P<0.05);胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4 mRNA表达水平联合检测评估PPROM合并绒毛膜羊膜炎ROC曲线下面积为0.906,高于各项指标单独检测ROC曲线面积0.787、0.818、0.759(P<0.05);Logistic回归分析显示妊娠期肥胖、合并阴道炎症、合并妊娠期糖尿病、HBD-2 mRNA高表达、NF-κB p56 mRNA高表达、TLR-4 mRNA高表达是PPROM孕妇发生绒毛膜羊膜炎的影响因素(P<0.05)。结论 PPROM合并绒毛膜羊膜炎孕妇胎膜组织HBD-2、NF-κB p56、TLR-4表达水平升高，其升高趋势是PPROM合并绒毛膜羊膜炎发生的影响因素，三者结合可作为疾病诊断的生物标志物。     

胶质淋巴系统——脑部疾病机制研究新方向

胶质淋巴系统是一个主要由星形胶质细胞水通道蛋白4介导的依靠动脉、静脉周围血管间隙的脑脊液-脑组织液交换流动的系统，是阿尔茨海默病、脑卒中、帕金森病、失眠、抑郁症等脑病的共同特征，是一条新的脑代谢途径，可以清除包括β-淀粉样蛋白、乳酸在内的代谢产物。本文综合分析了全球有关胶质淋巴系统在脑部疾病的研究，得出：胶质淋巴系统可能为神经退行性疾病等发病机制和诊治策略研究带来新视角；胶质淋巴系统有望为一些脑部疾病诊断提供新的有效证据；胶质淋巴系统可能是脑部疾病治疗给药方式的新途径。     

刺槐素通过调控TLR4通路对干眼症大鼠的保护作用及其机制研究＊

目的 研究刺槐素对干眼症（DED）大鼠的保护作用及可能的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白组（不做处理）；模型组；0.1% SH组；刺槐素0.1%、0.25%、0.5%组。每组10只，除正常组外，每日4次皮下注射12.5 mg/天氢溴酸东莨菪碱（SCOP），共7天。所有的药物均为在眼球表面局部给药，每只眼睛20 μL，每天4次。通过泪液分泌实验检测各组大鼠泪液分泌情况，通过角膜荧光染色检测各组大鼠角膜表面缺损情况，过碘酸雪夫试剂（PAS）染色观察结膜杯状细胞数量，酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠角膜组织中炎症反应和氧化应激相关指标含量。免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠角膜组织中Toll样受体4（TLR4）通路相关蛋白TLR4、髓样分化因子88（MyD88）、核因子κB p65（NF-κB p65）、Pyrin域蛋白3（NLRP3）蛋白表达。结果 与正常组相比，模型组大鼠泪液分泌量、结膜杯状细胞数量明显减少，角膜荧光素染色评分显著升高，但角膜新血管生成评分减少，同时角膜组织中白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IL-10、丙二醛（MDA）水平上调，而超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量则下调，TLR4、MyD88、NLRP3、p-NF-κB p65蛋白相对表达量均升高（P<0.05）；与模型组相比，经刺槐素0.25%、0.5%组治疗后，大鼠泪液分泌量、结膜杯状细胞数量明显增加，角膜荧光素染色评分显著降低，角膜新血管生成评分显著增加，同时角膜组织中IL-1β、TNF-α、IL-10、MDA水平下调，而SOD和GSH-Px含量则上调（P<0.05），尤其是刺槐素0.5%组上述指标变化更明显，而且角膜组织中TLR4、MyD88、NLRP3、p-NF-κB p65蛋白相对表达量较模型组显著降低（P<0.05）。结论 刺槐素对干眼症大鼠具有保护作用，其保护机制与抑制干眼症大鼠的氧化应激反应、炎症反应和TLR4/MyD88/NLRP3通路活性有关。     

Hp感染性胃癌组织中TLR2、TLR4的表达及其临床意义

【摘要】目的：探讨Hp感染性胃癌组织中TLR2、TLR4的表达及其临床意义。方法：选取2013年9月至2015年3月我院收治的胃癌患者128例[取病灶组织128例（病灶组）和癌旁正常组织90例（癌旁组）]和胃黏膜增生患者（增生组，68例）。测定胃癌患者病灶组织中Hp感染情况，并按检查结果分为Hp阳性组（68例）和Hp阴性组（60例）；并采用SP法检测两组患者病理组织中TLR2、TLR4的表达情况。并分析TLR2、TLR4的表达与胃癌患者临床病理特征的关系；采用Cox回归模型分析Hp感染性胃癌患者预后影响因素；采用ROC曲线分析预测Hp感染性胃癌患者的价值；采用Kaplan-Merier进行生存分析。结果：胃癌组TLR2、TLR4的阳性率均显著高于癌旁组和增生组（P<0.05）；Hp阳性组TLR2、TLR4的阳性率均显著高于Hp阴性组（P<0.05）；Spearman相关性分析结果显示，Hp感染水平与TLR2（r=0.697，P=0.00）和TLR4（r=0.684，P=0.00）均呈显著正相关（P<0.05）；TNM分期越高、分化程度越高和伴淋巴结转移者其Hp阳性率TLR2和TLR4的阳性率明显更高（P<0.05）；多因素Cox回归结果显示，TNM分期、分化程度、淋巴结转移、TLR2阳性、TLR4阳性均为影响GC患者死亡的独立危险因素（P<0.05）；ROC结果显示，拟合TLR2、TLR4预测GC患者预后的灵敏度和特异性高达92.31%和91.67%；TLR2阳性患者中位生存期21个月，TLR2阴性患者中位生存期36个月；TLR4阳性患者中位生存期23个月，TLR2阴性患者中位生存期37个月（P<0.05）。结论：Hp感染是胃癌发生的高风险因素，Hp感染性胃癌中TLR2、TLR4的表达上调，且TLR2和TLR4可作为Hp感染性胃癌早期诊断和预后评估的可靠血清标志物。     

女性致密性骨炎血清骨转换生化标志物水平变化研究

背景 致密性骨炎（OCI）和其他疾病有时难以鉴别，探讨血清骨转换生化标志物可为OCI的鉴别诊断提供依据。 目的 探索女性OCI患者的血清骨转换生化标志物的水平变化及临床意义。 方法 回顾性选取2013年6月至2022年2月在北京积水潭医院门诊及住院诊断为OCI的61例女性患者作为观察组，年龄15~50岁，平均（33.8±6.6）岁，病程2周~15年。选择同期61例女性体检健康者作为对照组，年龄15~48岁，平均（35.6±7.6）岁。比较两组一般临床资料和血清骨转换生化标志物水平，并对血清骨转换生化标志物与病情相关指标进行相关性分析。 结果 观察组血清白蛋白（45.4±2.9）g/L低于对照组（46.5±2.8）g/L（t=2.190，P<0.05）。血清骨转换生化标志物比较结果显示，观察组血清1型胶原羧基末端肽β特殊序列（β-CTX）〔0.28（0.23，0.37）μg/L〕、N-端骨钙素（OC）〔13.1（11.2，16.2）μg/L〕、25-羟维生素D3〔25-（OH）VD3〕〔（14.1±5.1）μg/L〕低于对照组〔0.36（0.29，0.48）μg/L，15.6（13.7，17.3）μg/L，（17.5±6.6）μg/L〕（Z=-2.983、-3.255，t=3.081，P<0.05）。长病程亚组OC水平〔14.6（12.4，18.5）μg/L〕高于短病程亚组〔11.7（10.2，14.0）μg/L〕（Z=-2.407，P<0.05）。多孕亚组β-CTX〔0.25（0.22，0.32）μg/L〕、OC水平〔12.2（10.3，15.0）μg/L〕低于非多孕亚组〔0.33（0.26，0.44）μg/L、13.4（12.0，18.8）μg/L〕（Z=-2.486、-1.897，P<0.05）。相关性分析显示，观察组血清1型前胶原氨基端延长肽（tP1NP）与妊娠次数、生产次数均呈负相关（rs=-0.276、-0.298，P<0.05），OC与体质指数（BMI）、视觉模拟评分法（VAS）评分、妊娠次数均呈负相关（rs=-0.284、-0.374、-0.360，P<0.05），25-（OH）VD3水平与BMI呈正相关（rs=0.275，P<0.05）。 结论 女性OCI患者血清OC、β-CTX水平明显降低，可为鉴别其他疾病提供依据；血清OC水平可以反映OCI患者的严重程度，同时OC水平与患者妊娠次数相关；tP1NP与妊娠次数、生产次数相关。     

Gangliosides in nervous system development,regeneration, and pathologies

Gangliosides, sialic acid-containing sphingolipids, are major constituents of neuronal membranes. According to the number of sialic acids and the structure of the oligosaccharide chain, gangliosides can be classified as simple or complex and grouped in different ganglio-series. Hundreds of gangliosides have been identified in vertebrate cells, with different expression patterns during development and related to several physiological processes, especially in the nervous system. While GD3 and its ...