视蛋白3调控人真皮成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白生成

目的 研究视蛋白3在正常人真皮成纤维细胞中对Ⅰ型胶原蛋白生成的影响及其可能的机制。方法 取小儿包皮真皮成纤维细胞分离、培养、传代，至3～5代，用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别检测视蛋白1～5的表达，细胞免疫荧光检测视蛋白3及Ⅰ型胶原蛋白表达及定位。设计针对人视蛋白3的小干扰RNA,利用脂质体转染入正常人真皮成纤维细胞，分别用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检验视蛋白3抑制效率。成功下调视蛋白3后，用荧光定量PCR、免疫印迹法、酶联免疫吸附测定及细胞免疫荧光检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化；通过CCK-8及EDU检测细胞增殖活力，流式细胞仪检测细胞周期，Transwell检测细胞迁移能力；通过蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT及磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的表达情况。最后抑制通道蛋白AKT的磷酸化，通过蛋白免疫印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化。结果 视蛋白1～5均在正常人真皮成纤维细胞中表达，其中视蛋白3基因及蛋白表达水平较其他视蛋白表达高，差异有统计学意义(P<0.05)。下调正常人真皮成纤维细胞中视蛋白3后，细胞合成及分泌Ⅰ型胶原蛋白水平降低，差异有统计学意义(P<0.05);...     

红烧菜怎么做

我平时做菜喜欢红烧,感觉更入味,但每次做出来都没有餐馆的那么诱人。请问,红烧菜应该怎么做?有什么关键点吗?四川孙先生孙先生:红烧主要是借助于调味品(主要是酱油)而区别于白烧和干烧,其菜肴特点色泽红亮,口味鲜浓,汁少而稠。红烧菜一般都有熟处理过程。根据原料的不同形状、质地和菜肴要求,有炸、煎、煸炒、焯水等烹调方法。熟处理不但可以缩短正式烹调时间,还可减少原料中的腥味,使原料容易上色、入味,增加菜肴美观。鱼类一般要求两面煎黄,目的在于去腥,使鱼皮皱缩,容易入味、上色;禽类要求煸炒,使原料中水分蒸发些,容易使调味品渗入其中。     

不同力学刺激对骨性关节炎软骨Ⅰ型胶原蛋白产生的影响

[目的]观察异常力学刺激对骨性关节炎病程中软骨I型胶原蛋白表达的影响,探讨骨性关节炎软骨中I型胶原蛋白的异常表达机理。[方法]18只SD大鼠,将动物随机分为A(力学刺激组)、B(对照组)、C(假手术组)3组,每组6只。A、B组按照标准方法行前交叉韧带横断术造骨性关节模型,C组作为假手术组。术后1周将A组与C组置于动物跑台上给予力学刺激:8米/min,30 min,5次/周,B组养在鼠笼中正常饮食、喝水、活动。术后5周处死所有动物,取样行HE染色和番红O-快绿染色,免疫组化法检测I型胶原在各组关节软骨中的表达;根据改良Mankin评分对标本进行病理分期;IPP软件分析各组I型胶原蛋白表达情况,研究异常力学刺激与I型胶原蛋白表达的相关性。[结果]A组膝关节软骨I型胶原蛋白的表达高于番红O-快绿染色,示A组软骨退化程度最高,B组次之,C组最低;Mankin评分A组高于B、C两组(P0.05),C组最低。[结论]异常的力学刺激与骨性关节炎病程中I型胶原蛋白的产生具有相关性,可能是导致骨性关节炎软骨中I型胶原蛋白产生的原因之一。     

1型糖尿病动脉粥样硬化与脂联素、转化生长因子β_1及Ⅳ型胶原蛋白的关系

1型糖尿病动脉粥样硬化的发病率及患病率逐年上升,已严重影响患者生活质量。由于其发展迅速、病情严重且发病机制尚未明确,越来越受到人们的关注。脂联素、转化生长因子β1、Ⅳ型胶原蛋白参与了1型糖尿病动脉粥样硬化形成、发展中的多个关键性的病理过程。该文通过探讨脂联素、转化生长因子β1、Ⅳ型胶原蛋白三者的关系及其对1型糖尿病动脉粥样硬化的影响,为1型糖尿病大血管并发症的预防、诊断、治疗指明新的研究方向。     

烫伤应急治疗人造皮肤

<正>最近,日本农业生物资源研究所与日本佐贺大学合作,开发出了一种创可贴型人造皮肤,用于烫伤应急治疗,有助于预防创伤后出现显著疤痕。该人造皮肤等是一种用猪的胶原蛋白开发成功的,由高密度胶原蛋白纤维形成的薄膜,强度很高。重度烫伤患者如需接受皮肤移植的话等待移植的皮肤需要培养20天左右,因此在植皮手术前可用该人造皮肤进     

中药颗粒对染矽尘大鼠肺组织 TGF-β1 / Smads通路的调节作用

目的研究中药颗粒对染矽尘、Col-Ⅰ的影响,并从TGF-β1/Smads通路探讨其可能的作用机制。方法将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和中药高、低剂量组,每组16只。对照组大鼠气管灌注1.0 ml生理盐水,其余组大鼠均给予1.0 ml 5%无菌SiO_2悬浊液;造模后第2天开始给大鼠灌胃给药,1次/d,高剂量组、低剂量组大鼠分别灌胃1 000 mg/kg、500 mg/kg中药,对照组、模型组给予0.9%生理盐水。于灌胃第14、28天处死大鼠,并检测大鼠肺组织Col-Ⅰ、TGF-β1的含量及TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达水平。结果造模后第14天和第28天,模型组大鼠肺组织Col-Ⅰ、TGF-β1含量高于对照组,中药干预后Col-Ⅰ、TGF-β1含量有所降低,不同剂量组间差异均具有统计学意义(P0.05);模型组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3蛋白的表达水平高于对照组,中药干预后TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3蛋白的表达水平有所降低,不同剂量组间差异也具有统计学意义(P0.05)。结论中药颗粒可以抑制SiO_2诱导的大鼠肺组织Col-Ⅰ含量的升高,且该抑制作用可能与中药颗粒对大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的调节有关。     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊的制备

目的制备蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。方法反相乳化法制备纳米胶囊。以CaCl2溶液浓度、蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例、壳聚糖溶液浓度为影响因素,粒径、Zeta电位为评价指标,正交试验优化制备工艺。然后,考察纳米胶囊微观形态、载药量、包封率、药物释药性能。结果最佳条件为CaCl2溶液浓度20 mmol/L,蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白与海藻酸比例1∶1,壳聚糖溶液浓度1%,所得纳米胶囊大小均匀,分散性好,表面光滑饱满,平均粒径(210±5.12)nm,PDI 0.16±0.03,Zeta电位(-25.46±0.56)mV,载药量(16.35±1.35)%,包封率(83.69±4.31)%,人工胃液中24 h内累积释放率(81.86±3.15)%。结论该方法稳定可靠,可用于制备具有良好的体外缓释性能的蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白海藻酸钙-壳聚糖纳米胶囊。     

健脾滋肾开郁散结法对糖尿病肾病大鼠肾组织表达的影响

目的:观察健脾滋肾开郁散结方对糖尿病肾病大鼠肾组织中层粘连蛋白(laminin,LN)及和Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ,ColⅣ)表达的影响,初步揭示健脾滋肾开郁散结法防治DN(diabetic nephropathy,DN)的作用机制。方法:采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素(STZ)方法建立DN大鼠模型,运用免疫组化法测定肾组织中LN和ColⅣ的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血糖、血肌酐、甘油三酯、24 h尿蛋白均明显增加(均P0.01),肾组织中LN及ColⅣ表达明显升高(均P0.01),中药治疗组与阳性对照组相比差异均无显著性(P0.05);与模型组比较,中药治疗组空腹血糖、24 h尿蛋白、Scr、甘油三酯均显著降低(均P0.01),肾组织中LN及ColⅣ表达显著降低(均P0.01)。结论:健脾滋肾开郁散结中药干预治疗可降低尿蛋白,改善肾纤维化,可能是通过下调肾脏LN、ColⅣ的表达延缓肾脏纤维化进程。     

吡非尼酮对大鼠坐骨神经损伤后瘢痕形成及功能恢复的实验研究

目的探讨大鼠坐骨神经损伤后细胞因子抑制剂吡非尼酮对神经吻合口处瘢痕形成及神经功能恢复的影响。方法选用健康雄性SD大鼠60只,制作右侧坐骨神经损伤模型,术后随机分为3组,分别为对照组、低剂量组和高剂量组,每组20只,分别给予0 mg/kg、25 mg/kg、100 mg/kg吡非尼酮混悬液灌胃。术后于第4、12周分别行坐骨神经功能指数、神经电生理测定,然后取材进行Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色,最终对实验结果进行图像分析和统计学处理。结果坐骨神经功能指数:术后第4周,三组之间两两比较,差异无统计学意义(P0.05);术后第12周,低剂量组优于对照组(P0.01),高剂量组优于低剂量组(P0.01);神经电生理:术后第4周,三组之间神经传导速度、潜伏期、波幅两两比较,差异无统计学意义(P0.05);术后第12周,与对照组相比,低剂量组和高剂量组神经传导速度显著增快(P0.05),潜伏期缩短(P0.05),波幅升高(P0.05),且高剂量组优于低剂量组(P0.05);Ⅰ型胶原蛋白沉积量:术后第4周,与对照组相比,低剂量组和高剂量组神经吻合口处Ⅰ型胶原蛋白沉积量明显减少(P0.01),低剂量组与高剂量组相比,差异无统计学意义(P0.05);术后第12周,与对照组相比,低剂量组和高剂量组神经吻合口处Ⅰ型胶原蛋白沉积量明显减少(P0.01),且高剂量组比低剂量组减少更明显(P0.05)。结论吡非尼酮能明显减少神经吻合口处Ⅰ型胶原蛋白沉积,有效抑制瘢痕形成,促进神经功能恢复。