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1.
目的:评估基于分离胶的两种前处理方法联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix?assisted laser desorption ionization?time of flight mass spectrometry,MALDI?TOF MS)直接鉴定血培养阳性病原菌的临床应用价值。方法:收集2020年5—11月南京医科大学第一附属医院血培养阳性标本302例,分离胶?皂甙法和分离胶沉淀法分别处理后对阳性血培养标本进行快速鉴定,结果分别与培养鉴定结果比较。结果:分离胶?皂甙法可在45 min内完成鉴定,分离胶沉淀法需20 min;单数菌感染标本288例,使用两方法直接鉴定的准确率均为86.81%(250/288),其中两方法分别鉴定革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、革兰阳性杆菌、真菌的准确率差异无统计学意义(P > 0.05);复数菌感染标本14例,仅分离胶?皂甙法1例与培养鉴定结果一致,其余标本两种方法均仅可准确鉴定其中的一种细菌。结论:两种基于分离胶的前处理方法联合质谱均可直接、快速、准确地鉴定血培养病原菌,分离胶沉淀法可作为本实验室血培养快速鉴定常规的前处理方法。  相似文献   
2.
3.
4.
目的:对洋金花正丁醇部位化学成分进行分离鉴定研究。方法:采用硅胶柱色谱,ODS柱色谱,硅胶薄层色谱,高效液相色谱法(HPLC)进行分离纯化,结合1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱学数据进行结构鉴定。结果:从洋金花药材粗提液中提取到了11个化合物。分别鉴定为:生物碱类:(S)-(-)-2-phenylpropionitrile(1)、merobatzelladine A(2)、木兰花碱(3)、crotonine(4)、cyclo(Phe-Leu)(5)、pyrrolezanthine(6)、(E,E)-N,N-dityramin-4,4''-dihydroxy-3,5''-dimethoxy-β,3''-bicinnamamide(7)、N1,N5,N10 tri-p-coumaroylspermidine(8)、7-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-me-thoxyphenyl)-N2,N3-bis(4-hydroxyphenethyl)-6-methoxy-1,2-dihydronaphthalene-2,3-dicarboxa-mide(9)。其他类:p-hydroxyb-enzoyl p-coumaric acid anhydride(10)、methyl(Z)-9-octadeceno-ate(11)。结论:从茄科中首次分离得到11种化合物。  相似文献   
5.
目的 比较基因芯片技术与基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在非结核分枝杆菌(NTM)菌种鉴定上的差异,为临床快速诊断NTM病提供帮助。方法 应用BACTEC(TM) MGIT 960仪器对保存的NTM菌株进行液体培养法复苏;分别使用基因芯片法、质谱法与16s rRNA测序对74株NTM进行菌种鉴定;以16s rRNA测序作为参考方法分析比较基因芯片法与质谱法两种方法鉴定结果的差异与优劣势。结果 通过测序,74株NTM鉴定结果为胞内分枝杆菌37株,脓肿分枝杆菌19株,M.marseillense/M.yongonense 7株,鸟分枝杆菌5株,堪萨斯/胃分枝杆菌2株,M.chimaera、哥伦比亚分枝杆菌、海分枝杆菌、猪分枝杆菌均1株。基因芯片法与测序法相比有12株结果不同,准确率为83.8%,鉴定到复合群准确率为95.9%; MALDI-TOF MS有2株无结果,与测序相比有7株结果不同,准确率为87.8%,鉴定到复合群准确率为97.3%。检测时间上,基因芯片法鉴定1个样本需要6 h,质谱法则仅需1 h。结论 与16s rRNA测序金标准相比,两种鉴定方法鉴定到菌种复合群的准确率均在95%以上,展现两种方法在NTM菌种鉴定上优异的性能,两种方法均能为临床更快速准确鉴定NTM提供支持。质谱法在NTM鉴定的菌种谱、菌种分辨能力、时间和经济成本上均要优于基因芯片法,更适合实验室常规开展。  相似文献   
6.
目的 建立非人灵长类动物冠状动脉原代内皮细胞的分离和培养方法,为研究人冠状动脉内皮细胞提供细胞模型。方法 无菌分离猕猴冠状动脉,胶原酶短暂消化后采用组织黏附法分离猕猴冠状动脉原代内皮细胞,利用流式细胞术检测并分选CD31阳性细胞,确定内皮细胞纯度;经前列腺素E2(PGE2)刺激后,以CCK-8法和高内涵细胞成像法分别检测猕猴冠状动脉原代内皮细胞活力和增殖能力、以Transwell法和Matrigel胶法分别检测猕猴冠状动脉原代内皮细胞迁移能力和体外成管功能。结果 猕猴冠状动脉原代细胞在10~14 d细胞覆盖培养瓶面积的80%左右,细胞呈不规则多边形和铺路石状。流式检测其纯度为31.7%左右,分选后利用流式细胞术再次检测内皮细胞纯度,达95%以上;PGE2能显著上调猕猴冠状动脉原代内皮细胞的增殖、迁移和成管能力。结论 该研究成功建立猕猴冠状动脉原代内皮细胞分离培养方法,通过功能研究表明猕猴冠状动脉原代内皮细胞可以作为模拟人冠状动脉内皮细胞的体外细胞模型。  相似文献   
7.
【目的】对市售54批次蜂蜜中的微生物污染情况进行调查分析。【方法】依据食品安全国家标准对蜂蜜中菌落总数、霉菌计数和嗜渗酵母计数进行检测和判定,通过形态学、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱、大亚基单元核糖体RNA基因序列对不合格样品中的细菌和真菌进行鉴定和分析。【结果】共3批次蜂蜜微生物超标,其中菌落总数超标1批次,检出包括芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus sp.)和短芽孢杆菌属(Brevibacillus sp.)中的多种细菌;霉菌计数超标2批次,样品来源于同一生产企业,均检出曲霉(Aspergillus sp.)且微生物序列同源性高度一致,可能来自同一污染源。【结论】蜂蜜微生物污染种类多,蜂蜜生产企业应加强蜂蜜生产过程的微生物控制,避免重复污染。  相似文献   
8.
<正>Xg血型系统是目前已知的43种人类红细胞血型系统中的第12种,包含2种抗原Xg(XG1)和CD99(XG2)[1]。抗Xga抗体最初由Mann等[2]在一位多次输血的男性身上发现。抗Xga抗体常常表现为天然抗体[3],通常是IgG型,在抗人球蛋白介质中反应。关于抗Xga抗体的报道少见,近期本实验室发现1例抗Xga抗体引起交叉配血不合,现报告如下。1材料与方法1.1研究对象患者男,37岁,无输血史,头部外伤,血红蛋白64 g/L,因不规则抗体筛查阳性,由医院送检至本实验室做交叉配血试验。  相似文献   
9.
目的 调查酒泉市市售羊肉多杀性巴氏杆菌污染情况,为该病的防控提供科学依据。方法 于2019年3-9月和2020年5-9月从酒泉市不同地区随机采集市售羊肉样品共257份,对样品中多杀性巴氏杆菌进行分离鉴定及耐药性分析。结果 257份被检测样品中有16份样品(6.22%)为多杀性巴氏杆菌阳性,其中2019年和2020年调查样品检出率分别为9.17%和3.65%;且农贸市场来源样品检出率高于超市和屠宰场,分别为8.49%、4.55%和3.13%。PCR法鉴定结果共发现3种血清型,其中A型、B型和D型所占比例分别为56.25%、31.25%和12.50%;分离获得菌株对14种常见抗生素耐药率为0.0%~100.0%,对林可霉素和甲氧嘧啶耐药率最高,分别为100.0%和81.25%。结论 酒泉市市售羊肉多杀性巴氏杆菌污染情况较为严重,且分离菌株对部分抗生素耐药性严重,相关部门应引起重视。  相似文献   
10.
目的:应用PEG 6000提取滑膜组织中外泌体并进行鉴定。方法:收集于北京中医药大学第三附属医院骨科行膝关节镜或关节置换手术过程中废弃的滑膜组织,用8%PEG 6000溶液对滑膜组织分泌的外泌体进行富集、提取,应用透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)、Western Blot对外泌体的形态、粒径大小以及标志蛋白CD9、CD63和Flotillin-1进行检测。结果:应用PEG 6000溶液可成功提取出富集类圆形、盘状囊泡的提取物,NTA鉴定显示粒径为(98.6±10.8)nm,Western Blot显示外泌体标志蛋白CD9、CD63和Flotillin-1均呈阳性高表达。结论:通过对提取物的形态、粒径大小以及标志蛋白分析证实PEG 6000从滑膜组织提取到的物质为外泌体,为以后研究滑膜组织外泌体的功能和机制提供了方法学基础。  相似文献   
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