经聚乙烯亚胺钝化的荧光碳点负载阿霉素抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移侵袭的治疗研究

目的研究利用经聚乙烯亚胺（PEI）钝化的荧光碳点（CD）装载阿霉素（DOX）进行药物递送，旨在增加DOX对非小细胞肺癌的治疗作用，减少DOX的心肌毒性。 方法通过一步微波加热法将甘油和PEI的混合物制备成CD-PEI，并通过静电效应将DOX装载至CD-PEI。采用CCK8实验检测CD-PEI-DOX对非小细胞肺癌细胞A549的增殖能力的影响；Transwell实验评估CD-PEI-DOX对A549细胞迁移侵袭能力的影响；最后通过体内动物实验评估CD-PEI-DOX的心肌毒性以及对非小细胞肺癌皮下肿瘤生长的抑制效果。 结果体外细胞实验证实，对比单纯的DOX处理组，CD-PEI-DOX对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移侵袭能力的抑制作用更为显著。体内实验证实，CD-PEI-DOX纳米复合物治疗组小鼠心肌细胞结构完整，并且能有效抑制小鼠皮下肺癌肿瘤的生长。 结论经PEI钝化的荧光碳点负载阿霉素能显著提高DOX对非小细胞肺癌的治疗效果，并减少DOX对心脏的毒性作用。运用CD-PEI纳米颗粒改善化疗药物递送的治疗方案取得了初步证实，这可为肺癌化学治疗提供新思路，具有广大的临床应用前景。     

外泌体对阿霉素诱导的心脏毒性治疗的研究及应用进展

阿霉素（doxorubicin，DOX）是一种蒽环类药物，广泛用于治疗各种癌症，但其长期临床使用经常受到心脏毒性的阻碍。然而，DOX 诱导的心脏毒性（doxorubicin-induced cardiotoxicity，DIC）的确切机制以及最佳心脏保护治疗方案尚不明确。随着蛋白质组学、基因组学和高通量测序技术的发展，EXO（exosome，EXO）在DIC的治疗方面脱颖而出。本文综述了 DIC 的主要发生机制，探讨了 EXO 在 DIC 治疗中的机制，分析了 EXO 作为天然的低免疫原性递送载体对 DIC 治疗的间接作用以及 EXO 中的一些内容物对 DIC 治疗的直接作用，并进一步讨论了 EXO 作为一种新型 DIC治疗策略所存在的优势及不足之处，以期为制定减轻化疗药物相关不良副作用的策略带来一些新的见解。     

miR-513a-5p慢病毒载体的构建及其对人骨肉瘤细胞放疗敏感性的影响

目的:构建miR-513a-5p慢病毒过表达载体，转染人骨肉瘤细胞株，观察miR-513a-5p对人骨肉瘤细胞放疗敏感性的影响。方法:PCR法扩增人miR-513a-5p基因，克隆入pLentis-CMV-GFP-MCS-PGK-PURO载体获得重组质粒pLentis-miR513a，双酶切鉴定并测序后将正确的重组质粒和对照质粒转染293FT细胞制备慢病毒，分别转染骨肉瘤HOS和U2OS细胞，qRT-PCR法及荧光显微镜鉴定转染结果。克隆形成实验、MTT法检测miR-513a-5p高表达HOS和U2OS细胞在X射线照射下细胞存活情况。结果:双酶切及测序结果确定成功构建miR-513a-5p慢病毒载体pLentis-miR513a。qRT-PCR结果提示，转染骨肉瘤细胞株后miR-513a-5p表达显著升高。克隆形成实验结果显示miR-513a-5p高表达后骨肉瘤细胞在X射线照射下细胞增殖减慢。MTT结果提示miR-513a-5p高表达骨肉瘤细胞经X射线照射后细胞存活减少。结论:成功构建了miR-513a-5p慢病毒载体，建立了高效稳定表达miR-513a-5p的骨肉瘤细胞株，高表达miR-513a-5p能显著增加X射线照射后骨肉瘤细胞的放疗敏感性。     

腺病毒介导的Hes1基因抑制肝细胞癌细胞的增殖与迁移CSCD

目的探讨Hes1基因对肝细胞癌细胞系Hep1-6细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法通过重组腺病毒载体介导Hes1基因在Hep1-6细胞系中过表达,随后测定细胞克隆形成率、增殖速率及体外迁移与侵袭能力的改变。结果Hep1-6细胞分别感染Ad-Hes1和阴性对照Ad-GFP后,感染Ad-Hes1的细胞系克隆形成数显著少于对照组(P<0.001);感染病毒6天后,CCK-8检测感染Ad-Hes1的细胞系在OD450 nm的吸光度值显著低于对照组(P<0.01);感染Ad-Hes1的细胞系24 h和48 h的划痕愈合率显著低于对照组(P<0.001);感染Ad-Hes1的细胞系在Transwell小室培养48 h后迁移进入Transwell下室的细胞数量显著低于对照组(P<0.001);感染Ad-Hes1的细胞系在铺有Matrigel基质胶的Transwell小室培养48 h后侵袭进入Transwell下室的细胞数量显著低于对照组(P<0.01)。结论Hes1有抑制Hep1-6细胞增殖、迁移与侵袭的作用。     

外泌体作为靶向治疗载体的研究进展

外泌体是来源于细胞内膜的纳米级的囊泡，包含有核酸、蛋白和脂质等生命物质，作为一种细胞间交流的机制，在生命活动中发挥着重要作用。相对于脂质体载体，外泌体更稳定，生物相容性好，免疫原性低，而且可以渗透生物屏障，例如血脑屏障、胎盘屏障等。重点介绍外泌体载体靶向性的基础、外泌体载体装载负荷的方法及外泌体载体目前的应用进展和前景。     

细胞-纳米药物载体递送系统在肿瘤诊疗中的应用

目前，针对肿瘤治疗药物在体内应用中的局限性，出现了许多高效的药物递送系统的研究，其中纳米药物载体技术和细胞药物载体技术较为热门，并取得了许多成果。纳米药物载体具有的优点，如防止药物发生降解及灭活，增加药物的靶向性，降低药物的毒副作用，可量产等。细胞载体更是利用细胞本身固有的特性，具有主动靶向肿瘤部位、低免疫原性和穿过体内生理屏障等优点，在药物递送研究中有广阔的应用前景，但是仍然存在很多问题及不足。研究人员创造性地将两者结合，使他们的优势互补，极大地强化了递送药的效率，增加了体内靶向性，降低了周围组织的细胞毒性等。本文从近几年来细胞-纳米药物载体系统研究的文献中，总结了红细胞、干细胞、单核/巨噬细胞、T细胞、树突状细胞（dendritic cell，DC）等作为纳米药物细胞载体的优缺点及目前的应用现状。     

氢氧化钙糊剂与根管内感染控制

感染控制对根管治疗的成功至关重要。尽管随着器械及设备的进步，对根管的清理及成形取得了很大的进展；然而，由于根管系统解剖结构错综复杂，使得获取清洁根管面临各种问题。例如：机械预备的宽度有限，不能彻底清理感染牙本质；冲洗技术的运用虽然可以去除根管器械预备后形成的玷污层，但对细菌内毒素的清除还是难以达到理想的效果，而残留的微生物、毒素等若得不到清除可能会在根尖周组织形成持续感染。因此，除外机械预备和冲洗，根管封药也是感染根管治疗过程中的重要步骤。氢氧化钙糊剂以其高效的抗菌作用在临床得到广泛使用。文章将对根管封药的必要性、氢氧化钙的作用机制及临床应用做一介绍。     

脂质纳米粒-mRNA递送系统及其在嵌合抗原受体T细胞治疗中的应用

尽管嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗在血液系统恶性肿瘤患者中取得了显著的临床疗效，但需要进一步优化。脂质纳米粒（LNP）-信使核糖核酸（mRNA）递送系统作为一种非病毒性基因载体运用于CAR-T细胞治疗研究中，一方面通过LNP将密封蛋白-6 mRNA靶向递送至抗原提呈细胞，从而实现抗原提呈细胞辅助性增强密封蛋白-6靶向的CAR-T细胞的功能，以进一步诱导对实体瘤的清除；另一方面，通过LNP将成纤维细胞激活蛋白（FAP）CARmRNA靶向递送至T细胞，实现体内FAP靶向的CAR-T细胞的制备，以通过阻断心脏纤维化过程达到治疗急性心肌损伤的目的。在CAR-T细胞研究和治疗中，LNP-mRNA递送系统具有不与细胞基因组整合、价格便宜、毒副作用小及可修饰等优点，亦存在蛋白瞬时表达导致调控细胞功能的持久性不足及制备等方面的技术局限性。本文综述了LNP-mRNA递送系统及其在CAR-T细胞治疗中的应用研究。     

Nrf2点突变稳转肺癌细胞株构建及鉴定

目的构建核转录因子Nrf2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)点突变逆病毒稳转细胞株,并检测其在A549人肺癌细胞中的表达效果,为基因靶向治疗提供研究基础。方法针对人Nrf2基因序列,扩增目的片段并与Teasy载体连接,构建Nrf2-Teasy重组质粒,用Fast Mutagenesis System对Nrf2进行定点诱变,使其第2号外显子有T35C和G37A的点突变。并将突变的Nrf2片段插入逆病毒载体pMSCV,构建pMSCV-MUT-Nrf2重组质粒。利用逆病毒系统将其稳转入A549肺癌细胞,运用RT-PCR技术检测Nrf2 mRNA表达水平。结果稳转后的A549目的细胞可观察到荧光,且其Nrf2 mRNA表达水平较未转染细胞显著增高。结论成功构建点突变的逆病毒质粒,并有效感染目的细胞,为进一步研究Nrf2基因突变在肺癌中的作用提供细胞模型。