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1.
目的用几种高度精细灵敏的方法检测氧糖剥夺再复氧(OGD/R)后神经元自噬流不同阶段的变化。方法原代皮质神经元细胞经过OGD/R后将实验分为OGD/R组及OGD/R+bafilomycin A1 (BafA1)组,用RFP-GFP串联荧光标记LC3基因转染检测自噬小体和溶酶体的融合情况,透射电子显微镜(TEM)观察自噬的超微结构,SQSTM1/p62结合LC3蛋白翻转实验检测p62与LC3蛋白的定量,p62免疫染色观测其分布与含量。结果荧光显微镜下OGD/R组自噬溶酶体与自噬小体比值明显增高;TEM可观测到不同阶段的自噬结构变化;可溶性p62的比值结合LC3Ⅱ/Ⅰ的比值共同反映了自噬流的活化;p62荧光染色后在BafA1组中分布居多。结论每种方法各有其优点,不同方法和指标能够精准地反映神经元OGD/R后自噬流在不同阶段的具体变化,掌握并应用好这些方法能有效从自噬角度探索中枢神经系统疾病。  相似文献   
2.
庄薇  钟宁 《广州医药》2022,(2):39-43
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素对肝癌细胞增殖凋亡是否存在影响,及该抑制作用是否与自噬相关。方法 采用MTT法检测不同浓度曲古霉素作用于肝癌HepG2细胞24 h、48 h、72 h以后肝癌细胞的增殖能力;使用流式细胞术检测不同浓度曲古霉素对HepG2肝癌细胞周期及凋亡的影响;蛋白印迹法(Western blot, WB)检测不同浓度曲古霉素对肝癌HepG2细胞中Beclin1和Bcl-2蛋白的表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR, RT-PCR)检测不同浓度曲古霉素对肝癌HepG2细胞中Beclin1和Bcl-2 mRNA的表达。结果 曲古霉素对肝癌HepG2细胞具有增殖抑制作用,与对照组相比较,其差异有统计学意义(P<0.05);通过流式细胞术检测结果显示,曲古霉素作用于肝癌HepG2细胞后,随着浓度的增加,细胞凋亡率显著上升,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR及WB实验观察到,Beclin1蛋白和mMRA的表达随着曲古霉素浓度的增加而逐渐升高,Bcl-2蛋白和mMRA的表达随着曲古霉素作用浓度的增加而逐渐降低,且与对照...  相似文献   
3.
4.
目的:探讨基于行为研究法的快速康复护理在剖宫产术后产妇中的应用效果.方法:将2020年4月1日~7月31日产科收治的150例剖宫产产妇作为对照组,实施剖宫产术后常规护理干预;将2020年8月1日~11月30日收治的150例剖宫产产妇作为实验组,在常规护理基础上实施基于行为研究法的快速康复护理干预;比较两组术后3 d产后恢复情况、母乳喂养情况、疼痛情况[采用数字疼痛评分表(NRS)]、心理状态[采用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)]及自我护理能力[采用自我护理能力量表(ESCA)].结果:实验组下床活动时间、产后排气时间均短于对照组(P<0.05);实验组乳汁分泌充足率、喂养成功率均高于对照组(P<0.05);实验组NRS评分、EPDS评分低于对照组(P<0.05),ESCA评分高于对照组(P<0.05).结论:基于行为研究法的快速康复护理干预可改善剖宫产术后产妇的产后疼痛及心理状态,提高母乳喂养质量,具有良好应用效果.  相似文献   
5.
  目的  将丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA, Tan ⅡA)封装于甘草酸(Glycyrrhizic acid, GL)中自组装得到胶束, 考察其制备工艺并对产物进行表征, 同时进行体外抗胶质瘤细胞活性评价。  方法  采用薄膜分散法制备载丹参酮ⅡA-甘草酸自组装胶束(Tan ⅡA-GL/Micelle, TGM)。测定TGM的粒径、多分散系数以及Zeta电位;透射电子显微镜观察TGM的形态特征;高效液相色谱法测定TGM的包封率;透析袋法考察TGM的药物释放情况。倒置荧光显微镜考察TGM体外跨血脑屏障(Blood-brain barrier, BBB)的能力; 定量考察细胞摄取的具体机制; MTT法考察游离Tan ⅡA、游离GL和TGM分别对鼠源性脑胶质瘤细胞GL261的细胞毒性; 流式细胞仪检测游离Tan ⅡA、游离GL及TGM对GL261的细胞凋亡作用。  结果  薄膜分散法是制备载丹参酮ⅡA-甘草酸自组装胶束的最佳工艺方法; TGM粒径约为(121.87±5.85)nm, Tan ⅡA包封率为(88.54±14.27)%, 呈类球形形态, 制剂均一稳定; 可在5 h左右释放包载药物。TGM具有良好的跨BBB能力; 脑胶质瘤细胞摄取自组装胶束的机制为通过网格蛋白介导的胞吞来进行制剂的摄取; 对于脑胶质瘤细胞GL261具有良好的细胞毒性; 细胞凋亡实验结果表明, TGM相较于Free TanⅡA、Free GL组显著提高细胞凋亡水平, 促细胞凋亡率分别由12.28%、13.32%上升至31.16%。  结论  GL与Tan IIA通过自组装形成了纳米胶束,有效克服TanⅡA生物利用度低、水溶性差等缺点。TGM可有效跨越BBB,通过网格蛋白介导的胞吞途径被脑胶质瘤细胞摄取,具有良好的细胞毒性与促细胞凋亡能力。   相似文献   
6.
目的:研究雷公藤内酯醇通过调节微小RNA-194(miR-194)表达对肝癌HepG2细胞活力、凋亡和自噬的影响。方法:将HepG2细胞分为对照组及10 nmol/L、20 nmol/L、40 nmol/L、60 nmol/L和80 nmol/L雷公藤内酯醇处理组,采用MTT法和Western印迹实验检测各组HepG2细胞的活力、凋亡及自噬蛋白表达;RT-qPCR检测各组HepG2细胞中miR-194的表达。转染miR-194模拟物(miR-194 mimic)及阴性对照(miR-194 NC)至HepG2细胞,检测miR-194 mimic和miR-194 NC在雷公藤内酯醇处理后对HepG2细胞活力的影响,Western印迹检测凋亡和自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Bax、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达。结果:与对照组相比,不同浓度的雷公藤内酯醇可抑制HepG2细胞的活力并促进其凋亡和自噬,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤内酯醇可上调HepG2细胞中miR-194的表达,并具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05),同时促使Bax/Bcl-2的比值和Caspase-3蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),使LC3和Beclin-1蛋白表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-194 mimic可增加雷公藤内酯醇对HepG2细胞活力的抑制,并进一步促进凋亡和自噬。结论:雷公藤内酯醇可能通过上调miR-194表达抑制肝癌HepG2细胞生长并促进其凋亡和自噬。  相似文献   
7.
目的:探讨双相障碍(BD)缓解期残留症状自评与他评的一致性。方法:收集240例经过急性期治疗有效的BD患者人口学资料、疾病临床特征;分别于急性期治疗后(基线)及此后的3个月和6个月时采用抑郁症状快速评估量表(QIDS-SR16)、心境障碍问卷(MDQ)自评方式与汉密尔顿抑郁量表17项(HAMD-17)、杨氏躁狂量表(YMRS)他评方式对入组者进行残留症状评估;采用组内相关系数(ICC)对连续变量做一致性检验。结果:HAMD-17与QIDS-SR16基线、3个月和6个月的总分、核心条目呈较强一致性(ICC=0.62~0.85;P均<0.01);睡眠条目在基线呈中等一致性(ICC=0.49,P<0.01),3及6个月呈较强一致性(ICC=0.65;P均<0.01);自杀条目随着缓解时间延长,一致性逐渐增强;躯体症状一致性一般(ICC=0.49~0.52;P均<0.01),且随着缓解期延长,一致性减弱。YMRS与MDQ在总分、精力充沛和/或心境高涨、冒险和/或易激惹条目上随着缓解时间延长,从基线呈一般或中等一致性(ICC=0.37~0.50;P均<0.01)到6个月呈较强一致性(ICC=0.60~0.71;P均<0.01)。结论:BD缓解期患者残留抑郁症状多见,QIDS-SR16自评结果与HAMD-17评估结果具有较强的一致性,可作为有效的评估工具;MDQ可作为缓解期筛查躁狂残留症状的工具。  相似文献   
8.
9.
肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一。近年来,我国肾癌的发病率呈逐年上升的趋势,严重威胁着人们的健康。调节性细胞死亡是由一种细胞主动有序的死亡方式,普遍存在于生命活动过程中,在维系生命活动的平衡中发挥着至关重要的作用。近期Science杂志上报道了一种新的调节性细胞死亡方式即铜死亡,进一步强化了生命体中细胞死亡的重要性。随着对调节性细胞死亡认识的不断深入,越来越多的研究显示不同的调节性细胞死亡(如铁死亡、焦亡、自噬等)均与肾癌的发生、发展密切相关。如诱导细胞铁死亡将显著抑制肾癌的侵袭和转移、并与肾癌患者的更好预后密切相关;细胞焦亡不仅可以诱导肾癌细胞死亡还可以激活抗肾癌的免疫应答;自噬在肾癌中具有“双向”作用,增强自噬可抑制肾癌细胞生长,但也可能减弱联合用药治疗的效果;抑制细胞凋亡和坏死性凋亡可以显著促进肾癌细胞的增殖、侵袭等。本文将综述铁死亡、细胞焦亡、自噬、细胞凋亡和坏死性凋亡的分子机制和在肾癌发生、发展中作用的研究进展并进行展望,为探索肾癌的发病机制和潜在的治疗靶点提供新的视角。  相似文献   
10.
[目的] 总结探究黄挺教授治疗晚期原发性肝癌的特色经验。[方法] 通过门诊跟师侍诊,收集相关医案,试从病因病机、治法方药等方面探究黄挺教授治疗晚期原发性肝癌的特色经验,并举一医案予以佐证。[结果] 黄挺教授认为晚期原发性肝癌的基本病机为正虚邪实、本虚标实,中焦脾虚、气血羸弱为本,气郁瘀阻、癌毒内盛为标,脾虚肝郁是核心病机,治疗上以健运脾土、行气揉木、解毒抑癌为基本治法,总结创拟理气健脾方,随证加减,其效甚验。所举验案乃脾虚肝郁、癌毒内盛之证,治以健运脾土、行气揉木、解毒抑癌之法,以自拟理气健脾方为底方,随证加减,标本兼顾,患者带瘤生存至今6年余,疗效颇佳。 [结论] 黄挺教授治疗晚期肝癌,紧扣脾虚肝郁之病机,总结创拟理气健脾方,以顾护脾胃为重,兼以适当祛邪,临证知常达变,随证灵活用药,疗效显著,值得借鉴学习。  相似文献   
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